hematoxylin ii-081128

1、共5頁第1頁蘇木精染色液（蘇木精染色液（Mayer法）法）分類號分類號7602021使用須知使用須知用途用途本試劑主要用于體外診斷（IVD）。蘇木精染色液（Mayer法）是一種改良的Mayer蘇木精，用于對切片中的細(xì)胞核染色，切片含冰凍組織、福爾馬林固定切石蠟包埋的組織或細(xì)胞制劑。要合理解釋任何染色結(jié)果的臨床意義必須同時結(jié)合形態(tài)學(xué)觀察和適當(dāng)?shù)膶φ?。由資深的病理學(xué)家參考病人的臨床病史以及其它實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果進(jìn)行評估。。注意：美國聯(lián)邦法律規(guī)定

2、本器材僅限由醫(yī)生或遵醫(yī)囑銷售。摘要和說明摘要和說明蘇木精可對多種組織成分（包括細(xì)胞核、線粒體、粘蛋白、血紅蛋白、彈性纖維以及膠原）進(jìn)行染色。染料組分（氧化蘇木精）通過媒染劑硫酸鋁直接結(jié)合組織。原理和操作原理和操作一般而言，在IHC染色中，首先是特定抗體（一抗）與抗原結(jié)合，隨后二抗（連接抗體）和一抗結(jié)合，最后酶復(fù)合物和顯色底物相結(jié)合，這些反應(yīng)之間插入洗滌步驟，使抗原顯色。酶激活顯色劑使反應(yīng)產(chǎn)物在抗原位點(diǎn)顯色。隨后使用蘇木精溶液在切片上復(fù)染

3、標(biāo)本。蘇木精通過媒染劑復(fù)合物結(jié)合異染色質(zhì)中的核酸以及組蛋白將細(xì)胞核染成藍(lán)色。每個孵育步驟結(jié)束時，Ventana自動切片染色機(jī)清洗切片，使反應(yīng)停止并去除未結(jié)合的試劑。同時還對標(biāo)本進(jìn)行藍(lán)化并蓋上載玻片。使用光學(xué)顯微鏡讀取結(jié)果，此結(jié)果有助于鑒別與特定抗原有無關(guān)聯(lián)的病理生理學(xué)過程。材料和方法材料和方法提供的試劑提供的試劑1–25ml小瓶蘇木精；含有乙二醇和醋酸穩(wěn)定溶液。使用方法使用方法不需溶解、混合、稀釋或滴定。本試劑針對結(jié)合Ventana一抗

4、、檢測試劑盒和輔助試劑一同在Ventana自動切片染色機(jī)上的使用進(jìn)行了優(yōu)化。所需的材料和試劑（未提供）所需的材料和試劑（未提供）以下列出了可能要用到，但本試劑盒中未提供的試劑和材料：1.陽性或陰性組織對照2Ventana陰性對照試劑3Ventana兔陰性對照4.一抗5.顯微鏡載片，帶正電荷6.能將溫度保持在70C5C的干燥爐7.條碼標(biāo)簽（適用于陰性對照和一抗）8.10%中性緩沖福爾馬林9.染色缸或染槽10.定時器11.二甲苯12.乙醇或

5、梯度酒精13.去離子水或蒸餾水14.BiocareMedical’sDecloakingChamber（NexESIHC自動切片染色機(jī)）15.ESNexESIHC、BenchMarkXT自動切片染色機(jī)16.iVIEWTMDABAECVRed(ALKPHOS)EnhancedVReddetectionkits17.EndogenousBiotinBlockingKit18.Detectionkitspecificsoftware(ESau

6、tomatedslidestaineronly)19.APKWashSolution(ESNexESIHCautomatedslidestainers)20.LiquidCoverslipTMsolution(ESNexESIHCautomatedslidestainers)21.EZPrepTMsolution(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)22.ReactionBuffer(B

7、enchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)23.LCS(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)24.CellConditioning1(CC1)CellConditioning2(CC2)CellConditioning3(CC3)(BenchMarkBenchMarkXTautomatedslidestainers)25.ProteaseIIII

8、II26.BluingReagent27.封固劑28.蓋玻片29.光學(xué)顯微鏡（2080X）適用于特定檢測。儲存和處理儲存和處理儲存于28C。不可冷凍。對于不屬于包裝插頁中列出的儲存條件，使用者必須加以檢驗(yàn)。為確保正確的試劑傳送和試劑盒成分的穩(wěn)定性，每次運(yùn)行后必須更換蓋子，且必須立即將分配器垂直放置在冰箱里。每個分配器都標(biāo)有有效期。如儲存適當(dāng)，本試劑可穩(wěn)定至標(biāo)簽上標(biāo)示的日期。一旦試劑過期，規(guī)定的儲存方法將不再適用。表示本品不穩(wěn)定的跡象是在

9、清洗溶液時試劑出現(xiàn)沉淀。一旦發(fā)現(xiàn)試劑不穩(wěn)定，請立即聯(lián)系您當(dāng)?shù)氐墓?頁第3頁1.將載玻片脫蠟并經(jīng)過一系列二甲苯和梯度酒精入水和相應(yīng)的緩沖液。實(shí)施抗原修復(fù)修復(fù)程序并將載玻片轉(zhuǎn)移至APK洗滌液（1X）中。2.將一抗、相應(yīng)的檢測試劑盒分配器和所需的配套試劑放到試劑托盤上，并將其放置到自動切片染色機(jī)上。檢查液體瓶和廢物缸。3.在載玻片干燥的一端粘貼與試驗(yàn)方案對應(yīng)的條碼標(biāo)簽。4.將已經(jīng)過脫蠟、抗原修復(fù)、加貼標(biāo)簽的載玻片放入APK洗滌液（1X）中。避

