河南省部分地區(qū)人十二指腸賈第蟲流行病學(xué)調(diào)查和分子特性分析.pdf

1、賈第蟲是一種呈全球性分布的常見致腹瀉腸鞭毛原蟲，具有廣泛的宿主范圍，可引起包括人在內(nèi)的多種脊椎動(dòng)物腹瀉，可通過糞-口途徑傳播或通過污染的食物和水源傳播。自20世紀(jì)70年代以來，世界各地均發(fā)生了本病流行或暴發(fā)性流行，目前已將賈第蟲列入危害人類健康的10種主要寄生蟲病之一。本研究目的為了解河南省部分地區(qū)人賈第蟲感染情況，并對獲得的賈第蟲分離株進(jìn)行分子遺傳特性研究，從而分析人賈第蟲病的感染來源。
　　 2007至2008年，用盧戈式碘

2、液染色法對河南省人民醫(yī)院臨床病人、林州地區(qū)0～15歲兒童、開封地區(qū)兩家醫(yī)院住院病人賈第蟲病的流行情況進(jìn)行了調(diào)查。共檢測7519份糞便樣品，發(fā)現(xiàn)23個(gè)賈第蟲分離株，總感染率為0.31％(23/7519)。0-6歲(0.46%)與7-10歲(1.28%)這兩個(gè)年齡段的人感染率最高，而21～40歲、41～60歲和大于60歲感染率相對較低(0.34%0.11%，和0.13%)，11-20歲感染率為零，不同年齡段人賈第蟲感染率存在顯著差異。從性別

3、上看，男性的感染率為0.36%(14/3932)，女性的感染率為0.25%(9/3587)(P＞0.05)。
　　 根據(jù)GenBank中賈第蟲TPI基因序列設(shè)計(jì)合成一套引物，對賈第蟲基因組DNA進(jìn)行巢式PCR擴(kuò)增，并對退火溫度進(jìn)行優(yōu)化，成功擴(kuò)增出約530bp長的目的片段，而其它3種寄生蟲DNA樣本均未出現(xiàn)此條帶，說明引物對賈第蟲基因組DNA的檢測具有高度的特異性。所建立的巢式PCR方法，可為賈第蟲病的臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查提供有

4、用的工具。
　　 利用建立的巢式PCR擴(kuò)增方法對23個(gè)陽性分離株進(jìn)行了擴(kuò)增，共擴(kuò)增出20個(gè)樣品，隨后成功測序出18個(gè)分離株。序列分析表明18個(gè)分離株分屬2個(gè)集聚體，即12個(gè)集聚體A和6個(gè)集聚體B。亞型分析顯示12集聚體A中8個(gè)為A-Ⅰ，4個(gè)為A-Ⅱ。相對而言，6個(gè)集聚體B為6個(gè)新的亞型，命名為B1-B6。種系發(fā)育分析進(jìn)一步驗(yàn)證了序列比對分析結(jié)果，在種系發(fā)育分析樹上，18個(gè)分離株形成2個(gè)群，一群為集聚體A，另一群為集聚體B；而且集