自吸自離散式數(shù)字核酸擴(kuò)增微流控芯片的研究.pdf

1、數(shù)字核酸擴(kuò)增技術(shù)是一項(xiàng)對(duì)所檢測(cè)的目標(biāo)核酸分子進(jìn)行絕對(duì)定量的技術(shù)，進(jìn)行數(shù)字核酸擴(kuò)增檢測(cè)的前提需要將待檢測(cè)的目標(biāo)分子離散為獨(dú)立的反應(yīng)單元。設(shè)計(jì)一種能夠自動(dòng)、簡(jiǎn)便、高效的執(zhí)行數(shù)字核酸擴(kuò)增的樣品離散化操作的平臺(tái)，對(duì)于數(shù)字核酸技術(shù)的推廣具有重要意義。本文借助軟光刻技術(shù)的快速成型優(yōu)勢(shì)，設(shè)計(jì)研制了一種可以用于數(shù)字核酸擴(kuò)增的樣品自吸自離散化操作的微流控芯片。對(duì)芯片的流速、進(jìn)樣的均一性、水分蒸發(fā)量和傳熱性能進(jìn)行了測(cè)試和優(yōu)化。最后，在所設(shè)計(jì)的芯片上實(shí)現(xiàn)了數(shù)

2、字核酸環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)檢測(cè)和數(shù)字PCR檢測(cè)。該芯片整合了PDMS芯片無動(dòng)力源順序進(jìn)樣(PFSI)的優(yōu)勢(shì)，無需任何外接的驅(qū)動(dòng)設(shè)備便可實(shí)現(xiàn)樣品的自動(dòng)引入，大大提高了微流控裝置的便攜性，同時(shí)采用“樣品自數(shù)字化(SD)”的靜態(tài)液滴陣列生成技術(shù)，不需要復(fù)雜的閥門結(jié)構(gòu)便可將樣品離散為上千個(gè)獨(dú)立的反應(yīng)單元，進(jìn)一步降低了微流控芯片制作的復(fù)雜度。采用LAMP反應(yīng)進(jìn)行數(shù)字核酸擴(kuò)增，可以降低對(duì)加熱設(shè)備溫度控制的要求。結(jié)合上述優(yōu)勢(shì)，本研究所設(shè)計(jì)的自吸