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1、目的:觀察固本防哮飲對(duì)緩解期小鼠哮喘模型肺組織及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-8表達(dá)水平的影響。
方法:采用卵蛋白(OVA)霧化聯(lián)合呼吸道合胞病毒(RSV)滴鼻反復(fù)致敏刺激BALB/c雌性小鼠,制備小鼠緩解期哮喘模型。末次激發(fā)后將小鼠隨機(jī)分成正常組、模型組、固本防哮飲預(yù)防組、固本防哮飲低、中、高劑量組、孟魯司特鈉組、地塞米松組(每組15只),每天灌胃給藥1次,共4周,末次給藥后24小時(shí)取標(biāo)本備檢。觀察各組小鼠的一般行為活動(dòng),取
2、肺組織病理切片行蘇木精-伊紅(HE)染色觀察炎性細(xì)胞浸潤(rùn),用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Real time-PCR)測(cè)定肺組織TNF-α、IL-8 mRNA表達(dá),酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)肺泡灌洗液TNF-α、IL-8蛋白表達(dá)水平。最后采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法,進(jìn)行數(shù)據(jù)分析及處理。
結(jié)果:1.HE染色:正常組小鼠肺泡結(jié)構(gòu)完整,肺泡腔內(nèi)未見(jiàn)明顯炎性分泌物,模型組肺泡結(jié)構(gòu)破壞,可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),主要為淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、嗜酸性
3、粒細(xì)胞,肺泡管腔內(nèi)粘液增多,氣道粘膜水腫明顯;固本防哮飲預(yù)防組、固本防哮飲低、中、高劑量組、孟魯斯特鈉組、地塞米松組病理改變較模型組減輕,有少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),粘膜水腫、粘液分泌不明顯。2.PCR結(jié)果提示:模型組TNF-α、IL-8mRNA表達(dá)水平比正常組增高明顯;固本防哮飲預(yù)防組、固本防哮飲中、高組、孟魯司特鈉組、地塞米松組與模型組比,TNF-α、IL-8表達(dá)均有所下調(diào),且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,固本防哮飲低劑量組TNF-α mRNA表達(dá)與模型組
4、相比差異不顯。3.ELISA結(jié)果提示:模型組TNF-α、IL-8蛋白表達(dá)水平比正常組增高明顯,其余各組蛋白表達(dá)水平較模型組均降低,但固本防哮飲低劑量組與模型組比較未能顯示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)論:1.TNF-α、IL-8是哮喘發(fā)病過(guò)程中重要的炎癥因子,可以作為判斷疾病變化和治療療效的指標(biāo)之一;2.固本防哮飲對(duì)TNF-α、IL-8有調(diào)節(jié)作用,能夠下調(diào)哮喘模型中TNF-α、IL-8的水平,減輕氣道炎癥,在一定程度上減輕和預(yù)防哮喘的發(fā)作。
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