河南省部分地區(qū)傳染性法氏囊病病毒分離株的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、傳染性法氏囊病(Infectiousbursaldisease，IBD)是由傳染性法氏囊病病毒(Infectiousbursaldiseasevirus，IBDV)引起的急性接觸性傳染病，該病毒IBDV主要侵害雛雞的中樞免疫器官一法氏囊，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞凋亡，引起雞只長(zhǎng)期的免疫抑制。該病是危害世界養(yǎng)禽業(yè)的主要傳染病之一。目前國(guó)內(nèi)外防治該病的主要方法是使用弱毒苗和滅活苗免疫雞群。近年來IBDV變異株與超強(qiáng)毒株的出現(xiàn)，導(dǎo)致免疫失敗常有發(fā)生。由I

2、BDV侵染家禽所引起的傳染性疾病長(zhǎng)期影響著河南養(yǎng)雞業(yè)的經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)。而有關(guān)河南省內(nèi)的IDBV分子流行病學(xué)調(diào)查一直都是空白。因此，分離與鑒定IBDV河南流行株，從分子水平了解病毒毒力的變異情況，有助于追蹤IBDV的遺傳進(jìn)化，幫助臨床上正確地使用疫苗，建立有效的防治措施。
　　 為了解IBD在河南省區(qū)流行情況，本研究從河南鄭州、南陽、焦作等不同地區(qū)采集71份疑似病料，通過接種9-11日齡SPF雞胚絨毛尿囊膜(chorio-allanto

3、icmembrane，CAM)，盲傳數(shù)帶后，收集病變尿囊膜并經(jīng)瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、SPF雞回歸試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)方式初步篩選并分離了6株IBDV病毒株。為了進(jìn)一步對(duì)這6株IBDV病毒株分子特征研究，分別采用逆轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(reversetranscriptasepolymerasechainreaction，RT-PCR)擴(kuò)增了這5株病毒株的VP2基因并對(duì)其進(jìn)行分析，并對(duì)其中一株IDBV病毒株進(jìn)行了全基因組擴(kuò)增分析，序列分析表明IBDV

4、-HN-04株cu-1同源性達(dá)99％，病毒具有弱毒株特征氨基酸，與中國(guó)其他分離株同源性在94-99％之間，對(duì)比氨基酸序列得出HN-04共含有76(G)、271(T)、331(R)、408(C)、542(V)、555(G)、703(R)、900(G)和974(E)等9個(gè)特征氨基酸。
　　 通過對(duì)病毒的序列分析指出，目前在河南省流行的IBDV毒株同時(shí)存在經(jīng)典株，變異株，超強(qiáng)株，以超強(qiáng)株為主，與日本毒株同源性較高，與歐洲株以及美洲株同