大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌超微結(jié)構(gòu)及生肌調(diào)節(jié)因子MyoD、myogenin的影響.pdf

1、目的：研究力竭游泳運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期對(duì)成年SD大鼠骨骼肌超微結(jié)構(gòu)、有氧氧化酶活性表達(dá)以及生肌調(diào)節(jié)因子MyoD、myogenin蛋白表達(dá)的影響。
　　 方法：以36只8周齡健康雄性SD大鼠為研究對(duì)象。將其隨機(jī)分為6組，每組6只：A，安靜對(duì)照組(Contro1)；B，力竭運(yùn)動(dòng)即刻組(E0)；C，力竭運(yùn)動(dòng)后12h組(E12)；D，力竭運(yùn)動(dòng)后24h組(E24)；E，力竭運(yùn)動(dòng)后48h組(E48)；F，力竭運(yùn)動(dòng)后72h組(E72)。各力竭運(yùn)動(dòng)組進(jìn)

2、行為期一周的負(fù)重力竭性游泳運(yùn)動(dòng)，并于末次力竭運(yùn)動(dòng)后的不同時(shí)間點(diǎn)宰殺取樣。所有大鼠用烏拉坦腹腔麻醉、宰殺后迅速取腓腸肌、比目魚肌、股外側(cè)肌、股直肌，部分液氮冷凍保存待用，另一部分分別用4％多聚甲醛或2.5％戊二醛固定。電鏡下觀察大鼠股直肌超微結(jié)構(gòu)的變化：用琥珀酸脫氫酶試劑盒測(cè)定腓腸肌中琥珀酸脫氫酶(SDH)的活性，蛋白定量用考馬斯亮蘭測(cè)定；采用SABC-DAB免疫組化方法檢測(cè)大鼠比目魚肌和股外側(cè)肌中生肌調(diào)節(jié)因子MyoD、myogenin蛋

3、白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1)經(jīng)一周力竭性游泳運(yùn)動(dòng)后，與安靜組相比，運(yùn)動(dòng)組大鼠腓腸肌中SDH活性顯著升高(P＜0.05)：與E0組相比，E12組和E24組腓腸肌中SDH活性顯著降低(P＜0.05)；與E24組相比，E72組腓腸肌中SDH活性顯著升高(P＜0.05)。本實(shí)驗(yàn)中，一周力竭游泳運(yùn)動(dòng)即刻及恢復(fù)期間SDH活性變化大體趨勢(shì)是先快速升高，后降低，隨后又階段性升高的情況。
　　 2)電鏡下觀察大鼠股直肌的超微

4、結(jié)構(gòu)，安靜對(duì)照組肌原纖維結(jié)構(gòu)完整、排列緊密，橫紋清晰，肌絲排列規(guī)則，能清楚分辨出各帶及線。力竭運(yùn)動(dòng)后骨骼肌超微形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生了程度不同的改變，這些改變?cè)贓0組和E24組更加明顯。游泳運(yùn)動(dòng)后骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的變化主要表現(xiàn)為肌節(jié)明、暗帶的肌原纖維、Z線以及線粒體等，本實(shí)驗(yàn)中這些變化以E24組最為嚴(yán)重。如明顯的Z線異常，肌節(jié)縱向不規(guī)則的大范圍內(nèi)斷裂，肌原纖維內(nèi)線粒體數(shù)目增多，腫脹，水性變及空泡化，呈多形態(tài)，嵴增加，排列亂等。
　　 3)安

5、靜對(duì)照組大鼠比目魚肌和股外側(cè)肌中，免疫組化結(jié)果未發(fā)現(xiàn)有MyoD與myogenin蛋白表達(dá)：經(jīng)一周力竭性游泳運(yùn)動(dòng)后，在大鼠比目魚肌中，MyoD在E24組表達(dá)明顯，E48組達(dá)到高峰，E72組有所降低，但仍高于E24組；比目魚肌中myogenin在E24組少量表達(dá)，E48組表達(dá)量也較少，僅比E24組多，E72組明顯表達(dá)，其量達(dá)到高峰；另一方面，在大鼠股外側(cè)肌中，MyoD在E24組表達(dá)明顯，E48組達(dá)到高峰，E72組表達(dá)依然明顯，但要比E24組

6、略低；股外側(cè)肌中myogenin在E24組少量表達(dá)，E48組表達(dá)清晰，E72組達(dá)到高峰；MyoD在E48、E72組比目魚肌(慢肌)中蛋白表達(dá)比股外側(cè)肌(快肌)中明顯要高，而在E24組中表達(dá)量卻相反；但myogenin在E24組、E48組和E72組股外側(cè)肌(快肌)中蛋白表達(dá)則一直都高于比目魚肌(慢肌)。
　　 結(jié)論：
　　 1)一周大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后，大鼠腓腸肌中SDH的活性變化出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)即刻快速升高，恢復(fù)期內(nèi)顯著下降，但是隨著恢

7、復(fù)時(shí)間的延長(zhǎng)又逐漸升高的現(xiàn)象，提示一周的大負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)可以提高大鼠有氧氧化酶SDH的活性。
　　 2)大鼠股直肌電鏡下觀察結(jié)果顯示，一周大負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)能夠引起骨骼肌超微結(jié)構(gòu)較為顯著的變化，如：肌纖維A帶拉長(zhǎng)，肌原纖維排列紊亂，Z線大范圍內(nèi)不規(guī)則，相鄰間斷裂，可見Z線流等。表明大負(fù)荷向心運(yùn)動(dòng)也可作為觀察骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的重要模型之一。
　　 3)SABC免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示，大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后24h、48h、72h，在大鼠比目魚肌