羥基磷灰石涂層的鎂-釹-鋅-鋯合金促進(jìn)骨再生的體內(nèi)外研究.pdf

1、目的：
　　1、明確合金及其涂層對(duì)MC3T3-E1細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。
　　2、明確合金及其涂層植入體內(nèi)后的材料降解及成骨情況。
　　研究方法：
　　1、體外實(shí)驗(yàn)通過(guò)采用空白組、鈦合金組、JDBM組、HA-JDBM組的浸提液培養(yǎng)MC3T3-E1細(xì)胞；采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活力；流式凋亡法檢測(cè)細(xì)胞凋亡；免疫熒光檢測(cè)細(xì)胞骨鈣素(osteocalcin，OC)和轉(zhuǎn)錄因子RUNX2；RT-PCR檢測(cè)ALP、COL

2、 I、OC和OPN基因表達(dá)情況。
　　2、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)通過(guò)采用鈦合金組、JDBM組、HA-JDBM組3組材料固定大鼠脛骨骨折，通過(guò)苦味酸品紅染色觀察成骨情況；X線和Micro-CT掃描觀察植入材料降解和成骨情況。
　　結(jié)果：
　　1、HA-JDBM組的細(xì)胞活性最高，且在6d內(nèi)呈遞增趨勢(shì)。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，ALP表達(dá)呈上升趨勢(shì)。JDBM組和HA-JDBM組ALP表達(dá)水平總體較空白組和Ti合金組高。
　　2、流式凋亡顯

3、示HA-JDBM組存活細(xì)胞比例最高，死亡和凋亡細(xì)胞比例最低，提示HA-JDBM具有良好的生物相容性。
　　3、免疫熒光顯示三組材料浸提液培養(yǎng)的細(xì)胞活性較好，未見(jiàn)明顯細(xì)胞紅染，HA-JDBM組細(xì)胞OC和RUNX2含量最高，細(xì)胞增殖密度最高。
　　4、qRT-PCR結(jié)果顯示了ALP、COL1、OC和OPN基因表達(dá)隨著時(shí)間延長(zhǎng)呈現(xiàn)遞增趨勢(shì)，同一時(shí)間點(diǎn)HA-JDBM組基因表達(dá)最為顯著，空白組最低。
　　5、JDBM組形成皮下氣

4、腫，髓腔內(nèi)可見(jiàn)少量氫氣。4周時(shí)，JDBM組和HA-JDBM組骨折愈合速度快于Ti合金組。Micro-CT檢查發(fā)現(xiàn)6周時(shí)JDBM髓內(nèi)釘斷裂，說(shuō)明過(guò)快的材料降解超過(guò)了骨折愈合所需時(shí)間，而Ti合金組和HA-JDBM組髓內(nèi)釘基本都能維持較好的完整形態(tài)，說(shuō)明JDBM植入體內(nèi)后其降解速度快于HA-JDBM樣品。
　　6、苦味酸-品紅染色結(jié)果顯示JDBM組髓內(nèi)釘材料與新生骨間存在小間隙，而Ti合金組和HA-JDBM組未見(jiàn)明顯間隙。Ti合金組新生