免疫學(xué)第九章淋巴胞

1、第九章 淋巴細(xì)胞,,,授課時間： 兩個學(xué)時 目的與要求 一、T淋巴細(xì)胞 1．掌握T細(xì)胞主要表面分子的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)作用 2．掌握T細(xì)胞亞群的分類及其功能 3．掌握T細(xì)胞在胸腺內(nèi)的發(fā)育過程和機制 二、Ｂ細(xì)胞 1．掌握B細(xì)胞主要表面分子的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)作用。 2．了解B細(xì)胞亞類及其特點，熟悉B細(xì)胞的發(fā)育過程。 三、自然殺傷細(xì)胞 掌握NK細(xì)胞概念，了解其作用和意義。,,重點： 1.T細(xì)胞的分化發(fā)育 2.T細(xì)胞表面標(biāo)志及

2、其功能 3.B細(xì)胞表面標(biāo)志及其功能 難點： 1.T細(xì)胞的分化發(fā)育,一、基本概念,免疫細(xì)胞：所有參與免疫應(yīng)答或與免疫應(yīng)答有關(guān)的細(xì)胞及其前體，包括造血干細(xì)胞、APC、淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞和紅細(xì)胞。 淋巴細(xì)胞（lymphocyte）:是一群異質(zhì)性的構(gòu)成免疫系統(tǒng)的主要細(xì)胞，如T細(xì)胞、B細(xì)胞和NK細(xì)胞等。,,,細(xì)胞種類的鑒定依據(jù)： 不同免疫細(xì)胞及同類細(xì)胞的不同分化階段可表達(dá)不同的種類和數(shù)量的表面膜蛋白或分化抗原(CD)。

3、 分化抗原是鑒定免疫細(xì)胞種類及分化狀態(tài)的標(biāo)志。,免疫細(xì)胞均由骨髓的多能干細(xì)胞發(fā)育而來。,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,紅細(xì)胞 血小板 肥大細(xì)胞 中性粒細(xì)胞 巨噬細(xì)胞 樹突狀細(xì)胞 漿細(xì)胞 T細(xì)胞 NK細(xì)胞,淋巴干細(xì)胞,髓樣干細(xì)胞,多能干細(xì)胞,B細(xì)胞,二、T淋巴細(xì)胞,（一）T細(xì)胞的分化發(fā)育 T細(xì)胞來源于骨髓→在胸腺（thymus）內(nèi)發(fā)育成熟→移行至外周淋巴組織→執(zhí)行特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答，參與對TD抗原

4、的體液免疫應(yīng)答。,在胸腺中完成。分三個時期：1）雙陰性期：T細(xì)胞不表達(dá)CD4分子，也無CD8分子，2）雙陽性期：T細(xì)胞先表達(dá)前TCR（β鏈和α鏈前體），并誘導(dǎo)CD8和CD4分子。3）單陽性期：分化為帶CD4或CD8分子的T細(xì)胞，同時表達(dá)TCR及CD3，隨血流進(jìn)入外周免疫器官或外周血。,,,干細(xì)胞,雙陰性T細(xì)胞,,,外周,,雙陽性T細(xì)胞,識別MHCⅠ類分子,識別MHCⅡ類分子,不識別MHC分子,,非自身反應(yīng)性,自身反應(yīng)性,

5、陽性選擇：雙陽性T細(xì)胞在胸腺與各類細(xì)胞（DC、Mф 等）的MHC互作，能結(jié)合且具低親和力的T細(xì)胞克隆被選擇，可分化成T細(xì)胞。與MHCⅠ分子 作用分化成CD8 TC，與MHCⅡ分子作用分化成CD4 TC。陽性選擇的意義：使成就的T細(xì)胞具有識別、結(jié)合MHC的能力，在識別抗原時顯示MHC約束性。,,陰性選擇：陽性選擇的T細(xì)胞的TCR與MHC-自身抗原肽顯示高親和力的被清除，只有顯示低或中等親和力的及無識別能力的被留下。意義：清除自身

