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文檔簡介
1、植物類病變廣泛地代表了一類能自發(fā)產(chǎn)生細胞壞死的突變體,這類突變體的突變表型是由于細胞死亡失調(diào)引起的,與過敏性反應(yīng)表型相似,因此類病變突變體是分析植物細胞程序性死亡途徑的有效工具。 水稻類病變突變體spl5是由粳稻Norin8經(jīng)γ射線輻射誘導(dǎo)而成,植株從苗期開始葉片上就會自發(fā)地出現(xiàn)紅棕色類病斑,屬于典型的類病變壞死突變體。對spl5突變體病斑表型發(fā)生機理的研究結(jié)果表明,O2-類活性氧在細胞發(fā)生死亡之前就開始積累,并且在只有少數(shù)病斑
2、的時候其體內(nèi)O2-濃度達到最高。通過對兩個ROI清除酶SOD和CAT活性的測定,spl5突變體內(nèi)的活性氧清除系統(tǒng)基本沒有變化,據(jù)此推測spl5突變體內(nèi)活性氧代謝失控可能是由于活性氧的產(chǎn)生系統(tǒng)加強從而導(dǎo)致活性氧的過度積累。 對spl5突變體的白葉枯病抗性鑒定結(jié)果表明,spl5突變體較野生型顯著提高了對白葉枯病菌菲律賓生理小種的抗性,尤其是對PXO145(P8)生理小種,抗性指標達到了高抗水平,另對PXO280(P7)、PXO87(
3、P9)和PXO124(P10)等3個小種達到抗性水平??剐詸C理的研究表明接菌后spl5突變體保護酶POD和PAL活性提高快且幅度較大,在整個過程中均能保持較高水平,說明spl5突變體較野生型能更快更強地啟動自身的過敏性反應(yīng)。OsPR1基因通常作為研究植株系統(tǒng)獲得性抗性的標記基因,而OsAOS是茉莉酸合成途徑的關(guān)鍵調(diào)節(jié)酶,抗性相關(guān)基因的表達分析表明spl5突變體和野生型體內(nèi)PR基因OsPR1、OsPR3和OsPR8以及茉莉酸合成途徑的關(guān)鍵
4、調(diào)節(jié)酶基因OsAOS均有表達,但spl5突變體內(nèi)的表達量更高。RT-PCR結(jié)果說明spl5突變體內(nèi)的系統(tǒng)獲得性抗性以及茉莉酸信號傳導(dǎo)途徑在形成病斑時可能已被激活。以上結(jié)果表明spl5突變體具有較強的抵御病原菌入侵的能力。 為了進一步研究spl5突變體細胞死亡的機制以及spl5突變體與病原菌互作的機制,構(gòu)建了spl5突變體的懸浮細胞系并對影響spl5突變體懸浮系構(gòu)建的因素進行了分析。結(jié)果表明激素2,4-D對于spl5突變體愈傷組織
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