精密度評估指南

1、精密度評估指南,zhengjinlai@sina.com鄭金來,前言,精密度是衡量體外診斷試劑批內(nèi)和批間變異的重要指標(biāo)，通常包括批內(nèi)和批間不精密度。精密度評估資料是評價擬上市產(chǎn)品有效性的重要依據(jù)，產(chǎn)品注冊所需的重要申報資料之一 。,定義,批內(nèi)精密度是眾多種類精密度中最基本的一個，它是在嚴(yán)格的相似條件下，所得到的最佳的精密度。批間精密度指在同一實驗室，由同一（組）操作員在同一儀器上，使用同一方法和同種、同一批號試劑，在一段時間

2、內(nèi)(一般為一個月或20個工作日)對同一測試樣品（常用質(zhì)控品）測量結(jié)果的精密度。？？？？？？,精密度評估的基本原則,操作者必須熟悉方法和/或儀器工作原理，了解并掌握儀器的操作步驟和各項注意事項，能在評估階段維持儀器的可靠和穩(wěn)定。用于評估試驗的樣品一般常采用臨床實驗室收集的穩(wěn)定和冷凍貯存的血清(漿)庫；當(dāng)實驗室收集的樣品不穩(wěn)定或不易得到時，也可考慮使用穩(wěn)定的、以蛋白質(zhì)為基質(zhì)的商品物質(zhì)，如校準(zhǔn)品或質(zhì)控品,精密度評估的基本原則,評估精密度時

3、，應(yīng)至少評估二個濃度水平樣本的精密度。當(dāng)二個濃度的精密度有顯著差異時，建議增加為三個濃度。所選樣本濃度應(yīng)在測量范圍內(nèi)有醫(yī)學(xué)意義，即至少有一個濃度在醫(yī)學(xué)決定水平(medical decision levels)左右。不要為了得到較小的精密度，都選用較高值的樣品，甚至超出測量范圍。也不應(yīng)選用靠近最低檢出限的樣品，此時所得的精密度往往偏大。,精密度評估的基本原則,相當(dāng)多的檢驗項目低值常無實際臨床意義，但有少數(shù)檢驗項目，其低值也有臨床價

4、值，此時就需要評估有判斷價值的低值精密度，適用時，可進(jìn)行功能靈敏度的評估。如沒有醫(yī)學(xué)決定水平，可在參考區(qū)間上限左右選一個濃度。此外，再根據(jù)檢驗項目的性質(zhì)在線性區(qū)間內(nèi)選擇另一個值。如與廠商或文獻(xiàn)報導(dǎo)的精密度進(jìn)行比較，所選濃度應(yīng)與被比較精密度的濃度相接近。否則，有可能得出不恰當(dāng)?shù)慕Y(jié)論。,只評估批內(nèi)不精密度,試劑和校準(zhǔn)品：應(yīng)使用同一種類、同一批號的試劑和校準(zhǔn)物,如可能,只進(jìn)行一次校準(zhǔn)。使用不同批號試劑和多次校準(zhǔn)都會增加檢驗結(jié)果的變異程度

5、,只評估批內(nèi)不精密度,評估方法：在以上條件滿足的情況下，在一批內(nèi)對樣本進(jìn)行重復(fù)測定，至少進(jìn)行20次重復(fù)測定,只評估批內(nèi)不精密度,質(zhì)量控制：檢驗時應(yīng)同時至少測一個質(zhì)控品。當(dāng)質(zhì)控品結(jié)果超出規(guī)定的失控限，不論實驗結(jié)果是否滿意都應(yīng)棄去不用，重新進(jìn)行試驗以取得20個實驗數(shù)據(jù)。要保存所有的質(zhì)控數(shù)據(jù)和失控處理記錄,只評估批內(nèi)不精密度,數(shù)據(jù)收集：在進(jìn)行數(shù)據(jù)分析前，檢查數(shù)據(jù)中有無由于偶然差錯引起的離群值(outliers)，可用下述離群值的標(biāo)準(zhǔn)；

