不同頻率電針背俞穴對(duì)CFS大鼠HPA軸及免疫影響與臨床研究.pdf

1、目的:
　　探討2Hz、100Hz電針背俞穴對(duì)慢性疲勞綜合征(CFS)患者的影響。同時(shí)，通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討2Hz、100Hz電針背俞穴對(duì)慢性疲勞大鼠行為學(xué)、HPA軸及免疫系統(tǒng)的影響。
　　方法:
　　本課題研究分為臨床及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)兩個(gè)方面:
　　1.臨床研究
　　將符合納入標(biāo)準(zhǔn)的92例慢性疲勞綜合征患者按隨機(jī)數(shù)字表法分為三組，其中100Hz組31例，2Hz組30例，常規(guī)針刺組31例。100Hz(100Hz，1m

2、A)組取穴:以背俞穴為主，選取肝俞、心俞、脾俞、肺俞、腎俞。2Hz(2Hz，1mA)組取穴同100Hz組。常規(guī)針刺組取穴同100Hz組及2Hz組，不加電刺激。經(jīng)過(guò)2個(gè)療程治療后，根據(jù)各組患者疲勞積分、抑郁積分、焦慮積分、SF-36各維度積分、33個(gè)臨床癥狀積分進(jìn)行評(píng)價(jià)。其中疲勞、抑郁、焦慮量表積分分三個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行觀察（治療前，治療1療程后，治療2療程后），SF-36各維度積分、33個(gè)臨床癥狀積分分兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行觀察（治療前，治療2療程后

3、）。
　　2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
　　以SPSS20.0隨機(jī)數(shù)字生成器將60只大鼠分為空白組、100Hz組、2Hz組、常規(guī)針刺組、模型組各12只。采用睡眠剝奪+力竭游泳+慢性束縛對(duì)100Hz組、2Hz組、常規(guī)針刺組、模型組大鼠進(jìn)行造模刺激。造模結(jié)束后進(jìn)行治療:100Hz(100Hz，1mA)組治療取穴:肺俞、心俞、脾俞、肝俞、腎俞;2Hz(2Hz，1mA)組治療取穴同100Hz組。常規(guī)針刺組取穴同100Hz組及2Hz組，不加電刺激。以

4、上組別在進(jìn)行治療同時(shí)繼續(xù)同前造模刺激，模型組繼續(xù)同前造模刺激但不治療，空白組不做任何干預(yù)。各組分別在造模前、造模后與治療后進(jìn)行行為學(xué)評(píng)估，治療4周后經(jīng)腹主動(dòng)脈采血、斷頭取腦，采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)其血液中免疫因子水平、ACTH與C0RT水平，以qPCR法檢測(cè)其下丘腦5-HT1aRmRNA、CRHmRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1.疲勞積分:治療1療程后，2Hz組積分較治療前相比顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，10

5、0Hz組及常規(guī)針刺組積分較治療前相比未見(jiàn)明顯降低，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;組間積分比較，2Hz組低于100Hz組及常規(guī)針刺組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），100Hz組與常規(guī)針刺組相比，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療2療程后，三組患者的疲勞積分均顯著低于治療前，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），組間比較，2Hz組低于100Hz組，100Hz組低于常規(guī)針刺組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

6、　　2.抑郁積分:治療1療程后，2Hz組及100Hz組積分較治療前相比均顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，常規(guī)針刺組積分較治療前相比未見(jiàn)明顯降低，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;組間比較，2Hz組低于常規(guī)針刺組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而2Hz組與100Hz組、100Hz組與常規(guī)針刺組相比，差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。治療2療程后，三組患者的抑郁積分均顯著低于治療前，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.

