中藥防哮飲對(duì)哮喘小鼠模型Th1-Th2型細(xì)胞因子水平的影響.pdf

1、目的:觀察中藥防哮飲對(duì)哮喘小鼠血清白介素-4(IL-4)、γ-干擾素(IFN-γ)及IL-4/IFN-γ以及肺組織病理學(xué)的影響，探討中藥防哮飲早期干預(yù)治療對(duì)哮喘小鼠Th1/Th2細(xì)胞亞群反應(yīng)的影響及其防治哮喘的作用機(jī)理，為防哮飲早期干預(yù)防治哮喘提供科學(xué)的依據(jù)，為后期深入研究打下基礎(chǔ)。
　　 方法:參照文獻(xiàn)方法采用腹腔注射卵蛋白(OVA)致敏液后激發(fā)復(fù)制小鼠哮喘模型，將50只BALB/c健康小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，即A:正常

2、對(duì)照組、B:哮喘模型組、C:防哮飲小劑量(10g/kg)組、D:防哮飲大劑量(50g/kg)組、E:布地奈德(BUD)組。B、C、D、E組:于第0天和第14天各組小鼠分別腹腔注射致敏液（含100μg OVA和40mg氫氧化鋁）0.2ml。于第24、25、26天將小鼠置于密閉容器(20cm×30cm×40cm)中，以2％的OVA溶液10ml空氣壓縮霧化吸入進(jìn)行抗原攻擊，每天1次。A組:以生理鹽水代替OVA以同樣的方法致敏激發(fā)小鼠;中藥防哮

3、飲組從小鼠第1次致敏當(dāng)天起預(yù)防性給藥，將防哮飲按小劑量含生藥0.5g/ml、大劑量含生藥2.5g/ml以灌胃的方式給藥，每天1次，每次0.4ml，共26天，BUD組則從致敏后第23天起每天1次在乙醚吸入麻醉下予鼻腔內(nèi)滴注BUD，劑量為250μg/kg。正常對(duì)照組和哮喘模型組則以等量生理鹽水灌胃，實(shí)驗(yàn)過程中，定期觀察小鼠的精神狀態(tài)、活動(dòng)、進(jìn)食等大體情況。在最后1次激發(fā)后48h（第28天）處死小鼠，取外周血，采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(E

4、LISA)檢測(cè)血清IL-4和IFN-γ水平;并取肺觀察組織病理學(xué)改變。
　　 結(jié)果:與正常組比較，哮喘模型組外周血IL-4水平、IL-4/IFN-γ比例顯著升高（P＜0.01），IFN-γ水平降低（P＜0.01）;與哮喘模型組比較，防哮飲大劑量組、防哮飲小劑量組及布地奈德組(BUD)能夠明顯降低哮喘小鼠血清IL-4水平和IL-4/IFN-γ比例（P＜0.01），防哮飲大劑量組和BUD組IFN-γ水平顯著升高（P＜0.01），防哮

5、飲小劑量組中IFN-γ水平變化無顯著性差異（P＞0.05）。哮喘模型組小鼠肺組織蘇木精-伊紅（HE）染色觀察見小鼠肺部出現(xiàn)變態(tài)反應(yīng)性炎癥，表現(xiàn)為氣道和血管周圍出現(xiàn)大量的炎癥細(xì)胞漫潤(rùn)，以嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)和中性粒細(xì)胞為主，過碘酸-雪夫(PAS)染色示杯狀細(xì)胞增生、黏液分泌增加。與哮喘模型組比較，防哮飲小劑量組、防哮飲大劑量組支氣管黏膜修復(fù)得較完整，其中防哮飲小劑量組氣管周圍仍有較多炎癥細(xì)胞、PAS染色示增生的杯狀細(xì)胞仍較多;防哮飲大劑

6、量組干預(yù)后氣道及血管周圍炎癥浸潤(rùn)得到明顯抑制，EOS極少，PAS染色示杯狀細(xì)胞極少，氣道黏液分泌得到很好抑制;經(jīng)過BUD處理的小鼠，其肺組織中氣道和血管周圍基本未見炎癥細(xì)胞漫潤(rùn)，氣道炎癥得到很好抑制，和正常小鼠肺組織切片大體一致。
　　 結(jié)論:中藥防哮飲早期干預(yù)治療哮喘具有抑制Th2細(xì)胞亞群優(yōu)勢(shì)反應(yīng)，降低小鼠血清IL-4水平，上調(diào)IFN-γ水平，糾正Th1/Th2失衡，從而抑制哮喘氣道炎癥反應(yīng)，減輕哮喘的癥狀及控制哮喘的發(fā)作，達(dá)