2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  觀察促炎癥消退介質(zhì)D類消退素AT-RvD1對肺癌細(xì)胞A549轉(zhuǎn)移能力的影響,同時(shí)探索核轉(zhuǎn)錄因子(Nrf2)及M2型丙酮酸激酶(Pkm2)在此過程中的作用,為更深入研究肺癌轉(zhuǎn)移過程和炎癥相關(guān)腫瘤的分子機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)理論依據(jù)。
  方法:
  1、腫瘤的轉(zhuǎn)移與上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的關(guān)系極其密切,利用不同濃度轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1構(gòu)建EMT肺癌轉(zhuǎn)移模型,分別利用熒光探針技術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平,M

2、TT法檢測細(xì)胞增殖,劃痕實(shí)驗(yàn)測遷移,Transwell法測侵襲,同時(shí)利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和免疫印跡技術(shù)對上皮細(xì)胞表型E-鈣黏蛋白、間質(zhì)細(xì)胞表型波形蛋白、Nrf2及Pkm2的表達(dá)進(jìn)行檢測。
  2、利用不同濃度AT-RvD1和哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)激活劑預(yù)刺激細(xì)胞30分鐘,觀察其對TGF-β1誘導(dǎo)的肺癌EMT過程的影響,分別比較細(xì)胞增殖性、遷移性,侵襲性的變化,檢測細(xì)胞內(nèi)ROS水平及相關(guān)基因蛋白的表達(dá)情況。

3、  結(jié)果:
  1、轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1能明顯下調(diào)E-鈣黏蛋白和Nrf2的表達(dá),上調(diào)波形蛋白和Pkm2的表達(dá),增加細(xì)胞內(nèi)ROS水平并呈濃度依賴,增強(qiáng)A549細(xì)胞的遷移及侵襲能力,但對細(xì)胞增殖無明顯影響。
  2、D類消退素AT-RvD1能抑制TGF-β1誘導(dǎo)的EMT過程,上調(diào)E-鈣黏蛋白和下調(diào)波形蛋白的表達(dá),并且對A549細(xì)胞的遷移及侵襲能力有明顯的抑制作用,但不影響細(xì)胞的增殖,研究結(jié)果提示,AT-RvD1的抑制作用可能

4、與下調(diào)Nrf2和Pkm2的表達(dá)相關(guān)。
  3、哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)激活劑能逆轉(zhuǎn)AT-RvD1抑制Pkm2的作用,并且下調(diào)E-鈣黏蛋白的表達(dá)影響侵襲性,但尚未對細(xì)胞的增殖能力有明確影響。
  結(jié)論:
  1、D類消退素AT-RvD1能抑制TGF-β1誘導(dǎo)的肺癌EMT過程,抑制細(xì)胞的遷移及侵襲能力,但對細(xì)胞增殖無顯著影響。
  2、AT-RvD1可能部分通過抑制mTOR信號進(jìn)而下調(diào)Pkm2的表達(dá)來抑制T

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