7、05），組間比較，2Hz組低于100Hz組，100Hz組低于常規(guī)針刺組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3.焦慮積分:治療1療程后，2Hz組積分較治療前相比顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，100Hz組及常規(guī)針刺組積分較治療前相比未見(jiàn)明顯降低，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;組間比較，2Hz組低于常規(guī)針刺組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而2Hz組與100Hz組、100Hz組與常規(guī)針刺組相比，差

8、異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。治療2療程后，三組患者的焦慮積分均顯著低于治療前，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），組間比較，2Hz組低于100Hz組，100Hz組低于常規(guī)針刺組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　4.SF-36評(píng)分:治療后，三組患者8個(gè)維度積分均較治療前顯著升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　?、僭贕H、PF、RP、RE、SF方面:組間積分比較:2Hz組高于100Hz組，100H

9、z組高于常規(guī)針刺組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;組間積分差值比較:在GH、RP方面，2Hz組大于100Hz組，100Hz組大于常規(guī)針刺組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;在PF、RE方面，2Hz組與100Hz組差值相當(dāng)（P＞0.05），且均大于常規(guī)針刺組（P＜0.05）;在SF方面，2Hz組大于100Hz組與常規(guī)針刺組(P＜0.05)，100Hz組與常規(guī)針刺組差值相當(dāng)（P＞0.05）。
　?、谠赩T、MH積分與積分

10、差值方面，2Hz組與100Hz組均優(yōu)于常規(guī)針刺組（P＜0.05），2Hz組與100Hz組積分與積分差值相當(dāng)（P＞0.05）。
　?、墼贐P方面，三組積分與積分差值相當(dāng)，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　5.33個(gè)臨床癥狀積分:
　　①100Hz電針治療具有相對(duì)優(yōu)勢(shì)的癥狀包括:健忘、口干、關(guān)節(jié)疼痛、便溏，其積分較治療前顯著降低（P＜0.05），且100Hz組低于2Hz組及常規(guī)針刺組（P＜0.05）。組間積分差值

11、比較:在口干方面，100Hz組大于常規(guī)針刺組（P＜0.05）;100Hz組與2Hz組，2Hz組與常規(guī)針刺組相比，差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在關(guān)節(jié)疼痛方面，100Hz組大于2Hz組（P＜0.05）;100Hz組與常規(guī)針刺組，2Hz組與常規(guī)針刺組相比，差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在便溏方面，100Hz組大于2Hz組及常規(guī)針刺組（P＜0.05）;2Hz組與常規(guī)針刺組相比，差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;在健忘

12、方面，三組差值比較不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　②2Hz電針治療具有相對(duì)優(yōu)勢(shì)的癥狀包括:神疲乏力、肌肉痛或酸困不適、精神抑郁、心悸、過(guò)敏、頸腋下淋巴結(jié)腫大、盜汗、感到肌力下降、頭痛、胸脅脹滿(mǎn)不適、便秘、食欲不振、思考問(wèn)題反應(yīng)遲鈍、做事注意力不集中，其積分較治療前相比顯著降低（P＜0.05），且低于100Hz組及常規(guī)針刺組（P＜0.05）;組間積分差值比較:在感到肌力下降方面，2Hz組大于100Hz組、100Hz組大于常規(guī)

13、針刺組(P＜0.05);在神疲乏力、頭痛、胸脅脹滿(mǎn)不適、便秘方面，2Hz組大于100Hz組及常規(guī)針刺組（P＜0.05），100Hz組與常規(guī)針刺組相比，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;在肌肉痛或酸困不適、心悸、食欲不振、思考問(wèn)題反應(yīng)遲鈍方面，2Hz組大于常規(guī)針刺組（P＜0.05），2Hz組與100Hz組、100Hz組與常規(guī)針刺組比較，差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;在精神抑郁、過(guò)敏、頸腋下淋巴結(jié)腫大、盜汗、做事注意力不集中方

14、面，三組差值相當(dāng)，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　?、?00Hz組與2Hz組電針治療效果相當(dāng)?shù)陌Y狀包括:咽喉疼痛、脘腹?jié)M悶不適、嗜睡，且100Hz組、2Hz組以上臨床癥狀積分均低于常規(guī)針刺組（P＜0.05），組間積分差值變化與積分變化趨勢(shì)一致。
　?、苋M治療效果相當(dāng)?shù)陌Y狀包括:急躁易怒、焦躁不安、善太息、失眠、惡心、吞酸，且以上臨床癥狀積分與治療前相比顯著降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);其組間積分差值變

