人工培育蛹蟲(chóng)草中有效成分的提取及抗腫瘤作用的研究.pdf

1、蛹蟲(chóng)草(Cordyceps militaris)，又名北冬蟲(chóng)夏草、蛹草菌等，是由子座與菌核兩部分組成的復(fù)合體。蛹蟲(chóng)草為蟲(chóng)草屬的模式種，其分布非常廣泛，含有的化學(xué)成分與冬蟲(chóng)夏草相似，包括蟲(chóng)草素、蟲(chóng)草多糖、麥角甾醇等，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和醫(yī)療保健作用，已經(jīng)為世界各國(guó)學(xué)者所認(rèn)識(shí)和接受。目前有一些研究報(bào)道了蛹蟲(chóng)草的抗腫瘤作用，如蛹蟲(chóng)草粉、水提物或醇提物等，但并沒(méi)有從開(kāi)發(fā)的角度進(jìn)行系統(tǒng)的抗腫瘤作用的研究。
　　 考慮到天然冬蟲(chóng)夏草的資源匱

2、乏，蛹蟲(chóng)草的藥用價(jià)值及作為冬蟲(chóng)夏草的替代品的潛在性，本研究先用全蛹蟲(chóng)草粉經(jīng)口給藥的方式對(duì)接種有S180(肉瘤180)、HepA(肝癌腹水)、U14(宮頸癌14)、EAC(艾氏腹水癌)四種動(dòng)物腫瘤的昆明種小白鼠進(jìn)行抗腫瘤實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)蛹蟲(chóng)草粉對(duì)EAC實(shí)體瘤及HepA實(shí)體瘤顯示出一定的活性，特別是對(duì)肝癌HepA腫瘤生長(zhǎng)抑制率接近30％且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 為了進(jìn)一步提高抗腫瘤作用，獲得更好的抗腫瘤效果，本研究采用水回流提取、水超聲

3、提取、75％乙醇回流提取、75％乙醇超聲提取四種方法提取蛹蟲(chóng)草中的有效成分，提取物用高效液相色譜測(cè)有效成分蟲(chóng)草素和腺苷的含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明75％乙醇回流提取獲得的蟲(chóng)草素和腺苷的含量最高。同時(shí)，用MTT法測(cè)四種提取液對(duì)Hek293細(xì)胞以及四種腫瘤細(xì)胞-乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)、人結(jié)腸癌細(xì)胞(LoVo)、肝癌細(xì)胞(HepG2)、膠質(zhì)瘤細(xì)胞(U251)的體外腫瘤細(xì)胞抑制率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)提取物對(duì)四種腫瘤細(xì)胞均有一定的抑制作用，提取物對(duì)乳腺癌細(xì)胞的總

4、體抑制率要高于結(jié)腸癌細(xì)胞、肝癌細(xì)胞和膠質(zhì)瘤細(xì)胞，且回流提取物對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用最大。
　　 從乙醇的濃度和提取時(shí)間對(duì)回流提取進(jìn)行優(yōu)化，同時(shí)對(duì)蛹蟲(chóng)草和天然冬蟲(chóng)夏草采用優(yōu)化后的條件用同一提取方法進(jìn)行提取，發(fā)現(xiàn)提取物的量以及腺苷和蟲(chóng)草素的含量，蛹蟲(chóng)草均高于天然冬蟲(chóng)夏草。體外抗腫瘤實(shí)驗(yàn)顯示，作用48 h和72 h后，蛹蟲(chóng)草提取物對(duì)乳腺癌細(xì)胞的抑制率要高于冬蟲(chóng)夏草。
　　 為了進(jìn)一步了解人工培育的蛹蟲(chóng)草提取物對(duì)腫瘤細(xì)胞的影響，