6、從已收集的20數(shù)據(jù)計算出總均值和標(biāo)準(zhǔn)差，任何結(jié)果和總均值的差值超過4個標(biāo)準(zhǔn)差時，可認(rèn)為是離群值。為了能收集到至少20個有效數(shù)據(jù)。除補(bǔ)充由于質(zhì)控失控而增加的測試外，還應(yīng)再增加由于離群值不用于精密度的計算所需增加的檢驗次數(shù)。,只評估批內(nèi)不精密度,數(shù)據(jù)收集：在進(jìn)行這種批內(nèi)精密度評估實驗時，一次只能有一個離群值，當(dāng)離群值超過1個時，應(yīng)懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時，應(yīng)不用此次試驗數(shù)據(jù)。檢查問題和解決問題后重新開始新的評估實驗

7、,只評估批內(nèi)不精密度,數(shù)據(jù)的記錄：將所收集到的數(shù)據(jù)記錄在表中,只評估批內(nèi)不精密度,批內(nèi)精密度估計值的計算求出均值： =∑Xi/n使用下列公式計算出批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差估計值的標(biāo)準(zhǔn)差精密度？標(biāo)準(zhǔn)差與均值的關(guān)系,只評估批內(nèi)不精密度,批內(nèi)精密度估計值的計算批內(nèi)精密度估計值的95%可信限查統(tǒng)計表得出自由度20的上限公差因數(shù)為1.25，相應(yīng)下限公差因數(shù)為0.75，得出批內(nèi)精密度的95%可信區(qū)間為：（批內(nèi)精密度×0.75）-（批內(nèi)精密度&

8、#215;1.25）,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,評估方法：每天做2個批次的測試，每批測試時，對同一樣品作雙份測量，共做20天。評估結(jié)束時共有40對，即80個測試結(jié)果。從40批次測量中雙份結(jié)果的差值求出批內(nèi)精密度。從所有80個數(shù)據(jù)計算出批間精密度,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,評估方法：在實施此項評估工作時，必須由同一個或一組操作者在同一臺儀器上進(jìn)行，應(yīng)該使用相同的校準(zhǔn)品、相同種類和批號的試劑。所用時間不得少于20個工作日，這樣

9、所測到的精密度能更好地反映出該臨床實驗室定量測量方法在一段時間內(nèi)的理想或最適的穩(wěn)定性。 在每一批次測量中，必須同時測量質(zhì)控品，以保證結(jié)果是可靠的，數(shù)據(jù)能夠采用。,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,評估方法：也可以一日進(jìn)行一個批次測量，一個批次中對同一樣品重復(fù)測量4次，共測20個工作日，由80個數(shù)據(jù)求出批內(nèi)和批間精密度；如果取得穩(wěn)定樣品有困難，也可改為測5日，每日2個批次，每個批次測一個樣本8次。仍有80個數(shù)據(jù)。從10個批次中每一樣品8次

10、差異算出批內(nèi)精密度。從所有80個結(jié)果計算出批間精密度。,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,數(shù)據(jù)的收集要收集到足夠有效數(shù)據(jù)(至少為80個數(shù)據(jù))。除補(bǔ)充由于質(zhì)控失控而增加的測試外，應(yīng)在進(jìn)行數(shù)據(jù)分析前，檢查數(shù)據(jù)中有無由于偶然差錯引起的離群值(outlier)，可用下述剔除值的標(biāo)準(zhǔn)。,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,數(shù)據(jù)的收集從實施段已收集的40對均值的數(shù)據(jù)計算出總均值和標(biāo)準(zhǔn)差，出現(xiàn)下列任何一種情況都可認(rèn)為是離群值：任何一對均值和總均值的差超過4

