固本防哮飲和黃芪甲苷對(duì)LPS誘導(dǎo)BEAS-2B細(xì)胞分泌IL-2、IL-5、TNF-α水平的影響.pdf

1、目的:本課題主要通過人支氣管上皮細(xì)胞(BEAS-2B)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，觀察固本防哮飲及其有效成分黃芪甲苷對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)BEAS-2B細(xì)胞中IL-2、IL-5、TNF-α分泌水平的影響。
　　方法:用LPS刺激正常BEAS-2B細(xì)胞造模，將造模成功細(xì)胞分為固本防哮飲血清高、中、低劑量組和黃芪甲苷高、中、低劑量組，用藥干預(yù)24h后收集細(xì)胞及其上清液，采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(real-time PCR)和ELISA測定法測

2、定細(xì)胞中IL-2、IL-5、TNF-α分泌水平。
　　結(jié)果:(1)固本防哮飲及黃芪甲苷對(duì)IL-2的影響:模型組與正常細(xì)胞組相比，細(xì)胞中IL-2濃度升高，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。經(jīng)給藥干預(yù)模型組細(xì)胞后，觀察各組IL-2濃度，含藥血清高、中、低劑量組和黃芪甲苷高、中、低劑量組中IL-2濃度均明顯下降，與造模組細(xì)胞相比有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01);黃芪甲苷高、中、低劑量組兩兩比較IL-2濃度，均不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.0

3、5);含藥血清各劑量組之間比較IL-2濃度，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，且中、高劑量組IL-2表達(dá)顯著低于低劑量組(P＜0.01);黃芪甲苷組IL-2濃度明顯低于含藥血清組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。(2)固本防哮飲及黃芪甲苷對(duì)IL-5的影響:模型組與正常細(xì)胞組相比，細(xì)胞中IL-5濃度升高，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。經(jīng)給藥干預(yù)模型組細(xì)胞后，觀察各組中IL-5分泌水平，各給藥組IL-5濃度均低于模型組，存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差

4、異(P＜0.01);黃芪甲苷各劑量組之間，中、高劑量組IL-5表達(dá)濃度明顯低于低劑量組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01);含藥血清不同劑量組之間，含藥血清濃度與IL-5表達(dá)濃度成反比，不同劑量組之間兩兩比較均存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01);黃芪甲苷組IL-5濃度低于含藥血清組，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異明顯(P＜0.01)。(3)固本防哮飲及黃芪甲苷對(duì)TNF-α的影響:模型組與正常細(xì)胞組相比，細(xì)胞中TNF-α明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。

5、經(jīng)給藥干預(yù)模型組細(xì)胞后，觀察各組中TNF-α分泌水平，含藥血清各組及黃芪甲苷各組TNF-α分泌水平與模型組相比明顯下降，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01);黃芪甲苷組中，中劑量組TNF-α濃度最低，與低、高劑量組之間有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01);含藥血清各劑量組間TNF-α分泌水平有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，含藥血清濃度越高，TNF-α濃度越低;黃芪甲苷組TNF-α濃度低于含藥血清組，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異明顯(P＜0.01)。(4)固本防

6、哮飲及黃芪甲苷對(duì)K-2mRNA水平的影響:模型組與正常細(xì)胞組相比，IL-2mRNA明顯升高，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。經(jīng)給藥干預(yù)模型組細(xì)胞后，觀察各組中IL-2mRNA分泌水平，含藥血清組及黃芪甲苷組IL-2mRNA分泌水平明顯低于模型組，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01);黃芪甲苷不同劑量組之間劑量越大IL-2mRNA表達(dá)量越低，存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01);含藥血清低劑量組IL-2mRNA分泌濃度最高，與另兩組之間存在明

7、顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)，中高劑量組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);含藥血清組IL-2mRN表達(dá)量均高于黃芪甲苷組，存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:1.固本防哮飲含藥血清及其有效成份黃芪甲苷可有效抑制BEAS-2B細(xì)胞中炎癥因子IL-2、IL-5、TNF-α的分泌。
　　2.固本防哮飲含藥血清及其有效成份黃芪甲苷可控制BEAS-2B細(xì)胞中IL-2mRNA的表達(dá)水平。
　　3.固本防哮飲作用機(jī)制可能