洛陽(yáng)地區(qū)規(guī)模化雞場(chǎng)隱孢子蟲(chóng)流行病學(xué)調(diào)查及PCR檢測(cè).pdf

1、隱孢子蟲(chóng)病是一種以腹瀉為主要癥狀的人畜共患病，隱孢子蟲(chóng)宿主范圍廣泛，可寄生于包括人在內(nèi)的240余種動(dòng)物，嚴(yán)重威脅著人和動(dòng)物的健康。禽類(lèi)隱孢子蟲(chóng)病是家禽及鳥(niǎo)類(lèi)最常見(jiàn)的寄生蟲(chóng)病之一，現(xiàn)已報(bào)道至少有30種禽類(lèi)可感染隱孢子蟲(chóng)，主要引起消化道和呼吸道癥狀；也可通過(guò)水源導(dǎo)致人畜患病，是一個(gè)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。本試驗(yàn)對(duì)洛陽(yáng)地區(qū)規(guī)模化雞場(chǎng)隱孢子蟲(chóng)病流行情況進(jìn)行了調(diào)查，通過(guò)對(duì)分離到的隱孢子蟲(chóng)從形態(tài)學(xué)、人工感染試驗(yàn)、卵囊排出規(guī)律、18S rRNA序列分析，

2、鑒定出洛陽(yáng)地區(qū)雞源隱孢子蟲(chóng)的流行種類(lèi)，確定了該地區(qū)雞源隱孢子蟲(chóng)分離株及與其它種類(lèi)隱孢子蟲(chóng)之間的分子種系相似性，為預(yù)防和治療人獸共患隱孢子蟲(chóng)病提供了科學(xué)依據(jù)。
　　為了掌握洛陽(yáng)地區(qū)雞隱孢子蟲(chóng)病的流行狀況，自2011年5月～2012年4月，利用飽和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法對(duì)8個(gè)規(guī)?；u場(chǎng)采集的359份糞樣進(jìn)行了隱孢子蟲(chóng)卵囊檢查。檢查結(jié)果顯示：洛陽(yáng)地區(qū)雞場(chǎng)隱孢子蟲(chóng)感染總陽(yáng)性率為15％（54/359），主要集中在50日齡以下的雛雞。

3、發(fā)現(xiàn)2種不同形態(tài)的卵囊，初步鑒定為貝氏隱孢子蟲(chóng)和火雞隱孢子蟲(chóng)。
　　為了進(jìn)一步驗(yàn)證隱孢子蟲(chóng)的蟲(chóng)種，對(duì)3日齡雛雞嗉囊接種，進(jìn)行人工感染試驗(yàn)，觀察其排卵囊規(guī)律和臨床表現(xiàn)。試驗(yàn)結(jié)果顯示：潛隱期為4天，高峰期出現(xiàn)在感染后第8天，高峰期持續(xù)時(shí)間為8～15天。對(duì)病雞隱孢子蟲(chóng)主要寄生部位進(jìn)行黏膜涂片和改良抗酸染色以及對(duì)組織進(jìn)行石蠟切片 H.E染色，結(jié)果僅在氣管和法氏囊部位發(fā)現(xiàn)卵囊，為貝氏隱孢子蟲(chóng)常寄生部位。
　　對(duì)本次分離到的2個(gè)雞源隱孢

4、子蟲(chóng)分離株，采用常規(guī) PCR方法基于18S rRNA基因位點(diǎn)進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增片段經(jīng)測(cè)序和序列比對(duì)，進(jìn)行進(jìn)化發(fā)育分析，鑒定其種類(lèi)。結(jié)果顯示：從洛陽(yáng)地區(qū)分離到的2個(gè)隱孢子蟲(chóng)分離株和貝氏隱孢子蟲(chóng)在同一進(jìn)化分枝上，親緣性較近，為同一蟲(chóng)種，同源性為100%，確定洛陽(yáng)地區(qū)雞源隱孢子蟲(chóng)分離株為貝氏隱孢子蟲(chóng)。本次研究結(jié)果表明，洛陽(yáng)地區(qū)雞已存在隱孢子蟲(chóng)病，為規(guī)模化雞場(chǎng)對(duì)本地區(qū)公共衛(wèi)生健康的風(fēng)險(xiǎn)性評(píng)估提供了數(shù)據(jù)和科學(xué)依據(jù)，為動(dòng)物及人隱孢子蟲(chóng)病的防治奠定了良好