10、免組織干燥。不需進(jìn)行抗原暴露：不需進(jìn)行抗原暴露：1.將條碼標(biāo)簽貼于載玻片一端。再經(jīng)一系列二甲苯脫蠟和梯度酒精入水，然后放入APK洗滌液（1X）。2.將一抗和相應(yīng)的檢測試劑盒分配器和所需的配套試劑放到試劑托盤上，并將其放到自動切片染色機(jī)上。3.從APK洗滌液（1X）中加載經(jīng)脫蠟和加貼標(biāo)簽的載玻片。避免組織變干。BenchMark或BenchMarkXT自動切片染色機(jī)自動切片染色機(jī)1.使用載玻片條碼標(biāo)簽，該標(biāo)簽與待執(zhí)行的試驗(yàn)方案相對應(yīng)。2.

11、將一抗、相應(yīng)的檢測試劑盒分配器和所需的配套試劑放到試劑托盤上，并將其放置到自動切片染色機(jī)上。檢查液體瓶和廢物缸。3.將載玻片放到自動切片染色機(jī)上。針對所有分析儀針對所有分析儀1.開始染色。2.染色結(jié)束后，將載玻片從自動切片染色機(jī)上拿下來。3.對于iVIEWDAB和VentanaRed試劑盒，用溫和的洗滌劑或酒精進(jìn)行清洗，以去除蓋玻片上的溶液；在脫水和清潔后，常規(guī)封片。4.對于AEC顯色，不要脫水和透明。用水溶性封固劑封片。應(yīng)在染色后的2

12、3天內(nèi)閱片，染色片于室溫（2028C）下可保存至少2年。質(zhì)控程序質(zhì)控程序陽性組織對照陽性組織對照每次染色流程必須包含陽性對照。陽性對照的目的是為了確定試劑和儀器功能的可靠性。用于對照的組織可同時包含呈陽性和陰性染色的細(xì)胞或組織成分，以便同時提供陽性和陰性對照。用于對照的組織應(yīng)為新鮮的尸檢、活檢或外科手術(shù)切除標(biāo)本，并采用與試驗(yàn)切片相同的方法盡快制備或固定。對照組織的目的是為了監(jiān)控程序的所有步驟，包括從標(biāo)本制備到染色的各個環(huán)節(jié)。使用與試驗(yàn)樣

13、本不同固定或處理方式的組織切片可對除固定和組織處理以外的所有試劑和方法步驟進(jìn)行質(zhì)控?？墒褂藐栃匀旧^弱的組織來優(yōu)化質(zhì)控和檢測輕微的試劑降解。陽性對照只能用于評價(jià)實(shí)驗(yàn)步驟和試驗(yàn)試劑的正確性，而不能用來輔助評價(jià)病人樣本的診斷結(jié)果。如果陽性對照出現(xiàn)陰性結(jié)果，則實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的結(jié)果無效。陰性組織對照陰性組織對照可將用于陽性對照的同一組織用于陰性對照。由于在大多數(shù)組織中細(xì)胞類型多樣，故可同時提供內(nèi)部陰性對照位點(diǎn)，但使用者應(yīng)對此進(jìn)行檢驗(yàn)。如果陰性對照中出

14、現(xiàn)特異性染色，那么病人樣本的結(jié)果應(yīng)被視為無效。疑難解答疑難解答當(dāng)對照試驗(yàn)有任何問題，請立即向您當(dāng)?shù)氐腣entana辦事處報(bào)告。如果對照試驗(yàn)缺乏特異性，那么病人結(jié)果將視為無效。詳情請參見本說明書的“疑難解答”一節(jié)。在明確和解決問題后重復(fù)檢測病人樣本。陰性試劑對照陰性試劑對照對于免疫組化而言，為正確評判結(jié)果，每次試驗(yàn)都應(yīng)設(shè)立陰性試劑對照。陰性試劑用于取代一抗來評估非特異性染色。在適當(dāng)時載玻片應(yīng)使用單克隆陰性對照或多克隆陰性來染色。如使用了其

15、他陰性試劑對照，應(yīng)使用Ventana抗體稀釋劑將其稀釋至與一抗同樣的濃度。稀釋劑本身也可作為陰性試劑對照。陰性試劑對照的孵育時間應(yīng)與一抗的孵育時間相同。當(dāng)在一組連續(xù)切片上使用多個抗體時，應(yīng)用一個陰性試劑對照即可。檢測方案正確性檢驗(yàn)檢測方案正確性檢驗(yàn)每當(dāng)初次制定檢測方案，都應(yīng)首先進(jìn)行陽性或陰性對照檢驗(yàn)，用以驗(yàn)證方法的特異性（參照本產(chǎn)品說明書中的“質(zhì)控程序”一節(jié)，以及美國病理家學(xué)院實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可體系、解剖病理檢查表和NCCLS批準(zhǔn)指南中的質(zhì)控建