生化綜述-心肌肌鈣蛋白ctni檢測(cè)方法及其影響因素和臨床應(yīng)用進(jìn)展_第1頁(yè)
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1、綜述題目:目:cTnIcTnI檢測(cè)方法及其影響因素和臨床應(yīng)用進(jìn)展檢測(cè)方法及其影響因素和臨床應(yīng)用進(jìn)展姓名:名:學(xué)號(hào):號(hào):系別:別:年級(jí):級(jí):專業(yè):業(yè):二○一○一二年二年三月2并受主觀因素影響。目前應(yīng)用較多的是電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法(ECLIA)和酶聯(lián)熒光分析法(ELFA)。在美國(guó),第一個(gè)被FDA認(rèn)證用于檢測(cè)cTnI的是DadeStratuslI檢測(cè)法(采用兩種cTnIMAb,自動(dòng)化雙位點(diǎn)熒光酶免疫定量檢測(cè),參考值≤0.35btg/L,鑒別值

2、1.5ug/L【4】。美國(guó)臨床化學(xué)學(xué)會(huì)(AACC)目前正在完善cTnI檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)。2.12.1電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法電化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)法(ECLIA)(ECLIA)該法應(yīng)用雙抗體一步法夾心酶免疫分析法,以化學(xué)發(fā)光劑為底物,用單克隆抗cTnIIgG抗體包被的磁性微粒作為固相載體(例如,用樹(shù)脂、磁性微粒、聚苯乙烯珠等作為載體)把抗體與小分子顆粒結(jié)合,提高抗體的捕捉能力,增加了吸咐表面積,可在磁場(chǎng)中與液體分離,簡(jiǎn)化了操作步驟。提高了靈敏度,節(jié)省

3、了出報(bào)告的時(shí)間。2.22.2酶聯(lián)熒光分析法酶聯(lián)熒光分析法(ELFA)(ELFA)【5】此法系法國(guó)生物梅里埃公司近來(lái)開(kāi)發(fā)的一種新技術(shù)(VIDTnI),在eTnI檢測(cè)中具有操作簡(jiǎn)便、自動(dòng)化程度高、測(cè)定快速、結(jié)果準(zhǔn)確可靠等特點(diǎn)。VIDTnI檢測(cè)試劑盒采用一步免痰熒光法,以連接ALP的抗eTnI單克隆抗體包被固相載體(SPR),在血清樣品被吸人SPR管內(nèi)與包被的cTnI通過(guò)洗滌被除去。底物4一甲基傘形酮磷酸鹽在ALP催化下生成熒光產(chǎn)物4一甲基傘

4、形酮,在450ilm檢測(cè)熒光強(qiáng)度,與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較自動(dòng)計(jì)算血清e(cuò)TnI濃度。3.3.影響因素影響因素3.13.1肝素肝素對(duì)于自動(dòng)化免疫分析儀,推薦應(yīng)用肝素化血漿而不是血清,可省去凝血所需的時(shí)間。但Gerhardt等【6】發(fā)現(xiàn)肝素影響cTnI檢測(cè)。Katrukha等【7】認(rèn)為肝素可通過(guò)改變cTn分子結(jié)構(gòu)或直接覆蓋cTn的抗原決定簇而降低其免疫反應(yīng)性。WH0推薦的肝素濃度是:肝素鈣4O~60IU/ml(固態(tài)肝素化)及8~12IU/ml(液態(tài)肝

5、素化)。3.23.2類風(fēng)濕因子類風(fēng)濕因子(RF)(RF)RF、嗜異性抗體及自身抗體等因素常干擾免疫反應(yīng),從而影響夾心免疫檢測(cè)法。Krahn等【8】研究了1OO個(gè)樣本,RF均大于100IU/ml(Beckman公司AR—RAY分析儀,正常參考值80IU/ml時(shí),會(huì)使cTnI測(cè)定出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。3.33.3溶血溶血以往認(rèn)為在血紅蛋白2000mg/dL時(shí)并不影響酶聯(lián)免疫檢測(cè)法,但也強(qiáng)調(diào)樣本避免嚴(yán)重溶血。Wenk【10】采用多克隆山羊抗體,通過(guò)

6、該法檢測(cè)cTnI后發(fā)現(xiàn):溶血指數(shù)越高,對(duì)血漿中cTnI檢測(cè)影響越大。當(dāng)溶血指數(shù)300(血紅蛋白約為300mg/dL,相當(dāng)于肉眼可見(jiàn)的中等溶血)時(shí),未發(fā)現(xiàn)干擾。標(biāo)本離心后能減少但不能完全消除這種影響。說(shuō)明并非僅血紅蛋白影響結(jié)果,溶血后的細(xì)胞膜碎片、蛋白及其它未知的因素也干擾檢測(cè)。3.43.4慢性腎臟衰竭慢性腎臟衰竭Li等【11】用Stratus系統(tǒng)檢測(cè)了79個(gè)不伴心肌損害臨床表現(xiàn)的終末期腎病病人,有7個(gè)病人cTnI增高慢性腎臟衰竭對(duì)血清c

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