改良鉍劑四聯(lián)方案根除幽門螺桿菌的臨床研究.pdf

1、第一部分：含大劑量甲硝唑和阿莫西林的鉍劑四聯(lián)療法治療幽門螺桿菌感染的臨床研究
　　目的：評估含大劑量甲硝唑和阿莫西林的改良鉍劑四聯(lián)療法治療幽門螺桿菌感染的療效和安全性。
　　方法：215例符合納入標準的H.pylori感染者隨機分為以下兩組：甲硝唑組（蘭索拉唑30mg b.i.d.+麗珠得樂220mg b.i.d.+阿莫西林1000mg b.i.d.+甲硝唑400mg q.i.d.）和克拉霉素組（蘭索拉唑30mg b.i.d

2、.+麗珠得樂220mg b.i.d.+阿莫西林1000mg b.i.d.+克拉霉素500mg b.i.d.），其中克拉霉素組為對照組，甲硝唑組為試驗組，療程均為14天。治療結(jié)束6周后做13C-尿素呼氣試驗復查。從患者胃粘膜中分離得到的H.pylori，采用瓊脂稀釋的方法檢測其對甲硝唑、克拉霉素和阿莫西林的敏感性。
　　結(jié)果：215例患者入選，其中甲硝唑組108例，克拉霉素組107例。PP分析中，甲硝唑組的根除率為96.9%(94/

3、97;95% CI,93.5%-100%)，克拉霉素組的根除率為94.9%(93/98;95%CI,90.5%-99.3%)；ITT分析中，甲硝唑組的根除率為88.9%(96/108;95%CI,83.0%-94.8%)，克拉霉素組的根除率為88.8%(95/107;95%CI,82.8%-94.8%)。H. pylori對克拉霉素的耐藥率為26.5%（53/200），對阿莫西林的耐藥率為1.5%（3/200），對甲硝唑的耐藥率為45.

4、5%（91/200）?？死顾啬退帟@著降低克拉霉素組的根除率(敏感菌98.6%vs.耐藥菌76.9%，p=0.001)。甲硝唑耐藥對H. pylori根除率無顯著影響(敏感菌96.4% vs.耐藥菌93.3%，p=0.802)。
　　結(jié)論：阿莫西林可以取代經(jīng)典鉍劑四聯(lián)療法中的四環(huán)素并得到較高的根除率，大劑量、長療程的使用甲硝唑可以部分克服耐藥，在耐藥菌中的表現(xiàn)令人滿意；克拉霉素耐藥會顯著降低含克拉霉素方案的療效，在克拉霉素高耐藥

5、地區(qū)不應再使用。
　　第二部分：體外誘導幽門螺桿菌對左氧氟沙星耐藥對克拉霉素敏感性的影響及機制探討
　　目的：通過體外誘導耐藥試驗初步探討左氧氟沙星和克拉霉素是否存在交叉耐藥以及可能的機制。
　　方法：從患者胃粘膜分離培養(yǎng)出H.pylori，瓊脂稀釋法確定其對克拉霉素和左氧氟沙星敏感后，從中隨機選取10株敏感菌進行體外克拉霉素和左氧氟沙星耐藥誘導試驗；誘導后行藥敏試驗再次確定其對克拉霉素和左氧氟沙星的敏感性，然后分別提

6、取野生型和誘導后細菌的基因組DNA，擴增23S rRNA、gyrA、gyrB基因，測序并與標準菌株26695相應基因的序列比對，找出突變位點。
　　結(jié)果：10株H. pylori，左氧氟沙星誘導耐藥后，有4株菌對左氧氟沙星耐藥，左氧氟沙星耐藥菌gyrA基因以87和91位點的突變?yōu)橹鳎挥?株菌對克拉霉素耐藥，其中有2株對左氧氟沙星也耐藥，與野生型菌株相比克拉霉素耐藥菌均無23S rRNA基因的突變。而克拉霉素誘導耐藥后，未發(fā)現(xiàn)對左氧

7、氟沙星耐藥的菌株，其相關(guān)耐藥基因也未發(fā)現(xiàn)突變；有3株菌對克拉霉素耐藥，23S rRNA基因的突變以A2143G為主。
　　結(jié)論：在體外左氧氟沙星可以誘導H. pylori對克拉霉素的耐藥，而23S rRNA基因并未出現(xiàn)突變，可能與左氧氟沙星激活外排泵有關(guān)；而克拉霉素在體外沒有誘導出對左氧氟沙星耐藥的菌株。因此在初次治療時應首選克拉霉素，可以減少交叉耐藥的產(chǎn)生。
　　第三部分：膽汁反流對胃粘膜菌群多樣性的影響
　　目的:

8、膽汁反流是消化科常見的癥狀之一，但是在膽汁反流發(fā)生的過程中胃粘膜菌群特征變化仍不明確，本研究分析膽汁反流患者胃黏膜菌群的變化特征。
　　方法:共收集29例符合條件的胃粘膜標本，其中包括6例殘胃和膽汁反流，6例殘胃，12例膽汁反流，5例正常對照。提取黏膜組織基因組DNA,應用PCR方法擴增16S rRNA,進行454焦磷酸測序。測序數(shù)據(jù)應用操作單元(operational taxonomic units,OTU)聚類分析、多樣性分析

9、和分類學分析等生物信息技術(shù)分析胃黏膜菌群的結(jié)構(gòu)、多樣性和豐度。
　　結(jié)果:測序后最終得到有效分析序列216363條,經(jīng)鑒定細菌來源29個門的224個屬，其中變形菌門（Proteobacteria），硬壁菌門（Firmicutes）,放線菌門（Actinobacteria）,擬桿菌門（Bacteroidetes），梭桿菌門（Fusobacteria）五個菌門的含量最多，占到了測序序列總數(shù)的95%以上。各研究組的菌群多樣性未見明顯不同

10、，但含量有所不同。變形菌門（Proteobacteria）在膽汁反流病人胃粘膜菌群中的含量顯著減少，而健康成人胃粘膜菌群主要是由變形菌門（Proteobacteria）和硬壁菌門（Firmicutes）構(gòu)成，菌門的多樣性要顯著少于其他各組。我們發(fā)現(xiàn)鏈球菌屬在膽汁反流和殘胃中豐度要高與其他組，另外口腔普氏菌在膽汁反流病人胃粘膜中的豐度更高。
　　結(jié)論:正常胃黏膜菌群多樣性豐富,以變形菌門和硬壁菌門為主,膽汁反流病人胃粘膜菌群雖多樣性