新生兒遺傳性耳聾基因篩查項目

1、新生兒遺傳性耳聾基因篩查項目,博奧生物集團有限公司生物芯片北京國家工程研究中心北京博奧晶典生物技術(shù)有限公司,Contents,目錄,,目 錄,,,Contents,我國殘疾人群：8502萬 聽力殘疾人群：2054萬數(shù)據(jù)來自：《關(guān)于使用2010年末全國殘疾人總數(shù)及各類、不同殘疾等級人數(shù)的通知》，2012.3.5,4,2010年末各類殘疾人比例,聽力殘疾比例高,,1.中國出生缺陷防治報告（2012）2.中國聽力論壇（2

2、013）,80%的聾兒出生在聽力正常的家庭,5,每年新增3.5萬先天性聾兒【1】每年新增3-4萬遲發(fā)性聾兒【2】,我國耳聾出生缺陷現(xiàn)狀,,6,耳 聾,非綜合征型（70%）,遺傳因素 （約60%）,常染色體隱性（80%）,環(huán)境因素（約20%）,綜合征型（30%）,Alport 綜合征Pendred綜合征Waardenburg綜合征BOR綜合征Usher綜合征……等,細菌感染病毒感染耳毒性藥物外傷磕碰聲損傷

3、……,,常染色體顯性（15%-20%）,性連鎖（< 1%）,線粒體 （< 1%）,不明原因（約20%）,,很可能是遺傳因素,,,,,,,,,,,Journal of Audiology and Speech Pathology. 2011,19(1):73-77,遺傳是耳聾最大病因,,7,流調(diào)單位：301醫(yī)院聾病分子診斷中心流調(diào)范圍：全國 28 個省市樣品規(guī)模：10880 例,正常人群中攜帶耳聾基因突變比例約為5%,

4、四大致聾基因,,8,GJB2基因：——先天性重度以上感音神經(jīng)性耳聾；當GJB2基因發(fā)生純合突變時，患者出生即表現(xiàn)出耳聾癥狀；進行人工耳蝸移植效果良好SLC26A4基因（PDS基因）：——大前庭水管綜合征（EVAS），當患者患感冒、頭部受打擊時，聽力急劇下降；避免顱壓增大，使用改善微循環(huán)藥物和神經(jīng)營養(yǎng)藥治療線粒體基因突變：——氨基糖甙類藥物敏感性耳聾；患者使用氨基糖甙類藥物會導(dǎo)致重度耳聾的發(fā)生；母系家族成員應(yīng)杜絕使用氨基糖甙類抗

5、生素藥物GJB3基因：——后天高頻感音神經(jīng)性耳聾；表現(xiàn)為后天突發(fā)性耳聾；進行人工耳蝸移植效果良好,基因型與致病關(guān)系,新生兒篩查耳聾基因意義,及早確診先天性耳聾，避免由聾致啞及早發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性耳聾，通過生活指導(dǎo)，避免或延緩耳聾發(fā)生及早發(fā)現(xiàn)藥物性耳聾，終身禁用耳毒性藥物，并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾遺傳咨詢,9,,,先天性聾兒,及早安裝助聽器或人工耳蝸植入避免孩子由聾致啞,,,遲發(fā)性聾兒,,通過生活指導(dǎo)避免或延緩耳聾發(fā)生,,,,,

6、終身禁用耳毒性藥物并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾,藥物性聾兒,10,高危新生兒的干預(yù)措施,,,目前，新篩項目已經(jīng)在北京、成都、長治、南通、固始、鄭州等地方開展,開展地區(qū),11,全國新篩項目開展情況,12,全國受益新生兒達到100萬例！,全國新篩項目開展情況,目 錄,,,Contents,晶芯®九項遺傳性耳聾基因檢測試劑盒,四個基因的9個突變位點：GJB2 35 del G、176 del 16、235 del C和2

