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文檔簡介
1、本研究的目的是利用靜電紡絲技術(shù)制備一種適合細胞生長和黏附的三維支架材料。首先,在溫和條件下一步合成氨基保留的殼聚糖接枝聚己內(nèi)酯(CS-PCL)共聚物。對殼聚糖進行改性有三個方面意義:其一,改性后使用普通溶劑體系就能制備帶有殼聚糖鏈段的CS-PCL/PCL復合纖維支架材料,降低成本;其二,有利于提高復合纖維支架材料中CS-PCL共聚物與PCL之間的界面相容性,改善復合纖維支架的力學性質(zhì);其三,將殼聚糖引入復合纖維支架可賦予其正的Zeta電
2、位,有利于負膜電位的細胞的黏附。研究表明所制備的復合纖維支架具有高孔隙率和大孔徑。隨著CS-PCL組分含量的增加,CS-PCL/PCL復合纖維的平均直徑和表面電位都得到提高。動態(tài)光散色(DLS)、X-射線光電子能譜(XPS)分析結(jié)果表明引進CS-PCL共聚物后,CS-PCL/PCL復合纖維支架表面出現(xiàn)氨基等活性基團,這是支架具有出正的Zeta電位和良好親水性的主要原因。
本文首先以小鼠成纖維細胞(L929)作為種子細胞來研
3、究復合纖維支架對細胞生長的影響。分別采用MTS比色法和掃描電鏡來檢測細胞增殖能力和細胞形態(tài),結(jié)果表明在復合支架表面上引入適量的氨基有利于提高支架的生物相容性。特別是具有適中表面正電位的CS-PCL/PCL(20/80)支架(ζ-3mV)不僅最適合L929細胞增殖而且能很好地維持細胞正常形態(tài)。甲苯胺藍染色試驗進一步證明L929細胞在CS-PCL/PCL(20/80)支架上生長良好并且呈典型的兩極梭形形態(tài)。以上實驗結(jié)果表明CS-PCL/PC
4、L(20/80)支架在皮膚組織工程中具有潛在的應(yīng)用價值。同時,進一步研究了小鼠視網(wǎng)膜祖細胞(mRPCs)在CS-PCL/PCL復合纖維支架上的生長情況。在復合支架上接種mRPCs細胞,并培養(yǎng)7天。熒光拍照和MTS試驗都表明mRPCs在CS-PCL/PCL(20/80)支架上的增殖速度比在所制備的其它支架上的增殖速度都要快。掃描電鏡照片和定量聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)分析結(jié)果都表明:與PCL支架相比,CS-PCL/PCL(20/80)支架能
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