15、化與積分變化趨勢(shì)一致。
　?、菖c治療前未見(jiàn)明顯差異的癥狀包括:頭暈、噯氣或呃逆、自汗、低熱、咳嗽、畏光羞明。其組間積分差值變化與積分變化趨勢(shì)一致。
　　三組患者臨床癥狀總積分均顯著降低，與治療前相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);組間比較，2Hz組低于100Hz組，100Hz組低于常規(guī)針刺組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且組間積分差值變化趨勢(shì)與積分變化一致。
　　6.大鼠行為學(xué)結(jié)果:造模前，五組大鼠各行

16、為學(xué)結(jié)果無(wú)顯著差異（P＞0.05）;造模后，模型組、100Hz組、2Hz組、常規(guī)針刺組與空白組大鼠比較，體重增長(zhǎng)較慢、力竭游泳時(shí)間縮短、鼠尾懸掛不動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng);曠場(chǎng)試驗(yàn)中，在中央格停留時(shí)間延長(zhǎng)、水平與垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)減少，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。治療后，100Hz組、2Hz組以及常規(guī)針刺組與模型組大鼠比較，體重增長(zhǎng)較快、力竭游泳時(shí)間延長(zhǎng)、鼠尾懸掛不動(dòng)時(shí)間縮短、在中央格停留時(shí)間縮短、水平與垂直運(yùn)動(dòng)次數(shù)增多，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

17、＜0.05)。
　　7.大鼠免疫因子水平:治療后，三個(gè)治療組大鼠血清IL-4水平降低、IFN-γ水平升高、IFN-γ/IL-4比值升高、IL-2水平升高、IL-10水平降低，與模型組相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。其中2Hz組IL-4水平低于100Hz組，100Hz組低于常規(guī)針刺組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;2Hz組IFN-γ水平高于100Hz組及常規(guī)針刺組（P＜0.05），而100Hz組與常規(guī)針刺組相比，

18、差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;2Hz組IFN-γ/IL-4比值高于100Hz組，100Hz組高于常規(guī)針刺組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);2Hz組大鼠血清IL-2水平升高，與100Hz組及常規(guī)針刺組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），100Hz組與常規(guī)針刺組相比，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;三個(gè)治療組大鼠血清IL-10水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　8.大鼠血清中ACTH、CORT

19、水平:三個(gè)治療組大鼠血清中ACTH、CORT水平下降，與模型組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;且組間比較，2Hz組大鼠血清ACTH水平下降，與常規(guī)針刺組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而100Hz組與常規(guī)針刺組，100Hz組與2Hz組相比，差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。2Hz組大鼠血清CORT水平下降，低于100Hz組，而100Hz組低于常規(guī)針刺組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　9.大鼠

20、下丘腦5-HT1aRmRNA、CRHmRNA的表達(dá):三個(gè)治療組大鼠下丘腦5-HT1 aRmRNA表達(dá)上升，且組間比較:2Hz組高于100Hz組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，100Hz組與常規(guī)針刺組水平相當(dāng)，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）;三個(gè)治療組大鼠下丘腦CRHmRNA表達(dá)下降，與模型組相比，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);且組間比較，2Hz組低于100Hz組，100Hz組低于常規(guī)針刺組（P＜0.05）。
　

21、　結(jié)論:
　　電針背俞穴治療慢性疲勞綜合征具有明顯優(yōu)勢(shì)，其中2Hz電針治療效果更佳。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)說(shuō)明電針背俞穴不僅能使大鼠的體重增長(zhǎng)速度加快，行為活動(dòng)能力增強(qiáng)，還可調(diào)節(jié)本病大鼠的免疫功能，抑制Th細(xì)胞向Th2分化，使IL-2水平升高、IL-10水平降低來(lái)幫助維持Th1/Th2的平衡。且電針背俞穴還可使慢性疲勞大鼠血清中ACTH與CORT水平下降，調(diào)節(jié)下丘腦內(nèi)5-HT1aRmRNA、CRHmRNA的表達(dá);臨床研究說(shuō)明電針背俞穴能改善患者