11、倍標(biāo)準(zhǔn)差任何一對中二個結(jié)果的絕對差值超過4倍標(biāo)準(zhǔn)差離群值不用于精密度的計算。在剔除后應(yīng)再增加檢驗次數(shù)，以保證至少有40批次，80個數(shù)據(jù)進(jìn)行計算。,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,數(shù)據(jù)的收集從實施段已收集的40對均值的數(shù)據(jù)計算出總均值和標(biāo)準(zhǔn)差，出現(xiàn)下列任何一種情況都可認(rèn)為是離群值：任何一對均值和總均值的差超過4倍標(biāo)準(zhǔn)差任何一對中二個結(jié)果的絕對差值超過4倍標(biāo)準(zhǔn)差離群值不用于精密度的計算。在剔除后應(yīng)再增加檢驗次數(shù)，以保證至少有40批次

12、，80個數(shù)據(jù)進(jìn)行計算,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,數(shù)據(jù)的收集任何一次實驗的剔除值不能超過總測量數(shù)的2.5%。當(dāng)超過時，應(yīng)懷疑是否為方法不穩(wěn)定或操作者不熟悉所致。此時應(yīng)不用此次試驗數(shù)據(jù)，重新開始新的試驗。,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,數(shù)據(jù)的記錄,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,批內(nèi)精密度的計算批內(nèi)精密度Sr I=檢驗日數(shù),同時評價批內(nèi)和批間不精密度,批間精密度的計算,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,批間精密度的計算求均值：從上表得出

13、：批間精密度：從上表得出：n=檢驗總數(shù),同時評價批內(nèi)和批間不精密度,批間精密度估計值的置信區(qū)間由于檢驗次數(shù)不可能無限增加，當(dāng)按規(guī)定方案，多次重復(fù)測量，就是在很好控制條件下，也很難得到相同的值，換言之，通過這樣實驗的數(shù)值只是精密度的估計值，圍繞“真值”而變動。變動的范圍大小和檢驗次數(shù)密切相關(guān)。人們往往在給出精密度值外，還給出其95%的置信區(qū)間。,同時評價批內(nèi)和批間不精密度,批間精密度估計值的置信區(qū)間置信區(qū)間與所測次數(shù)相關(guān)，次數(shù)

14、愈多，可信限愈小可以查出與檢次數(shù)相關(guān)自由度的0.95因數(shù)，乘以標(biāo)準(zhǔn)差值就可得出95%可信限的上、下值。實際工作中，可查出95%可信限的上值的公差因數(shù)（tolerance factor），由此計算出95%可信限。實驗室在報告精密度同時，可給出95%置信區(qū)間。,與其它來源的精密度的比較,臨床實驗室在測定方法的精密度后，應(yīng)評價得到的精密度是否滿意，最簡單辦法就是與生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）所提供的精密度進(jìn)行比較，判斷是否存在差異。如果臨床實驗室所

15、測的精密度小于生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）的精密度，說明臨床實驗室所得到的精密度是合適的。如果臨床實驗室測得的精密度大于生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）的值，可利用F-檢驗法（F-test），即方差比值檢驗（variance ratio test）對實驗室測得的結(jié)果和生產(chǎn)企業(yè)提供的結(jié)果進(jìn)行比較計算 。,與其它來源的精密度的比較,與生產(chǎn)企業(yè)（文獻(xiàn)）聲明批間標(biāo)準(zhǔn)差的比較表,與其它來源的精密度的比較,標(biāo)準(zhǔn)差大小常與濃度有關(guān)，比較時，必須檢查二者濃度是否接近一致，如差異

16、較大不應(yīng)進(jìn)行比較。如接近一致，按下列公式計算出F值，以批間精密度為例。F=Srr2/σrr2計算出的F值和根據(jù)二組自由度從下表中查到的F值(p=0.05)進(jìn)行比較，如計算F值小于查表得出F值，雖然實驗室得到的標(biāo)準(zhǔn)差大于聲稱值，但在統(tǒng)計學(xué)上無差異。反之，說明實驗室得到的標(biāo)準(zhǔn)差沒有達(dá)到方法應(yīng)達(dá)到的水平,與其它來源的精密度的比較,精密度的報告形式,在報告測量精密度時，應(yīng)同時說明下列各點(diǎn)批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差及其95%置信區(qū)間；批內(nèi)變異系數(shù);批間