AM調(diào)節(jié)潰瘍性結(jié)腸炎腸黏膜通透性的機(jī)制及復(fù)方苦參湯的干預(yù)作用研究.pdf

1、目的：
　　炎癥性腸病是一種容易反復(fù)發(fā)作的慢性疾病，病程漫長(zhǎng)，常遷延不愈。越來(lái)越多的研究表明，免疫調(diào)節(jié)缺陷和腸上皮屏障功能受損是導(dǎo)致結(jié)腸炎發(fā)生的重要環(huán)節(jié)。RhoA的下游效應(yīng)分子ROCK可以通過(guò)使肌球蛋白輕鏈（MLC）磷酸化，產(chǎn)生細(xì)胞收縮力，對(duì)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響，而NF-κB p65也參與在MLCK依賴(lài)的腸道屏障調(diào)節(jié)過(guò)程中。
　　腎上腺髓質(zhì)素（AM）參與了抑制炎癥反應(yīng)和維護(hù)腸道上皮屏障功能等多種生理過(guò)程，但具體機(jī)制尚不明確，

2、本實(shí)驗(yàn)的研究目的在于探討在結(jié)腸炎大鼠模型中，AM對(duì)腸黏膜通透性的影響以及復(fù)方苦參湯（Compound Sophorae Flavescentis decoction，CSFD）的干預(yù)作用，這對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制和治療的研究均具有重要的意義。
　　方法：
　　清潔級(jí)雄性SD大鼠32只（180-200g），隨機(jī)分成腎上腺髓質(zhì)素組、模型組、正常組和復(fù)方苦參湯組4組，每組8只。模型組、復(fù)方苦參湯組及腎上腺髓質(zhì)素組均給予TNBS灌腸

3、，以建立潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型。造模后48h，腎上腺髓質(zhì)素組、復(fù)方苦參湯組分別給予AM、復(fù)方苦參湯1ml/只/天灌腸；而模型組、正常組則給予生理鹽水1ml/只/天灌腸，7天后，麻醉大鼠，留取血液標(biāo)本，酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清TNF-α，IFN-γ表達(dá)的水平。取結(jié)腸組織標(biāo)本，通過(guò)HE染色及組織病理學(xué)評(píng)分來(lái)評(píng)估大鼠結(jié)腸組織病理變化，Western Blot測(cè)定腸道黏膜RhoA、ROCK1、MLCK、NF-κBp65及緊密連接蛋白Occludin

4、的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　TNBS造模后的大鼠體重明顯減輕，行動(dòng)遲緩，與正常組比較，模型組大鼠血清中TNF-α、IFN-γ的表達(dá)明顯增多（p<0.05），結(jié)腸組織中RhoA、ROCK1、NF-κBp65、MLCK蛋白的含量增多（p<0.05），而緊密連接蛋白Occludin的表達(dá)較正常組明顯降低（p<0.05）；與模型組比較，給予AM和復(fù)方苦參湯治療后的大鼠TNF-α、IFN-γ表達(dá)降低（p<0.05），結(jié)腸組織中RhoA、

5、ROCK1、MLCK及NF-κBp65蛋白的表達(dá)顯著下降（p<0.05），而緊密連接蛋白Occludin的表達(dá)明顯升高（p<0.05）有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但腎上腺髓質(zhì)素組和中藥復(fù)方苦參湯組之間比較，以上指標(biāo)的表達(dá)無(wú)顯著差異（p>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.腎上腺髓質(zhì)素可以緩解TNBS誘導(dǎo)的大鼠腸道炎癥，改善腸道黏膜通透性。
　　2.RhoA介導(dǎo)的NF-κB p65/MLCK信號(hào)通路可能參與了潰瘍性結(jié)腸炎的病理過(guò)程。