金線蓮有效成分的提取及抗腫瘤機(jī)制研究.pdf

1、目的:很多年來(lái)，腫瘤都是世界上難以克服的疾病之一，傳統(tǒng)的治療方法很難有效的延長(zhǎng)患者的生存質(zhì)量，近年來(lái)傳統(tǒng)的中國(guó)醫(yī)藥（中藥）被證明具有較好的發(fā)展前景。其中，金線蓮是一種代表性的中藥。本實(shí)驗(yàn)的目的是從金線蓮中提取黃酮類(lèi)和多糖類(lèi)成分，并驗(yàn)證提取物對(duì)體外腫瘤細(xì)胞和免疫功能的影響。
　　方法:(1)乙醇提取金線蓮中的黃酮，水提醇沉法提取其中的多糖成分，分別凍干、烘干制得粉末，紫外分光光度法測(cè)定含量后采用MTT檢測(cè)對(duì)A549細(xì)胞的細(xì)胞毒性;(

2、2)小鼠灌胃給予黃酮、多糖提取物，15天后測(cè)定吞噬指數(shù)和脾臟系數(shù);(3)無(wú)菌制備小鼠脾臟懸液后加黃酮、多糖提取物，MTT法檢測(cè)對(duì)淋巴細(xì)胞的增殖促進(jìn)率。
　　結(jié)果:(1)金線蓮可提黃酮粗粉量為0.073 g·g-1，黃酮粗粉含黃酮量為0.083mg·mg-1，藥材中黃酮含量為6.082 mg·g-1;藥材可提多糖粗粉量為0.031 g·g-1，多糖粗粉含多糖量為0.117 mg·mg-1，藥材中多糖含量為3.667 mg·g-1。(

3、2)金線蓮的黃酮提取物對(duì)人肺癌A549細(xì)胞48 h的IC50為189.204μg·mL-1，而多糖提取物對(duì)A549細(xì)胞幾乎沒(méi)有抑制作用。(3)灌胃給予小鼠不同濃度黃酮提取物(200、400、800mg·kg-1·d-1)，吞噬指數(shù)分別為0.034，0.033，0.030，脾臟系數(shù)分別為6.468，6.672，6.836，不同濃度多糖提取物（200、400、800 mg·kg-1·d-1），吞噬指數(shù)分別為0.032，0.040，0.047

4、，脾臟系數(shù)分別為4.988，4.664，5.202。(4)不同濃度(40、80、160、320μg·mL-1)黃酮提取物對(duì)淋巴細(xì)胞的增殖促進(jìn)率分別為0.742，0.770，0.755，0.186;不同濃度(40、80、160、320μg·mL-1)多糖提取物對(duì)淋巴細(xì)胞的增殖促進(jìn)率分別為0.252,0.496,0.534,0.347。
　　結(jié)論:(1)金線蓮草藥中提取的黃酮、多糖成分比文獻(xiàn)所述較低，原因是提取過(guò)程的時(shí)間不充足、轉(zhuǎn)移損

5、失、讀數(shù)誤差等。(2)金線蓮的黃酮提取物在體外對(duì)人肺癌A549細(xì)胞具有一定的抑制作用，并與給藥濃度成正相關(guān);而多糖提取物對(duì)A549細(xì)胞幾乎沒(méi)有抑制作用，一定濃度反而有助于腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。(3)黃酮提取物和多糖提取物都能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，提高脾臟系數(shù)，并且能夠促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖。但同濃度的多糖提取物效果不如黃酮提取物明顯，但劑量相關(guān)性較黃酮提取物強(qiáng)，原因可能是提取多糖過(guò)程中加熱濃縮溫度過(guò)高導(dǎo)致部分多糖鏈斷裂分解成單糖，多糖含量比計(jì)算