7、99 del AT； SLC26A4 IVS7-2 A>G、2168 A>G；線粒體12s rRNA 1555 A>G、1494 C>T，GJB3 538 C>T針對中國人設(shè)計，指標覆蓋了國人中98%GJB2, 50%PDS, 90%藥物性耳聾患者。,快 速：8小時靈 敏：2-20 ng/μL 高通量：同時檢9個位點準 確：與測序驗證相符率100%,14,檢測流程,

8、15,血片接收及血斑提取,2.5 h,核酸擴增,3.5 h,芯片雜交及清洗,2h,芯片掃描及結(jié)果判讀,,5 min,,,16,芯片及質(zhì)控,,QC：表面化學(xué)質(zhì)控探針 BC：空白對照探針PC：雜交陽性對照探針 MC：磁珠質(zhì)控探針I(yè)C：基因擴增內(nèi)對照探針 NC：陰性對照探針,野生型探針,突變型探針,,,質(zhì)量控制,17,通過芯片內(nèi)質(zhì)控與室內(nèi)、室間質(zhì)量控制，完全能夠滿足臨床對準確性、一致性的需求！,檢測結(jié)果展示,18,先天性

9、聾,235 純合,1555均質(zhì),299 雜合,攜帶者,藥物聾敏感,2168/IVS7-2復(fù)合雜合,先天性聾,,,,,結(jié)果發(fā)放,19,,,,結(jié)果上傳,短信發(fā)送,上網(wǎng)查結(jié)果,醫(yī)院就診,報告打印,,醫(yī)院就診,,電話回訪,,北京,鄭州,目 錄,,,Contents,采血所需物品,21,同代謝病篩查采集血片要求！,采血流程,22,,,分娩機構(gòu),信息登記,采血,晾干標本,血片遞送,市婦幼保健院,,,,,,簽署知情同意書,,采血實施,23,（一）

10、簽署知情同意書采血前將本次篩查的項目、條件、方式、費用等情況如實告知新生兒的監(jiān)護人、遵循知情選擇的原則。,采血實施,24,（二）信息登記 同代謝性疾病篩查： 認真填寫采血卡片，做到字跡清楚、登記完整。并注意在填寫過程中不要污染濾紙片?？ㄆ瑑?nèi)容包括：公/自費、采血單位、母親姓名、住院號、新生兒性別、出生日期、采血日期、居住地址、聯(lián)系電話和采血人等信息。,采血實施,25,（三）規(guī)范采血采血時間：與代謝性疾病同時采血方式：同

11、代謝性疾病合格要求：不少于2個血斑 直徑大于8mm 血斑自然滲透，濾紙正反面血斑一致血斑無污染,不合格血片展示,26,酒精污染的血斑，出現(xiàn)滲血環(huán),組織液污染,樣本過少，滲透不良,樣本過多,采血實施,27,（四）血片遞送與保存1、采血單位 采血完成后制成干血片，完成初級質(zhì)控，集中放入自封袋，封好封口，以防霉變，放入專用運輸包，與代謝性疾病篩查血片同時送區(qū)縣婦幼，并

12、做好交接登記。2、市婦幼保健院 完成血片二級質(zhì)控后，干燥密封保存，放入專用運輸包，遞送到篩查單位，并做好交接登記。3、篩查單位 完成交接，對血片進行三級質(zhì)控后，進行檢測并長期保存血片（2-8℃）。 因特殊情況未按期采血或不合格標本退回需要重新采血者，應(yīng)當及時預(yù)約或追蹤采集血片。,目 錄,,,Contents,耳聾遺傳咨詢意義,29,減輕患者身體和精神上的痛苦；減輕患者及其親屬的心

