豬H3K9乙?；揎椉捌鋵SHR表達調(diào)控的影響.pdf

1、卵泡刺激素(FSH)是由動物垂體前葉嗜堿性細胞合成和分泌的一種糖蛋白類促性腺激素，是促進和維持性腺正常發(fā)育和生殖功能的重要激素.FSH的生理功能是通過分布于性腺上的特異性受體—卵泡刺激素受體(FSHR)所介導(dǎo)的。FSH受體的表達要受許多旁分泌/自分泌的因素或者啟動子區(qū)域調(diào)控元件調(diào)節(jié)的影響。因此，研究包含調(diào)控元件在內(nèi)的FSHR基因5'側(cè)翼區(qū)域是很重要的。人們已經(jīng)克隆出很多物種的FSHR的啟動子區(qū)，包括人，大鼠，小鼠和羊，關(guān)于豬的FSHR啟

2、動子區(qū)的研究還很少。
　　 染色體是由核小體組成的。核小體上組蛋白的表觀遺傳修飾可以改變基因的表達，而且越來越引起人們的關(guān)注。有研究指出，雄性動物中的FSHR的組蛋白甲基化的修飾可以引起基因表達的改變.關(guān)于乙?；?，我們可以利用染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)來研究其與FSHR表達調(diào)控之間的關(guān)系。本實驗結(jié)果主要有:
　　 1.豬FSHR缺失啟動子活性分析
　　 對染色質(zhì)步移得到的FSHR5'區(qū)序列進行分析，發(fā)現(xiàn)沒有TATA框，并

3、且生物信息學分析沒有發(fā)現(xiàn)CpG島。將不同長度的啟動子片段克隆到pGL3-basic質(zhì)粒上。將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到顆粒細胞中。根據(jù)缺失啟動子活性檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，最長的片段P1590，即相對轉(zhuǎn)錄起始位點-1557到+32的區(qū)域在顆粒細胞中的活性與pGL3-Basic載體相比有2.07倍。-1557到-1159的缺失導(dǎo)致其表達活性是P1590的3.03倍(P＜0.01)。-1159到-562更長片段啟動子的缺失導(dǎo)致其活性相比P1185載體明顯下降。所以從

4、含有核苷酸-1159到-562的片段為啟動子區(qū)重點調(diào)控區(qū)域，可能存在著重要調(diào)控元件。
　　 2.H3K9乙?；揎椗cFSHR基因表達調(diào)控的相關(guān)性研究
　　 分別通過體內(nèi)實驗和體外實驗來研究H3K9乙?；揎椗cFSHR表達的關(guān)系。體內(nèi)實驗中，健康卵泡FSHR啟動子區(qū)乙?；奖乳]鎖卵泡中高，F(xiàn)SHR表達量也比閉鎖卵泡高;體外實驗中，分別用FSH和丁酸鈉來處理顆粒細胞，可以發(fā)現(xiàn)H3K9乙?；揎椝缴?，F(xiàn)SHR基因表達量也