黃連屬植物遺傳多樣性分析和鐵皮石斛原球莖細胞學觀察.pdf

1、本實驗以峨眉黃連在內(nèi)的11種黃連屬植物為樣本，以RAPD(Random AmplifiedPolymorphic DNA)為技術(shù)手段，對黃連屬種間親緣關(guān)系、遺傳多樣性以及造成基因組差異的原因進行了研究，尤其對峨眉黃連種內(nèi)四個居群的多態(tài)性位點進行了基因流和遺傳距離的分析。實驗結(jié)果如下：
　　 1.利用RAPD對11種黃連屬植物的基因組進行擴增，82條隨機引物共擴增出771條帶，每個引物平均擴增9.5條帶，多態(tài)性位點688個，占總擴

2、增帶數(shù)的89.37％。說明黃連屬種間具有較為豐富的遺傳多態(tài)性。對于4個生境采集的峨眉黃連，共擴增出510條帶，其中198個多態(tài)性位點，平均多態(tài)率為38.8％。與種間遺傳水平相比，峨眉黃連種內(nèi)遺傳多樣性有限。
　　 2.根據(jù)RAPD結(jié)果進行的UPGMA聚類分析結(jié)果與傳統(tǒng)形態(tài)學分類結(jié)果一致。味連與其他三種黃連的遺傳距離最遠，單獨分為一支。其次是兩個生境的三角葉黃連聚為一支，而且這兩個樣本之間的相似性極高。在相似性系數(shù)大于0.84的水

3、平上，草連和峨眉黃連分化為兩支。其中，黃灣的樣本和三道河的雙翼型峨眉黃連聚為一支，白崖、人棚子溝的樣本和三道河的鳳尾型樣本聚為一支。
　　 3.通過POPGENE對四個生境的峨眉黃連的基因流進行了研究，結(jié)果顯示居群水平上的多態(tài)率為26％，shannon信息指數(shù)0.1852，遺傳分化指數(shù)(Gst)為0.3680，基因流(Nm)為0.2912。這表明發(fā)生在峨眉黃連基因組內(nèi)的多數(shù)變異存在于居群內(nèi)，居群間缺少基因交流。相對較低的基因流可

4、能是造成居群間遺傳分化的主要原因，但是我們也不能排除遺傳漂變的因素。對于峨眉黃連的基因組的遺傳結(jié)構(gòu)，生長環(huán)境仍然起到主導作用。對于唯一存在分類不一致的樣本5(鳳尾型，三道河)，我們推測不同表型的個體之間存在微小的遺傳差異，但這種差異不足以影響整個居群的進化。
　　 以鐵皮石斛原球莖為實驗對象，通過植物組織石蠟切片的技術(shù)手段，對鐵皮石斛從球形胚到萌發(fā)過程中體胚中頂部的形態(tài)發(fā)生過程進行了研究。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，由愈傷組織培養(yǎng)15天左右，