6、反應(yīng)性T細(xì)胞。不會和自身抗原起反應(yīng)。,（二） 、T細(xì)胞受體,1、TCR：TCR有兩類：TCR1（γδ鏈組成，5-10%）和TCR2（ β鏈和α鏈組成，90-95%）。 α和β鏈均有三個超變區(qū)，兩個與MHC的結(jié)合槽作用，一個與抗原肽作用。TCR與CD3形成TCR-CD3復(fù)合體，借助CD3傳遞信號。CD3胞內(nèi)區(qū)的免疫受體酪氨酸活化基序（ITAM）負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)導(dǎo)TCR識別抗原的信號。,ITAM,ITAM,,TCR,細(xì)胞膜,,脂筏,,2、TCR

7、基因TCR的α、β、γ、δ鏈均由二個基因編碼，即可變區(qū)（V區(qū)）基因和恒定區(qū)（C區(qū)）基因，V區(qū)基因必須經(jīng)基因重排才轉(zhuǎn)錄、表達(dá)。,胚系基因：未分化的T細(xì)胞，TCR基因由多個分隔的基因片段組成。,,,,,,,,,,,,,,,,,D1,V1,V α由V、J片段組成,,,,,,,,,,,,,,,,,,L,L,L,V (n=50),J (n=70),,,,C,5`,3`,Vβ由V、D、J片段組成,V 1,L,L,V (n=57),J 1,C1,

8、,,,,,,J 2,C2,,,,enh,enh,,基因重排：分化時V區(qū)基因由分隔的無轉(zhuǎn)錄活性的基因片段在特異性重酶的作用下連接成一個完整的\有轉(zhuǎn)錄功能 的活性基因的過程。分化的T細(xì)胞基因重排只能進(jìn)行一次，表達(dá)一種TCR，具有抗原特異性。不能重排,TCR不表達(dá)，細(xì)胞被清除,V1,V α基因重排,,,,,,,,,,,,,,,,,,L,L,L,V (n=50),J (n=70),,,,C,5`,3`,,enh,,,,,,LVJC,,AAA

9、A,5`,3`,,,,,,,,,,,,,,,,,D1,Vβ基因重排,V 1,L,L,V (n=57),J 1,C1,,,,,,,J 2,C2,,,enh,,,D2,,,,,,LVDJC,5`,,AAAA,3`,,3、TCR多樣性的原因胚系基因片段的連接組合多樣性。連接不精確性：連接處可變異。重排時可隨機插入一段核苷酸片段。α、β鏈組合多樣性。,,4、其他T細(xì)胞表面標(biāo)志（1） CD4和CD8分子 * 區(qū)分T細(xì)胞亞類的重要標(biāo)志

10、； * CD4和CD8胞外區(qū)分別與MHC-II類和I類分子的Ig樣區(qū)結(jié)合，作為共受體（co-receptor）參與T細(xì)胞活化第一信號的產(chǎn)生與轉(zhuǎn)導(dǎo)。,,（2）協(xié)同刺激分子 * CD28/CTLA-4、CD40L、LFA-1、LFA-2通過與相應(yīng)配體（B7、CD40、ICAM、LFA-3）的結(jié)合而提供T細(xì)胞活化的第二信號。 * CTLA-4與B7分子結(jié)合后，產(chǎn)生T細(xì)胞活化的抑制信號； * 活化的T表達(dá)CD40L與CD40結(jié)合后，向B

11、細(xì)胞提供活化信號。,（三）T細(xì)胞亞群,1．按TCR二肽鏈組成分2類 TCR?? T細(xì)胞TCR?? T細(xì)胞：已劃入固有免疫,,,,2．按CD4和CD8表達(dá)分類 （1）CD4+T細(xì)胞 * 表型：CD3+、CD4+、CD8-； * 特異性識別由MHC-II類分子提呈的抗原肽。 （2）CD8+T細(xì)胞 * 表型：CD3+、CD4-、CD8+； * 特異性識別由MHC-I類分子提呈的抗原肽。,,3

12、．按T細(xì)胞功能分類 輔助性T細(xì)胞（Th）： CD4 T細(xì)胞，分泌細(xì)胞因子，分Th1和Th2細(xì)胞 。細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Tc）：為CD8 T細(xì)胞，主要效應(yīng)細(xì)胞，可特異性殺傷靶細(xì)胞。分為Tc1和Tc2細(xì)胞,,4．按T細(xì)胞功能狀態(tài)分類 * 記憶T細(xì)胞：表達(dá)IL-2R（CD25）、CD45RO； * 初始（naive）T細(xì)胞:不表達(dá)IL-2R（CD25）、表達(dá)CD45RA；,,（四）T細(xì)胞的功能 1．CD4+ Th細(xì)胞

