蛋白激酶B-糖原合成激酶3β信號(hào)通路與瓣膜病心房纖顫發(fā)生的關(guān)系.pdf

1、研究背景
　　隨著我國(guó)人口結(jié)構(gòu)老齡化，心房纖顫（atrial fibrillation，AF）的發(fā)生率逐漸提高。瓣膜性心臟病伴發(fā)房顫時(shí)，栓塞和心衰的風(fēng)險(xiǎn)成倍增加，成為家庭和社會(huì)巨大的醫(yī)療負(fù)擔(dān)。目前關(guān)于房顫的發(fā)生有很多假說(shuō)，比如心肌結(jié)構(gòu)重塑，局灶沖動(dòng)連續(xù)發(fā)放，多發(fā)折返環(huán)，以及離子通道電流失常等等。但是，準(zhǔn)確的發(fā)病機(jī)制仍未完全清楚。
　　近年來(lái)，鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(Calcineurin，CaN)因在心肌肥厚中發(fā)揮重要作用備受關(guān)注。

2、CaN是一種Ca2+/鈣調(diào)蛋白依賴(lài)的蛋白磷酸酶，可將細(xì)胞漿中的活化T細(xì)胞核因子（Nuclear Factor of Activated T-cells，NFAT）去磷酸化從而使其激活，活化的NFAT轉(zhuǎn)入細(xì)胞核，啟動(dòng)心肌肥厚基因的表達(dá)。與此作用相反的是，糖原合成激酶3β(glycogen synthase kinase3β，GSK3β)又可將NFAT磷酸化使其失活，促進(jìn)NFAT轉(zhuǎn)出細(xì)胞核，中斷肥厚基因表達(dá)。蛋白激酶B(Protein ki

3、nase B，Akt/PKB)是GSK3β上游一個(gè)強(qiáng)有力的調(diào)節(jié)因子，當(dāng)Akt第473位絲氨酸（Ser-473）被磷酸化，轉(zhuǎn)變成活化形式p-Akt，p-Akt可將GSK3β位于N端的第9位絲氨酸(Ser-9)磷酸化，使其轉(zhuǎn)變成無(wú)活性的p-GSK3β。最近，有研究表明CaN-NFAT通路參與了房顫的發(fā)生?；贑aN-NFAT通路和GSK3β-NFAT通路在心肌肥厚過(guò)程中的交叉關(guān)系，我們推測(cè)直接影響NFAT活性的Akt-GSK3β通路也可能參

4、與了房顫的發(fā)生過(guò)程。
　　然而，關(guān)于瓣膜性房顫中Akt-GSK3β信號(hào)通路的研究數(shù)據(jù)有限，尤其是人類(lèi)中更少。因此，設(shè)計(jì)這個(gè)實(shí)驗(yàn)用來(lái)探究Akt-GSK3β信號(hào)通路是否參與人類(lèi)瓣膜性房顫的發(fā)生。
　　研究目的
　　探討Akt-GSK3β信號(hào)通路與瓣膜性房顫發(fā)生的關(guān)系。
　　研究方法
　　研究對(duì)象包括42名接受心臟換瓣手術(shù)的成人瓣膜病患者，按患者的心律狀況分為2組:心房纖顫組(n=18)，竇性心律組(n=24)，

5、手術(shù)前收集患者的一般資料及輔助檢查的數(shù)據(jù)。通過(guò)蛋白免疫印跡法檢測(cè)患者左心房心肌組織中鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)，總蛋白激酶B(total Akt)，磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)，總糖原合成激酶3β(total GSK3β)和磷酸化糖原合成激酶3β(p-GSK3β)的蛋白表達(dá)水平，以磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)為內(nèi)參，所得條帶灰度值的比值作為以上蛋白表達(dá)的相對(duì)含量。
　　研究結(jié)果
　　1.臨床特征方面的分析:兩組病人在性別、

6、年齡、血壓、BMI等方面，未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均＞0.05）;但房顫組病人的心率、BNP明顯高于竇律組，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）。
　　2.服用藥物方面的分析:房顫組病人服用β阻劑和地高辛的比率高于竇律組，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05）;其他藥物方面未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＞0.05）。
　　3.心功能方面的分析:房顫組病人的心功能較竇律組差，具體表現(xiàn)在左心室射血分?jǐn)?shù)偏低，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)

7、。
　　4.兩組樣本中Akt-GSK3β及CaN蛋白表達(dá)情況分析:以GAPDH為參照，房顫組活化形式的p-Akt、非活化形式的p-GSK3β及總GSK3β蛋白表達(dá)水平均高于竇性心律組(p-Akt1.027±0.126 vs0.729±0.113，P＜0.001;p-GSK3β0.802±0.116 vs0.482±0.076,P＜0.001;total GSK3β1.047±0.162 vs0.703±0.109,P＜0.001)

8、，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示房顫心房肌活化形式的p-Akt蛋白表達(dá)增加，使GSK3β變成失活形式的p-GSK3β增加，從而使NFAT從細(xì)胞核轉(zhuǎn)出核外的作用減弱，促進(jìn)了房顫的發(fā)生。此外，兩組樣本之間總Akt(1.074±0.089 vs1.028±0.0945，P=0.124)的蛋白表達(dá)水平未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。房顫組中CaN（1.097±0.153 vs0.919±0.142，P＜0.001）的蛋白表達(dá)水平高于竇律組。
　　研究結(jié)論