擬青霉h1041paecilomycessp.h1041產(chǎn)漆酶及其對4氯苯酚的降解研究

1、} Y9 6 8 0 9 6勢囊號： 望墅論文編號； 2 Q Q i Q i 篷2密綴：————賽搦大學2 0 0 6 麟碩士研究擻學位論文擬青霉H - 1 0 4 - 1 ( 砌裙洳“ 9 憾! ! 『掣．H - 1 0 4 一1 )產(chǎn)漆酶愛其對參蠡苯酚的i 駑解研究霉秘專建：研究方向：導 幫：研炎生：徽生翱應(yīng)瀚真菌學粱寒璉數(shù)授趙 爵中湖- 貴州- 貴陽2 0 0 6 年8 男貴州土學2 0 0 6 屆碩士學位論文 擬青霉H - 1

2、0 4 - 1 產(chǎn)漆酶及其對4 - 氯苯酚的降解研究摘 要以從土壤中分離到的一株新的耐熱單瓶梗擬青霉P a e c i l o m y c e s s p ．H - 1 0 4 —1 為試驗菌種( 以下略為“H ．1 0 4 —1 ”) ，液體發(fā)酵擬青霉H ．1 0 4 - l 產(chǎn)漆酶的最佳培養(yǎng)條件為：1 、3 0 0 m l 三角瓶裝量1 2 0 r a l 培養(yǎng)液中，接種量5 m l ( 2 ．O ×1 0 5 孢予／m

3、1 ) ：2 、初始p H 值6 ．0 ：3 、轉(zhuǎn)速1 2 0 r p m - 1 5 0 r p m ：4 、培養(yǎng)溫度4 0 “ C 。在擬青霉H - 1 0 4 ．1 的液體培養(yǎng)體系內(nèi)加入O ．0 0 8 ％T w e e n ．8 0 表面活性劑，能將酶活提高到1 8 ．6 3 U ／L 。于培養(yǎng)基中分別添加0 ．5 r a m 的愈創(chuàng)木酚、二苯胺和苯甲醇3 種化學物質(zhì)，它們相應(yīng)對H ．1 0 4 ．1 菌株漆酶的產(chǎn)生都有不同程度

4、的誘導作用。分別以不同載體固定化擬青霉H - 1 0 4 - 1 進行培養(yǎng)，酶活提高不顯著，產(chǎn)酶周期無較大提前。但考察以活性炭固定化培養(yǎng)擬青霉H ·1 0 4 - I 產(chǎn)漆酶較單純液體培養(yǎng)產(chǎn)酶耐熱性有相應(yīng)的提高。利用廉價的麩皮汁。通過響應(yīng)面方法優(yōu)化擬青霉H ．1 0 4 ．1 產(chǎn)酶培養(yǎng)基，獲得擬臺的二次多項式模型：Y = 8 8 ．3 6 ．1 ．3 9X l - 5 ．5 5 X 3 ．1 8 ．7 8 X l2 1 2 +

5、 9 1 溺2 + 1 ．5 0 X lX 3其中，x l 為麩皮汁．x 3 為草酸銨，該模型的確定系數(shù)達到9 3 ％。確認以麩皮汁改良培養(yǎng)基配方后所能預(yù)期獲得的漆酶酶活可以達到8 9 ．0 0 U ／L ，是原來未經(jīng)改良的酶活的近6 倍。用擬青霉H ．1 0 4 ．1 菌株所產(chǎn)漆酶對4 ．氯苯酚( 4 ．C P ) 進行降解表明：l 、H ．1 0 4 ．1 漆酶降解4 - C P 的最適反應(yīng)溫度為3 s ℃；2 、在酶用量一定的情況