13、按CD4+Th細(xì)胞分泌細(xì)胞因子譜的差異分Th1和Th2 （1）Th1細(xì)胞 * 分泌IFN-γ、TNF-β等； * 主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答； * 對Th2細(xì)胞的分化、發(fā)育與功能具有抑制作用。 * 主要參與抗腫瘤、抗病毒感染、移植排斥反應(yīng)、器官特異性自身免疫病等。,,（2）Th2細(xì)胞 * 分泌IL-4、IL-10等； * 主要介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答； * 對Th1細(xì)胞的分化、

14、發(fā)育和功能具有抑制作用； * 主要參與I型超敏反應(yīng)、器官非特異性自身免疫病。,,2．CD4+CD25+Tr細(xì)胞(regulator T cell)（1）功能：抑制CD4T和CD8T細(xì)胞 活化與增殖 （2）機制：通過直接接觸抑制；表達(dá)CTLA-4、mTGF-b分子；下調(diào)APC表面的B7分子等。,,3．CD4+CTL * 部分CD4+Th1也具有細(xì)胞毒作用 * 生物學(xué)特點： 僅在活化階段受MHC-Ⅱ類分子限制，而效應(yīng)階

15、段無限制； 無抗原特異性，主要是旁觀者殺傷效應(yīng)； 可能通過Fas／FasL途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡； 主要清除活化的APC和T細(xì)胞 負(fù)調(diào)節(jié),,4．CD8+ 殺傷性T細(xì)胞（CTL或Tc） （1）功能：特異性介導(dǎo)靶細(xì)胞裂解或凋亡 （2）機制：激活的CTL釋放穿孔素，導(dǎo)致靶細(xì)胞裂解、死亡；釋放顆粒酶，借助穿孔素的孔道進(jìn)入靶細(xì)胞，靶細(xì)胞凋亡；高表達(dá)FasL，通過Fas/FasL途徑導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。 5．遲發(fā)型超敏反應(yīng)T細(xì)胞

16、（TDTH?。?屬Th1細(xì)胞，主要介導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)。,B淋巴細(xì)胞,（一）B 細(xì)胞的分化發(fā)育過程（分兩個時期） １．抗原非依賴期（在骨髓） * 過程：祖B細(xì)胞 (VDJ/H) ?前B細(xì)胞(VJ/L;胞漿 ? 未成熟 B(mIgM) ? 成熟B (mIgM and mIgD),,* 陰性選擇（骨髓）：未成熟 B(IgM)與自身抗原結(jié)合后，被克隆清除或無能，從而形成對自身抗原的耐受。,,２．抗原依賴期（在外周淋巴器官）

17、* 過程：成熟B+抗原?活化增殖?在生發(fā)中心發(fā)育?漿細(xì)胞和記憶B * 陽性選擇（生發(fā)中心） 活化B細(xì)胞增殖 ? BCR可變區(qū)體細(xì)胞超突變 ? 突變 B細(xì)胞與FDC表面抗原高親和力結(jié)合 ? 選擇存活 ? 導(dǎo)致 BCR及抗體親和力成熟，抗體類型轉(zhuǎn)換，產(chǎn)生漿細(xì)胞和記憶B細(xì)胞,,（二）B細(xì)胞的表面標(biāo)志 1. B細(xì)胞抗原受體（BCR）BCR-Igα/Igβ復(fù)合物） * 組成：膜表面Ig（BCR）與Igα、Igβ； * 作用：

18、mIg V區(qū)特異性識別抗原； Igα、Igβ轉(zhuǎn)導(dǎo)mIg特異性識別抗原的信號。,,H鏈胞質(zhì)區(qū),H鏈可變區(qū),H鏈恒定區(qū)（C）,H鏈跨膜區(qū),,,,,,,,,,,,,L鏈可變區(qū),L鏈恒定區(qū)（C）,,,L鏈可變區(qū),L鏈恒定區(qū)（C）,,,細(xì)胞膜,,,BCR—Ig?、?,Ig?,Ig?,Ig?,Ig?,SmIg,CD79 ?,CD79 ?,,ITAM,ITAM,,,,,,,,,2、B細(xì)胞受體B細(xì)胞活化輔助受體：由CD19、CD2

