大腸桿菌感光雙組分系統(tǒng)的構建.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、雙組分系統(tǒng)是普遍存在于細菌中的信號傳導系統(tǒng),它主要由兩部分構成:組氨酸激酶(HK)和反應調(diào)控蛋白(RR),組氨酸激酶屬于跨膜轉運蛋白,可以感受外界的信號并進行自磷酸化,隨后將磷酸基團傳遞給相應的反應調(diào)控蛋白RR,活化的反應調(diào)控蛋白可以結合到相應的啟動子區(qū)域,啟動下游基因的表達。不同的雙組分系統(tǒng)能夠感受不同的外界信號,為了系統(tǒng)的研究細菌中的雙組分系統(tǒng),我們利用了光遺傳的技術來重構組氨酸激酶,將感光基因Cph1的感光片段與組氨酸激酶的保守的

2、組氨酸激酶結構域連接起來,形成感光的融合蛋白,從而使重構的雙組分系統(tǒng)能夠感受紅光,用光信號代替原有的信號。
  感光組氨酸激酶的表達是雙載體的表達系統(tǒng),實驗中我們通過篩選得到了8種雙組分系統(tǒng)的感光融合體系(UhpB-UhpA,PhoR-PhoB,YedV-YedW,RstB-RstA,GlrK-GlrR,CusS-CusR,PhoQ-PhoP和CpxA-CpxR)。為了進一步的應用,我們對UhpB-UhpA這組感光雙組分系統(tǒng)進行了

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