IL-2、IFN-γ、IL-4在宮頸鱗癌患者血清和陰道灌洗液中的表達(dá)及相關(guān)性研究.pdf

1、背景和目的
　　在全世界范圍內(nèi)，子宮頸癌（cervical cancer）是女性第四位常見的惡性腫瘤。研究表明，每年有超過52萬人被診斷為宮頸癌，26萬余人死于宮頸癌，其中發(fā)展中國家貧窮地區(qū)占大部分[1]，近年來宮頸癌的發(fā)病率逐漸上升，且有年輕化趨勢[2]，其中宮頸鱗狀細(xì)胞癌占75-80％。高危型人乳頭瘤病毒（ human papillomavirus，HPV）感染已被公認(rèn)是宮頸癌及其癌前病變的主要病因[3]。由于人體具有完整的自

2、身免疫系統(tǒng)，大部分女性感染HPV為一過性感染，只有持續(xù)性感染 HPV才可能導(dǎo)致宮頸發(fā)生病變，甚至是宮頸癌。高危型 HPV持續(xù)感染引起細(xì)胞因子介導(dǎo)的腫瘤免疫微環(huán)境受抑制，從而導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生。
　　腫瘤免疫以細(xì)胞免疫為主，尤其是 T細(xì)胞，在抗腫瘤免疫應(yīng)答中發(fā)揮著免疫調(diào)節(jié)、免疫監(jiān)視等重要作用[4]。根據(jù)不同的功能，T細(xì)胞分為輔助性T細(xì)胞（Th細(xì)胞）、細(xì)胞毒性T細(xì)胞（cytotoxic T cell，CTL或Tc）和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（reg

3、ulatory T cells，Treg）。Th細(xì)胞在人體免疫中發(fā)揮重要作用，可分泌不同的細(xì)胞因子，發(fā)揮不同的免疫效應(yīng)，其中，Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子分別在細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。
　　白細(xì)胞介素-2（IL-2）由Th1淋巴細(xì)胞受分裂原或抗原刺激后產(chǎn)生，在維持機(jī)體正常的T細(xì)胞免疫中起重要作用，可通過其增殖介導(dǎo)成熟性T細(xì)胞克隆擴(kuò)增，從而影響細(xì)胞毒性T細(xì)胞的功能?？纱龠M(jìn)T細(xì)胞殺傷作用，增強(qiáng)淋巴因子激活的殺傷細(xì)

4、胞（LAK）、自然殺傷細(xì)胞及細(xì)胞毒性 T淋巴細(xì)胞對病原體的殺傷活性。
　　干擾素-γ（IFN-γ）是由CD4+Th1細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和其他淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一類在宿主免疫和炎癥反應(yīng)中的重要介質(zhì)，可增加 T細(xì)胞細(xì)胞毒性和 NK細(xì)胞活性，增強(qiáng)細(xì)胞免疫應(yīng)答。通過誘導(dǎo)宿主細(xì)胞產(chǎn)生數(shù)種酶，干擾病毒的基因轉(zhuǎn)錄或病毒蛋白組分的翻譯，從而清除病毒感染。
　　白細(xì)胞介素-4（IL-4）是由Th2細(xì)胞分泌，促進(jìn) Th2細(xì)胞分化，上調(diào)血管內(nèi)皮因子1

5、的表達(dá)，活化肥大細(xì)胞和嗜酸粒細(xì)胞，在變態(tài)反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。IL-4通過拮抗巨噬細(xì)胞的γ干擾素活性作用抑制細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。
　　多項研究顯示在腫瘤患者血清中存在 Th1細(xì)胞和 Th2細(xì)胞亞群失調(diào)（Th1/Th2漂移），主要表現(xiàn)為 Th1細(xì)胞功能降低，Th2細(xì)胞功能增強(qiáng)，提示機(jī)體的抗腫瘤免疫受到損害。研究表明[5]不論是正常女性還是下生殖道感染患者，陰道灌洗液中均可檢測到細(xì)胞因子的存在。Audirac-Chalifour等[6]研

6、究結(jié)果顯示宮頸癌的發(fā)生發(fā)展與陰道菌群失調(diào)和異常的宮頸局部細(xì)胞因子表達(dá)有關(guān)。宮頸癌患者血清中細(xì)胞因子表達(dá)異常，提示機(jī)體全身免疫失調(diào)，宮頸局部細(xì)胞因子失衡提示局部免疫受抑制，血清及陰道灌洗液中細(xì)胞因子紊亂有無關(guān)系，卻未見報道，關(guān)系如何尚不清楚。
　　本研究應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）測定宮頸癌患者、宮頸癌前病變患者及宮頸炎患者血清、陰道灌洗液中IL-2、IL-4、

7、IFN-γ的表達(dá)，分析三種細(xì)胞因子與宮頸癌的臨床病理聯(lián)系及在宮頸癌患者體內(nèi)輔助性 T細(xì)胞功能的表達(dá)；通過分析細(xì)胞因子在血清及陰道灌洗液中的表達(dá)有無相關(guān)性，推測二者之間的關(guān)系。本研究將揭示宮頸癌患者中異常的免疫反應(yīng)，這可能是導(dǎo)致癌發(fā)生、發(fā)展的機(jī)制之一。糾正宮頸局部微環(huán)境紊亂可能成為一種治療宮頸癌的新思路。
　　材料與方法
　　收集2015.06-2016.03在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科就診的6例宮頸炎，13例LSIL，15例H

8、SIL，27例宮頸鱗癌I-II期，6例宮頸鱗癌III-IV期患者的血清及陰道灌洗液。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定血清、陰道灌洗液中IL-2、IL-4、IFN-γ的含量。
　　結(jié)果
　　1．在血清中，IL-2的表達(dá)隨著宮頸惡變程度增加而逐漸降低，在LSIL中和宮頸炎組表達(dá)無明顯差異（P=0.288），其余各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；IL-4的表達(dá)隨著宮頸惡變程度增加而逐漸升高，在LSIL中和宮頸炎組表達(dá)無

9、明顯差異（P=0.768），其余各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；IFN-γ的表達(dá)隨著宮頸惡變程度增加而逐漸降低，各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2．在陰道灌洗液中，IL-2的含量隨宮頸惡變升級逐漸降低，各組間差別均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；IL-4的含量隨宮頸惡變程度升級逐漸增多，各組間差別均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；IFN-γ的表達(dá)隨著宮頸惡變嚴(yán)重程度增加逐漸降低，在 LSIL中和宮頸炎組表達(dá)無

10、明顯差異（P=0.177），其余各組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3．IL-2、IL-4、IFN-γ三種細(xì)胞因子在宮頸癌患者血清及陰道灌洗液中的表達(dá)均有相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別為r=0.809、0.722、0.781。
　　結(jié)論
　　1．宮頸癌患者血清中IL-2、IFN-γ減少，IL-4增多，提示Th1/Th2漂移，宮頸癌患者全身免疫受抑制，可能促進(jìn)了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。
　　2．宮頸癌患者陰道灌洗液中I