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1、雞白血?。ˋL)、雞傳染性貧血病(CIA)、雞網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥(RE)、雞呼腸孤病毒?。≧eo)4種免疫抑制病是目前雞群中常見的免疫抑制性病毒。這些病毒除不同程度的引起機(jī)體發(fā)生原發(fā)感染之外,更嚴(yán)重的是以繼發(fā)感染的形式出現(xiàn),致使家禽的免疫系統(tǒng)受到損害,引起機(jī)體免疫功能下降,造成對(duì)多種致病因子易感性增強(qiáng)及疫苗免疫失敗。根據(jù)近年的報(bào)道,種雞和商品雞均存在這些病毒的感染,并存在不同程度的共感染;種雞群感染并垂直傳播給商品雞,間接引起了商品雞群
2、免疫能力降低,死亡率上升。因此,免疫抑制性疾病是目前養(yǎng)雞業(yè)的潛在威脅,給養(yǎng)雞業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
本研究分為三部分:
一、ALV、CIAV、REV、ReoV的血清學(xué)調(diào)查本試驗(yàn)針對(duì)煙臺(tái)地區(qū)有代表性的15個(gè)肉種雞群的雞白血?。ˋL)、雞傳染性貧血病(CIA)、雞網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖癥(RE)、雞呼腸孤病毒?。≧eo)4種免疫抑制病進(jìn)行了血清流行病學(xué)調(diào)查。主要采用了瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、間接ELISA 試驗(yàn)等診斷方法進(jìn)行血
3、清抗體檢測(cè)。并對(duì)免疫抑制性傳染病陽(yáng)性雞群的 ND HI-Ab效價(jià)進(jìn)行了檢測(cè),同時(shí)對(duì)煙臺(tái)地區(qū)上述4種免疫抑制性疫病的臨床病例進(jìn)行調(diào)查分析,統(tǒng)計(jì)了近3年內(nèi)煙臺(tái)地區(qū)這4種疫病的感染及發(fā)病情況。結(jié)果表明免疫抑制性傳染病感染雞群后可使其免疫能力低下,ND HI-Ab效價(jià)顯著降低,較正常值低3.5~4.5(log2)個(gè)抗體滴度。免疫抑制性疫病的存在是構(gòu)成該地區(qū)肉種雞場(chǎng)雞群免疫失敗、疫病流行的重要因素。
二、REV、ALV、ReoV和C
4、IAV的分子流行病學(xué)調(diào)查從煙臺(tái)地區(qū)I、II、III三個(gè)規(guī)?;u場(chǎng)疑似免疫抑制性疾病感染雞群中采集1046只雞的脾臟,用組織DNA直接斑點(diǎn)雜交方法檢測(cè)各樣品中REV、ReoV、CIAV的感染狀況。同時(shí)采集各個(gè)雞只的泄殖腔棉拭子,用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)禽白血病病毒p27抗原。結(jié)果表明所有雞場(chǎng)中ALV感染率(42.6 %)最高,其次為REV(37.3%)。各地區(qū)都存在非常嚴(yán)重單獨(dú)感染和多重感染,并且感染率從種雞到商品雞呈遞增趨勢(shì)。ALV在規(guī)模
5、化雞場(chǎng)II 發(fā)病最頻繁,REV在規(guī)模化雞場(chǎng)III感染率最高。REV、ReoV、ALV和CIAV的廣泛傳播和多重感染是當(dāng)前煙臺(tái)各雞場(chǎng)條件性致病菌發(fā)病率高、家禽生產(chǎn)性能下降的重要原因。
三、免疫抑制病毒的分離鑒定及PCR診斷方法的建立本試驗(yàn)從煙臺(tái)地區(qū)某肉種雞場(chǎng)中AL、CIA、RE、Reo 4種典型癥狀病雞的病變組織中各分離出一株病毒株。應(yīng)用特異性PCR引物可擴(kuò)增到各自預(yù)計(jì)長(zhǎng)度的病毒核酸片段,由此分別確定為ALV、CIAV、RE
6、V、ReoV,四種病毒分離株分別命名為ALV-YT01、CIAV-YT01、REV-YT01、ReoV-YT01。將四種病毒分離株分別接種10日齡SPF雞,均呈現(xiàn)典型的病理變化。分離毒株均能被各自的抗血清所中和,5周齡SPF雞接種分離的細(xì)胞毒均可產(chǎn)生相應(yīng)抗體。同時(shí)利用建立起的PCR檢測(cè)方法對(duì)煙臺(tái)地區(qū)其他肉種雞場(chǎng)四種免疫抑制性疫病的疑似病例各40份進(jìn)行檢測(cè),檢出率分別為42.50%、37.50%、35.00%、27.50%,與傳統(tǒng)的病毒分
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