基于微流控芯片技術的微量核酸擴增應用研究.pdf

1、微流控芯片技術（Microfluidics）是一種在微通道內(nèi)對微流體進行精密操控的實驗技術。該技術可將化學、生物等領域中所涉及的多種反應步驟高度集成在一塊微小的芯片上（μm2~cm2），以其精確的樣本控制、微量的試劑損耗、良好的生物相容性、較高的反應效率和分析通量、較低的生產(chǎn)成本、高度集成自動化等特點，廣泛應用于基因組測序、疾病診斷與治療、藥物合成和篩選等領域，是21世紀最為重要的前沿性分析技術之一。
　　隨著精準醫(yī)療計劃的啟動，

2、人類對腫瘤的探索已不僅僅局限于腫瘤大體表型的研究，基于腫瘤基因組、轉錄組、蛋白組等微量樣本分子層面的深入研究將有助于從根本上發(fā)現(xiàn)腫瘤的衍生機制、進化過程和特異靶點。那么，如何對這些微量樣本予以更準確、更高效、更廉價的檢測和實驗，是腫瘤學研究需要解決的首要問題。
　　本研究以微流控芯片技術的設計和加工為出發(fā)點，應用模塑法成功制備了PDMS材料的液滴微流控芯片并搭建了標準化的液滴微流控芯片系統(tǒng)；通過液滴制備實驗，發(fā)現(xiàn)在確定微通道結構和

3、兩相溶液粘度系數(shù)的情況下，影響液滴制備的因素主要為連續(xù)相與分散相的流速比例，并確定了相關液滴制備屬性的預測公式以對該系統(tǒng)進行靈活的控制；應用該系統(tǒng)可制備高度均一的液滴（CV％<5%），同時液滴體積靈活可控（0.81 pL~0.26 nL,11.56μm~78.94μm），且較快的制備速率使其具有高通量應用特性（103~106 droplets/min）；最后，我們通過應用該系統(tǒng)對微量核酸進行qPCR擴增實驗，發(fā)現(xiàn)該系統(tǒng)與傳統(tǒng)qPCR實驗