高脂、高糖對(duì)HPA軸功能影響及分子機(jī)制研究.pdf

1、第一部分“脂毒性”損傷海馬、激活下丘腦-垂體-腎上腺軸 目的：海馬負(fù)責(zé)HPA軸的負(fù)反饋調(diào)節(jié)。本研究探討血漿高游離脂肪酸(FFA)是否通過(guò)改變海馬糖皮質(zhì)激素受體(GR)、鹽皮質(zhì)激素受體(MR)、11β-羥類固醇脫氫酶1(11β-HSD1)或誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的表達(dá)，從而“損傷”海馬、激活HPA軸。 方法：20只成年雌性Sprague-Dawley大鼠分成兩組，一組輸注20％脂肪乳(FFA組，n=10)，另一組輸

2、注0.9％生理鹽水作為對(duì)照組(NS組，n=10)。留取0分鐘血漿后以2ml/小時(shí)速度開始輸液共持續(xù)180分鐘，輸液結(jié)束后將老鼠迅速斷頭取血備用，摘取腦組織、速凍，供海馬原位雜交和免疫組化使用。 結(jié)果：(1)輸注NS不能升高血漿FFA濃度，而FFA組180分鐘的血漿FFA濃度明顯升高，是其輸液前5.1倍。(2)兩組的基礎(chǔ)ACTH和皮質(zhì)酮濃度無(wú)差異。比較輸液前后的凈改變量，F(xiàn)FA 組的ΔACTH(15.6±10.2 pg.ml)明顯

3、高于NS組的ΔACTH(2.6±3.9 pg/ml)。與基礎(chǔ)值相比，兩組180分鐘的皮質(zhì)酮水平均下降，但 FFA 組下降幅度(104.6±193.1 ng/ml)明顯低于NS組的△皮質(zhì)酮(187.2±167.3ng.ml)。相對(duì)NS組而言，輸注脂肪乳輕度激活HPA軸。(3)與NS組相比，F(xiàn)FA組海馬CA4亞區(qū)錐體細(xì)胞的11β-HSD1蛋白表達(dá)水平以及mRNA水平均明顯減少。但是。FFA組海馬CA4亞區(qū)錐體細(xì)胞的iNOS蛋白表達(dá)水平以及m

4、RNA水平卻明顯增加。(4)兩組海馬結(jié)構(gòu)的GR與MR蛋白表達(dá)水平以及mRNA水平無(wú)明顯差異。 結(jié)論：本研究的結(jié)果支持 FFA 可能“損傷”海馬激活 HPA 軸的假說(shuō)。這種激活機(jī)制可能是由于FFA下調(diào)海馬局部11β-HSD1的表達(dá)、上調(diào)iNOS的表達(dá)，減弱了海馬對(duì)HPA軸的抑制調(diào)控。 第二部分PCOS患者胰島p細(xì)胞功能變化以及高糖刺激對(duì)其血漿皮質(zhì)醇水平的影響 目的：了解多囊卵巢綜合癥(PCOS)患者空腹血漿皮質(zhì)醇濃

5、度的變化及其影響因素，以及短期高糖或高胰島素刺激對(duì)其皮質(zhì)醇水平的影響，同時(shí)了解PCOS患者胰島β細(xì)胞功能狀況。 方法：84例PCOS患者分為肥胖組(肥胖或超重，n=34)和非肥胖組(正常體重，n=50人)；20名正常體重的健康婦女作為對(duì)照組。所有受試者先行口服75g無(wú)水葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)，隔天空腹進(jìn)行60分鐘高糖刺激(靜脈葡萄糖耐量試驗(yàn)，IVGTT)和120分鐘高胰島素一正糖鉗夾術(shù)(簡(jiǎn)稱正糖鉗夾術(shù))。測(cè)定空腹葡萄糖、胰島

6、素濃度，以及IVGTT、正糖鉗夾術(shù)期間的皮質(zhì)醇濃度(0，60，180分鐘三個(gè)點(diǎn))，皮質(zhì)醇的相對(duì)變化即下降幅度：△皮質(zhì)醇<,x>=空腹皮質(zhì)醇—皮質(zhì)醇<,x>(x指時(shí)間)。胰島素敏感性 (IS)采用正糖鉗夾術(shù)階段胰島素介導(dǎo)的葡萄糖代謝率(M值，mg.kg-1.min-1)表示。胰島β細(xì)胞功能(βF)采用IVGTT第一時(shí)相胰島素分泌量(AIR)評(píng)估。葡萄糖處置指數(shù)(DI)=IS×AIR。 結(jié)果：(1)肥胖PCOS組空腹皮質(zhì)醇濃度(15

7、8.85±78.76 ng/ml)明顯低于非肥胖PCOS組(210.70±108.65 ng/ml)和對(duì)照組(231.23±89.21ng/ml)，而非肥胖組與對(duì)照組間無(wú)明顯差異。(2)高糖刺激結(jié)束后，即60分鐘時(shí)肥胖組血漿皮質(zhì)醇濃度(87.66±33.74 ng/ml)仍然最低，與正常對(duì)照組(141.46±45.84 ng/ml)相比較仍有顯著差異，但與非肥胖組(123.76±86.98 ng/ml)的差別已經(jīng)不明顯，而非肥胖組與對(duì)照

8、組之間無(wú)差異。比較各組60分鐘時(shí)血漿皮質(zhì)醇的相對(duì)變化△皮質(zhì)醇<,60>，三組間并無(wú)差別(肥胖組：65.03±59.28 ng/ml；非肥胖組：86.62±66.71ng/ml；對(duì)照組：89.77±74.26 ng/ml)。(3)高胰島素刺激結(jié)束后，即180分鐘時(shí)三組的皮質(zhì)醇濃度已無(wú)差異(肥胖組：116.07±48.53 ng/ml；非肥胖組：120.53±83.65 ng/ml；對(duì)照組：123.20±53.61 ng/ml)。但是肥胖組

9、血漿皮質(zhì)醇的相對(duì)變化△皮質(zhì)醇<,180>最小(39.28±72.94 ng/ml)，與非肥胖組(89.89±102.49 ng/ml)和對(duì)照組(108.03±108.17 ng/ml)相比較，存在明顯差異。非肥胖組與對(duì)照組之間無(wú)差異。(4)對(duì)84例PCOS患者進(jìn)行兩兩相關(guān)分析結(jié)果顯示空腹皮質(zhì)醇與M值、BMI、空腹血糖存在負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為-0.241、-0.230、-0.253，p值均<0.05?？崭蛊べ|(zhì)醇和空腹胰島素的相關(guān)系數(shù)為

10、-0.200，p=0.071，其相關(guān)性可疑。以空腹皮質(zhì)醇為應(yīng)變量，多元回歸分析的結(jié)果提示M值、BMI、空腹胰島素3個(gè)自變量被納入回歸模型中，反而空腹血糖沒被引入回歸模型中。(5)三組間 AIR 差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但PCOS患者有增高趨勢(shì)，尤以肥胖者明顯(P=0.074)。非肥胖和肥胖PCOS組DI比對(duì)照組降低，但前兩組間差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：本研究顯示PCOS患者基礎(chǔ)皮質(zhì)醇水平不僅與體重有關(guān)，還與胰島素敏感性和空腹胰島素水平