靜電紡絲聚己內(nèi)酯-明膠-氯化鑭復(fù)合納米纖維支架的制備及其性能研究.pdf

1、目的及意義：
　　研究證實(shí)鑭具有抗菌、抗腫瘤、促進(jìn)正常細(xì)胞增殖和調(diào)節(jié)免疫的效果。我們前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在一定濃度范圍的氯化鑭具有抑制宮頸癌細(xì)胞、促進(jìn)正常細(xì)胞增殖的作用，本研究旨在構(gòu)建一款可降解納米纖維支架來(lái)承載氯化鑭，并比較不同濃度氯化鑭納米纖維支架的表面特性及生物相容性，為稀土鑭化合物轉(zhuǎn)化應(yīng)用于相關(guān)疾病的治療提供實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)和手段。
　　研究?jī)?nèi)容和方法：
　　1、聚己內(nèi)酯/明膠/氯化鑭(PCL/GE/LaCl3)復(fù)合納米

2、纖維支架的構(gòu)建：靜電紡絲技術(shù)條件與配方優(yōu)化：以1,2-二氯乙烷，無(wú)水乙醇，甲酸為溶劑，在最佳靜電紡絲條件下使用靜電紡絲技術(shù)分別構(gòu)建聚己內(nèi)酯/明膠(PCL/GE)復(fù)合納米纖維支架以及含有不同濃度氯化鑭(LaCl3)溶液的聚己內(nèi)酯/明膠/氯化鑭(PCL/GE/LaCl3)復(fù)合納米纖維支架。最終制得含氯化鑭濃度分別為0mmol/L、0.392mmol/L、0.785mmol/L、1.570mmol/L、及3.140mmol/L的復(fù)合納米纖維支

3、架五張(分別定義為空白組、0.392mmol/L組、0.785mmol/L組、1.570mmol/L組及3.140mmol/L組)。
　　2、材料的理化性質(zhì)鑒定：掃描電鏡觀察、孔隙率測(cè)定、靜態(tài)接觸角分析、材料降解率測(cè)定等試驗(yàn)對(duì)上述五種纖維支架的理化性能進(jìn)行表征。
　　3、生物安全性評(píng)價(jià)：根據(jù)相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)采用體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)各組納米纖維支架的生物安全性。
　　4、組織相容性分析：
　　(1)采用四甲基偶氮唑鹽微

4、量酶反應(yīng)(MTT)法檢測(cè)各納米纖維支架上細(xì)胞的增殖情況。
　　(2)細(xì)胞在支架上的生長(zhǎng)情況：運(yùn)用熒光顯微鏡技術(shù)觀察脂肪干細(xì)胞在納米纖維支架上的生長(zhǎng)情況。
　　結(jié)果：
　　1、成功構(gòu)建了含不同濃度的氯化鑭的納米纖維膜，掃描電鏡下可見(jiàn)：空白組、0.392mmol/L組、0.785mmol/L組、1.570mmol/L組納米纖維支架均形成了較為連續(xù)、均一的纖維，且呈現(xiàn)出兩種纖維交錯(cuò)分布的結(jié)構(gòu)。隨著LaCl3濃度的提高，纖維開(kāi)

5、始變細(xì)；當(dāng)LaCl3的濃度為3.140mmol/L時(shí)，纖維細(xì)絲雜亂明顯。與空白組相比，加入不同濃度氯化鑭的各組納米纖維支架纖維均未見(jiàn)明顯顆粒存在。
　　2、理化性能表征測(cè)試顯示：空白組、0.392mmol/L組、0.785mmol/L組、1.570mmol/L組、及3.140mmol/L組納米纖維的平均直徑分別為315±104nm、291±96nm、285±143nm、308±129nm和267±197nm，纖維均為納米級(jí)別。各組

6、納米纖維支架的孔隙率由高到低依次為：0.785mmol/L組＞0.392mmol/L組＞空白組＞1.570mmol/L組＞3.140mmol/L組，五組纖維支架均具有高孔隙率的特性；靜態(tài)接觸角分析顯示各組納米纖維支架的接觸角均為0，材料的親水性良好；體外降解實(shí)驗(yàn)表明：在第一周內(nèi)，各組納米纖維材料均有接近50％的失重率；隨著時(shí)間的增加，失重率明顯增加；在7周內(nèi)材料的失重率均接近90%。
　　3、納米纖維材料的生物安全性：通過(guò)細(xì)胞毒性

7、測(cè)試分析表明PCL/GE、含不同濃度LaCl3的各組PCL/GE/LaCl3復(fù)合納米纖維支架均無(wú)細(xì)胞毒性，生物安全性良好。
　　4、組織相容性分析結(jié)果如下：MTT分析顯示：第2天，各組細(xì)胞的增殖率無(wú)明顯差異，第4-8天，0.392mmol/L組、0.785mmol/L組、1.570mmol/L組細(xì)胞的增殖率顯著高于空白組和3.140mmol/L組，各組細(xì)胞在PCL/GE/LaCl3復(fù)合納米纖維材料上的增殖率均高于不含LaCl3的P