19、1、CD81組成； 協(xié)同刺激分子：CD40、CD80(B7-1)/CD86(B7-2)協(xié)同刺激分子：CD40、CD80和CD86等通過與相應(yīng)配體結(jié)合，提供B細(xì)胞激活的第二信號。細(xì)胞因子受體（CKR）：如IL-1R、IL-2R、IL-4R、IL-5R等 補體受體（CR）：CR1和CR2，其中CR2也是EB病毒的受體。 Fc受體（FcR）:如Fc?R II 、Fc?R等 絲裂原受體：如LPS受體、PWM受體等,,（二）B細(xì)胞亞群

20、 * 根據(jù)CD5表達(dá)與否，B細(xì)胞可分為 B-1細(xì)胞（CD5+）和B-2細(xì)胞（CD5-）。B-2細(xì)胞即通常參與體液免疫應(yīng)答的B細(xì)胞。,,,,(三) B細(xì)胞的功能 1．產(chǎn)生抗體：中和、調(diào)理作用； 2．提呈抗原：攝取、加工、處理外源性可溶性抗原； 3．免疫調(diào)節(jié)：分泌細(xì)胞因子參與免疫調(diào)節(jié)。,三、其他免疫細(xì)胞,1、單核-巨噬細(xì)胞指血液中的單核細(xì)胞和組織中的巨噬細(xì)胞，有吞噬能力，在適應(yīng)性免疫和固有免疫中均發(fā)

21、揮重要作用。,起源：骨髓干細(xì)胞—髓樣干細(xì)胞—粒、單前體細(xì)胞—單核細(xì)胞 —巨噬細(xì)胞膜分子：MHC I、II類分子、Fc受體、補體受體.多種CD（CD23CD40. CD1.CD2.CD64.CD32.CD16.CD35(C3b.CR1)生物學(xué)作用： 吞噬、殺傷作用： 抗原提呈作用： 合成、分泌多種免疫分子,起源：骨髓干細(xì)胞—髓樣干細(xì)胞—粒、單前體細(xì)胞—樹突狀細(xì)胞

22、膜分子：MHC I、II類分子、CD1、CD40、CD80、CD86生物學(xué)作用： 加工、提呈抗原 誘導(dǎo)T細(xì)胞分化、成熟 促進(jìn)T細(xì)胞活化,2、樹突狀細(xì)胞,3、自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞,起源：骨髓干細(xì)胞—淋巴干細(xì)胞—T、NK前體細(xì)胞—NK細(xì)胞膜分子：CD2、CD16、CD56、CD69、CD94、CD158生物學(xué)作用及機制： 自然殺傷過

23、程：無需抗原，可自發(fā)殺傷靶細(xì)胞（腫瘤、病毒感染細(xì)胞、真菌等）,起源：粒細(xì)胞：骨髓干細(xì)胞—髓系干細(xì)胞—粒、單前體細(xì)胞 —粒細(xì)胞 肥大細(xì)胞：骨髓干細(xì)胞—髓系干細(xì)胞—肥大細(xì)胞類型：粒細(xì)胞：中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞 肥大細(xì)胞：粘膜型、組織型作用：吞噬、殺傷 介導(dǎo)炎癥反應(yīng),粒細(xì)胞與肥大細(xì)胞,肥大細(xì)胞

24、的類型與特征,,特征 粘膜肥大細(xì)胞 結(jié)締組織肥大細(xì)胞組織分布 肺、腸道粘膜 皮膚、腸道粘膜下層T細(xì)胞依賴 + —顆粒超微結(jié)構(gòu)

25、 旋渦型 格柵/網(wǎng)格型Fc?受體 +++ +胞漿內(nèi)IgE + —蛋白酶

26、 類胰乳蛋白酶 類胰乳蛋白酶 類胰凝乳蛋白酶 組織胺 + ++LTC4/PGD2 2