13、理壓力；幫助他們正確對待遺傳性耳聾、了解發(fā)病概率；采取正確的預(yù)防、治療措施，從而最終降低人群遺傳性耳聾的發(fā)病率；,意義：,耳聾遺傳咨詢對象,30,1. 已生育聾兒的正常夫婦詢問再發(fā)風險者；2. 有耳聾家族史的正常夫婦，擔心后代會遺傳此病者；3. 未婚或已婚的男女雙方均為聾啞人或其中一人為聾啞人，需要給予婚前婚配指導(dǎo)或婚后生育指導(dǎo)者；4. 新生兒耳聾患者，指導(dǎo)用藥及生活指導(dǎo)； 此外，由于耳聾基因在正常

14、人群中也有一定的攜帶率，因此有婚配或生育要求但無耳聾家族遺傳史的正常人也在耳聾遺傳咨詢服務(wù)對象范圍內(nèi)。,遺傳咨詢工作流程,31,第一步：樣本芯片檢測結(jié)果報告發(fā)送郵寄或者短信發(fā)送 第二步：整理需要電話追訪的名單新生兒耳聾基因?qū)嶒炇覚z測及報告發(fā)送完成后，整理并打印GJB2、SLC26A4、12S rRNA、GJB3基因突變攜帶者列表清單 第三步：電話追訪并記錄追訪結(jié)果確認新生兒家長收到報告并告知查看篩查結(jié)果對于需要和希望進行門診

15、復(fù)診的新生兒及家長，追訪中告知其來診的預(yù)約方式及就診時間、流程等初次追訪失敗的，記錄追訪時間及失敗原因，需進行隨后的第二次電話追訪，若第三次追訪失敗，送約定部門,遺傳咨詢工作流程,32,第四步：電話遺傳咨詢工作身份確認：篩查編號、母親姓名、出生醫(yī)院聽力檢測是否通過？是否有耳聾家族史？聽力未通過者來門診復(fù)診聽力通過者定期（每3月-半年）測查聽力至3歲或到門診進行聽力復(fù)診和遺傳咨詢繪制藥物相關(guān)耳聾基因攜帶者母系家族譜，記錄家族中

16、已有聽障者的發(fā)病年齡、原因、聽力狀況，并通知其領(lǐng)取致聾藥物卡片等,遺傳咨詢工作流程,33,第五步：門診復(fù)診新生兒遺傳咨詢工作登記復(fù)診新生兒耳聾基因篩查結(jié)果、編號、聽力篩查是否通過，詢問有無聽力障礙家族史有家族史者繪制家系圖；繪制藥物相關(guān)耳聾基因攜帶者母系家系圖，記錄家族中已有聽障者的發(fā)病年齡、原因、聽力狀況，并通知其領(lǐng)取致聾藥物卡片等OAE聽力測試聽力檢測結(jié)果及基因篩查結(jié)果聯(lián)合分析定期復(fù)查聽力、診斷性聽力學(xué)檢查或分子診斷分子

17、診斷程序：GJB2、SLC26A4全基因測序檢測,遺傳咨詢工作流程—小結(jié),34,門診復(fù)診新生兒遺傳咨詢工作,,,,,,,,,,,,,,,目 錄,,,Contents,耳聾檢測應(yīng)用案例1,36,在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院聽力篩查中心，孩子進行聽力篩查但未通過，抽血檢查耳聾基因，結(jié)果孩子是235純合突變，父親是235純合突變，母親是235雜合突變，爺爺和姑姑分別是235雜合突變和野生型，奶奶不在了，因父母均是聾啞人，對母親進行GJB2基因測序

18、，查出是257C>G雜合突變。,結(jié)果展示,GJB2 235 雜合,GJB2 235 純合,,,,耳聾檢測應(yīng)用案例2,37,山東聊城岳姓家庭，大女兒5歲半，先天性聾，小兒子2歲半，出生時聽篩已過，由于一次意外跌倒，聽力喪失；兩個孩子已做耳部CT檢查，顯示大前庭和內(nèi)耳畸形。經(jīng)耳聾芯片檢測，兩個孩子均為IVS7-2純合突變，父母均為IVS7-2雜合突變。,,,,,,,博奧生物集團有限公司生物芯片北京國家工程研究中心北京博奧晶典生