內(nèi)臟痛高敏感幼鼠的學習記憶能力變化和脊髓背角、海馬CA1區(qū)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達變化及意義.pdf

1、第一部分內(nèi)臟痛高敏感模型幼鼠脊髓背角腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達變化及意義
　　目的：采用新生期母嬰分離建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，探討脊髓背角腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)的表達和幼鼠內(nèi)臟痛敏感性增高的關系。
　　方法：32只新生SD大鼠按2×2析因設計隨機分成4組，每組8只。分別為M1C1組、M1C0組、M0C1組、 M0C0組。M1C1組：給予新生期母嬰分離(NMS)建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，并在50日齡時接受結(jié)直腸擴張(CR

2、D)刺激；M1C0組：同樣給予NMS建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，但在50日齡時不接受CRD刺激；M0C1組：不給予NMS，但在50日齡時接受CRD刺激；M0C0組：既不給予NMS，50日齡時也不接受CRD刺激。M1C1組、M0C1組在接受CRD刺激后次日和M1C0組、M0C0組幼鼠一起處死，留取L6～S2脊髓，采用SABC免疫組織化學方法檢測各組幼鼠脊髓背角BDNF表達情況。
　　采用SPSS18.0軟件包進行統(tǒng)計分析，α=0.05

3、為顯著性檢驗標準
　　結(jié)果：隨著CRD壓力的增加，腹外斜肌放電幅值增加；在CRD為15mmHg、30mmHg、45mmHg低擴張壓刺激下，M1C1組腹外斜肌放電幅值顯著高于M0C1組，差異有統(tǒng)計學意義，當CRD為60mmHg、75mmHg高擴張壓刺激時，兩組幼鼠腹外斜肌放電幅值差異無統(tǒng)計學意義。M1C1組、M0C1組、M1C0組及M0C0組幼鼠脊髓背角BDNF陽性細胞數(shù)百分比(IHS值)分別為32.25％(5.79)、31.18%

4、(5.21)、32.25%(5.64)、24.50%(4.64)，析因方差分析顯示：新生期母嬰分離可以導致幼鼠脊髓背角BDNF陽性細胞數(shù)百分比(IHS值)明顯增加，單次CRD不能影響幼鼠脊髓背角BDNF陽性細胞數(shù)百分比(IHS值)的表達，新生期MS和單次CRD刺激二者不存在交互作用。
　　結(jié)論：新生期MS可建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，其原因可能與脊髓背角BDNF過度表達相關。
　　第二部分內(nèi)臟痛高敏感模型幼鼠學習記憶能力變化及

5、海馬CA1區(qū)BDNF表達改變
　　目的：采用新生期母嬰分離建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，探討內(nèi)臟痛敏感性增高幼鼠學習記憶能力和海馬CA1區(qū)BDNF的表達變化。
　　方法：32只新生SD大鼠隨機分成兩組，每組16只，分別為M1組和M0組。M1組給予新生期母嬰分離(NMS)建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，M0組不給予NMS。在幼鼠35日齡時，兩組同時接受Morris水迷宮檢測。待幼鼠50日齡時，再根據(jù)是否接受結(jié)直腸擴張(CRD)刺激將SD

6、大鼠分成4組，每組8只。分別為M1C1組、M1C0組、M0C1組、 M0C0組。M1C1組：給予NMS建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，并在50日齡時接受結(jié)直腸擴張(CRD)刺激；M1C0組：同樣給予NMS建立幼鼠內(nèi)臟痛高敏感模型，但在50日齡時不予CRD刺激；M0C1組：不予NMS，在50日齡時接受CRD刺激；M0C0組：不予NMS，50日齡時不予CRD刺激。M1C1組、M0C1組在接受CRD刺激后次日和M1C0組、M0C0組幼鼠一起處死，留

7、取海馬，采用SABC免疫組織化學檢測各組幼鼠海馬CA1區(qū)BDNF表達情況。
　　結(jié)果：隨著Morris水迷宮訓練次數(shù)的增加，定位航行試驗的潛伏期和總路程明顯減少，同一日期模型組幼鼠和對照組相比，潛伏期及總游泳路程差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；空間探索實驗中，與對照組相比，模型組幼鼠“原平臺象限游泳路程/總路程”和“原平臺穿越時間/總時間”和“穿越平臺次數(shù)”明顯較少，分別為：2.29、25.60%、25.60%，3.53、29.

8、30%、30.14，兩組差別具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。M1C1組、M0C1組、M1C0組及M0C0組幼鼠海馬CA1區(qū)BDNF陽性細胞數(shù)百分比(陽性細胞IHS值)分別為26.47%(5.50)、40.41%(3.58)、33.86%(5.57)、42.25%(7.28)，新生期MS建立的內(nèi)臟痛高敏感幼鼠海馬CA1區(qū)BDNF陽性細胞數(shù)百分比和陽性細胞IHS值明顯下降。
　　結(jié)論：新生期母嬰分離在導致幼鼠內(nèi)臟痛敏感性增高的同時，出