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文檔簡(jiǎn)介
1、本文建立大鼠遞增負(fù)荷有氧訓(xùn)練模型,提取大鼠股四頭肌內(nèi)的線粒體,測(cè)定與能量與物質(zhì)代謝相關(guān)的具有代表性的的生化指標(biāo),為姜黃素抗衰老的研究與應(yīng)用提供一定的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
研究目的:
通過測(cè)定姜黃素結(jié)合遞增負(fù)荷有氧運(yùn)動(dòng)后對(duì)中老年大鼠骨骼肌線粒體PTP開放程度、線粒體呼吸鏈復(fù)合體酶復(fù)合體Ⅲ、Ⅳ活性、ATP酶活性的變化。探討姜黃素結(jié)合遞增負(fù)荷有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)衰老大鼠線粒體功能的影響。
研究方法:
21個(gè)月齡SD雄性
2、大鼠40只,適應(yīng)性伺養(yǎng)3天,適應(yīng)性訓(xùn)練5天后將SD雄性大鼠隨機(jī)分為4組,分別為:對(duì)照組(N)、姜黃素組(C)、遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組(Ⅰ)、姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組(A),每組10只,每組分2籠飼養(yǎng),每籠5只。遞增負(fù)荷組(Ⅰ)和姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組(A)采用跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)方式,建立遞增負(fù)荷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型(坡度為0°,運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度遞增至21m/min×45min,運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度相當(dāng)于75%VO2max),每星期持續(xù)訓(xùn)練5天,共8周。各實(shí)驗(yàn)組大鼠分別于末次訓(xùn)練結(jié)束后
3、24h麻醉,斷頸處死。處死后將大鼠固定于手術(shù)臺(tái)上,剪開下肢皮膚,小心處理鼠毛,盡量避免粘在肌肉上,迅速取出股四頭肌。在冷生理鹽水中除去脂肪等結(jié)締組織之后,濾紙吸干,置于液氮中冷凍,-80℃低溫保存待用。采用分光光度法分別測(cè)定線粒體ATP酶活性、線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅲ、Ⅳ活性、線粒體PTP開放程度變化情況。
研究結(jié)果:
(1)骨骼肌線粒體PTP開放程度:對(duì)照組與遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組、姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較均有顯著性差異(P
4、<0.05),姜黃素組與遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較有顯著性差異(P<0.05),遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組與姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組之間的差異并不明顯,但呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)。
(2)骨骼肌線粒體ATP酶活性:對(duì)照組與姜黃素組、遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組、姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較均有極顯著性差異(P<0.01),遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組與姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組之間有顯著性差異(P<0.05)。
(3)骨骼肌線粒體CⅢ、活性:對(duì)照組與遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組、姜黃素+遞增負(fù)荷
5、運(yùn)動(dòng)組比較均有極顯著性差異(P<0.01),姜黃素組與遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較有極顯著性差異(P<0.01),姜黃素組與姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較有極顯著性差異(P<0.01);遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組與姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較有顯著性差異(P<0.01)。
(4)骨骼肌線粒體CⅣ活性:對(duì)照組與姜黃素組比較有顯著性差(P<0.05),對(duì)照組與遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較有極顯著性差異(P<0.01),對(duì)照組與姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較有極顯著性差異(
6、P<0.01),姜黃素組遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較有極顯著性差異(P<0.01),姜黃素組與姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較有極顯著性差異(P<0.01),遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組與姜黃素+遞增負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組比較有顯著性差異(P<0.01)。
研究結(jié)論:
(1)姜黃素結(jié)合遞增負(fù)荷有氧運(yùn)動(dòng)使中老年大鼠股四頭肌線粒體PTP開放程度呈降低趨勢(shì),降低骨骼肌線粒體因PTP過度或者異常開放造成細(xì)胞凋亡的發(fā)生率,保持細(xì)胞的正常代謝。減少細(xì)胞質(zhì)中大量大分子蛋白
7、質(zhì)非選擇性地進(jìn)入線粒體內(nèi)膜,并伴隨著線粒體膜的去極化和線粒體氧化磷酸化失偶聯(lián)現(xiàn)象。
(2)姜黃素結(jié)合遞增負(fù)荷有氧運(yùn)動(dòng)使中老年大鼠股四頭肌線粒體ATP酶活性增強(qiáng),提高了線粒體合成ATP的能力,維持線粒體正常的能量代謝功能以及線粒體的鈣穩(wěn)態(tài)。
(3)姜黃素結(jié)合遞增負(fù)荷有氧運(yùn)動(dòng)使中老年大鼠股四頭肌線粒體CⅢ活性增強(qiáng),增強(qiáng)線粒體呼吸及氧化磷酸化的能力,提高線粒體產(chǎn)能效率。
(4)姜黃素結(jié)合遞增負(fù)荷有氧運(yùn)動(dòng)使中老年大
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