CBP-P300介導(dǎo)組蛋白H3K9乙?；揎棇ATA4表達(dá)的影響.pdf

1、目的：
　　GATA4作為心臟發(fā)育核心轉(zhuǎn)錄因子，在心臟發(fā)育早期開始表達(dá)，并在心肌中持續(xù)表達(dá)至成年。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)GATA4的表達(dá)受到組蛋白乙?；{(diào)控，CBP/P300屬于組蛋白乙?；傅膬蓚€亞型。本研究中，我們將明確GATA4在小鼠胚胎心臟發(fā)育過程中的時序表達(dá)，并闡明CBP/P300介導(dǎo)組蛋白修飾對GATA4的表觀遺傳調(diào)控機(jī)制。
　　方法：
　　選取胎齡11.5天（E11.5）至新生0.5天胎鼠心臟；利用RT-P

2、CR檢測胎鼠心臟中GATA4的表達(dá)，染色質(zhì)免疫共沉淀（CHIP）檢測GATA4基因啟動子區(qū)組蛋白H3K9ac、H3K9me2、H3K9me3水平及與CBP/P300的結(jié)合水平。體外培養(yǎng)心肌祖細(xì)胞，利用CBP30干預(yù)心肌祖細(xì)胞，探討CBP/P300對GATA4表達(dá)的調(diào)控機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1.GATA4表達(dá)量在E14.5高于E11.5（P<0.05），E14.5后各組間比較無差異（P>0.05）。CHIP結(jié)果顯示GATA4

3、啟動子區(qū)組蛋白H3K9ac水平在E14.5高于E11.5，E17.5高于E14.5（P<0.05）；H3K9me2、H3K9me3水平及與CBP/P300的結(jié)合水平在E14.5高于E11.5、E17.5（P<0.05）。
　　2.不同濃度（0.5μM、1μM、2μM、4μM）CBP30分別使心肌祖細(xì)胞GATA4表達(dá)量較對照組降低，且以2μM降低最明顯（P<0.05）。2μM CBP30干預(yù)心肌祖細(xì)胞6h、12h、24h、48h后，