白蛋白復(fù)合納米粒用于磁共振成像指導(dǎo)下的腫瘤光熱-光動(dòng)力聯(lián)合治療.pdf

1、21世紀(jì)以來(lái)，惡性腫瘤成為危害人類健康的最嚴(yán)重的疾病之一。納米技術(shù)的出現(xiàn)，為腫瘤的診斷和治療提供了新方法、新思路。而在納米醫(yī)藥領(lǐng)域，致力于腫瘤精確診斷和高效靶向治療的新型診療一體化納米藥物引起了研究人員的高度關(guān)注。白蛋白由于其良好的生物相容性等優(yōu)點(diǎn)，可作為納米藥物載體應(yīng)用于腫瘤診療一體化。在本論文研究中，我們以白蛋白作為納米反應(yīng)器，成功制備了一種尺寸可控的氧化釓白蛋白納米粒(Gd2O3@albumin)，并通過(guò)酰胺反應(yīng)，將光敏劑二氫卟酚

2、e6(Ce6)偶聯(lián)至蛋白表面，可用于磁共振成像指導(dǎo)的腫瘤光熱/光動(dòng)力聯(lián)合治療。本論文具體研究?jī)?nèi)容概述如下:
　　第一章:簡(jiǎn)要闡述了氧化釓納米材料在磁共振成像中的應(yīng)用、腫瘤光熱/光動(dòng)力治療的研究進(jìn)展、診療一體化納米藥物和蛋白納米載體的研究現(xiàn)狀，并在此基礎(chǔ)上闡明了本論文的立題依據(jù)及研究?jī)?nèi)容。
　　第二章:將牛血清白蛋白作為納米反應(yīng)器，誘導(dǎo)釓離子與氫氧化鈉在蛋白內(nèi)腔中發(fā)生沉淀反應(yīng)，通過(guò)控制反應(yīng)時(shí)間(4h，8h，12h)，可對(duì)白蛋白

3、納米粒的尺寸進(jìn)行調(diào)控，得到尺寸分別為4.7±0.5 nm，5.1±0.4 nm，10.1±1.2 nm的樣品。通過(guò)酰胺反應(yīng)將光敏劑Ce6成功偶聯(lián)至蛋白表面制備成白蛋白復(fù)合納米粒(SM-NPs)。通過(guò)對(duì)白蛋白復(fù)合納米粒的尺寸觀察，確定了該納米粒形成了以氧化釓為內(nèi)核、單層蛋白為殼的核殼型結(jié)構(gòu)。
　　第三章:進(jìn)一步對(duì)白蛋白復(fù)合納米粒的理化性質(zhì)進(jìn)行表征發(fā)現(xiàn)，SM-NPs在660nm激光激發(fā)下可產(chǎn)生濃度依賴性的光熱效應(yīng)和單線態(tài)氧產(chǎn)量。與游離

4、Ce6相比，SM-NPs的光照穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性都有了明顯的提升。同時(shí)與市售磁共振造影劑Gd-DTPA相比，相同磁場(chǎng)強(qiáng)度下其弛豫系數(shù)高達(dá)Gd-DTPA的4倍左右。
　　第四章:本章中選取鼠源性乳腺癌細(xì)胞4T1作為腫瘤細(xì)胞，主要在細(xì)胞水平對(duì)SM-NPs的內(nèi)吞、單線態(tài)氧產(chǎn)量、破膜作用以及細(xì)胞毒性進(jìn)行研究。首先與游離Ce6相比，SM-NPs的細(xì)胞攝取量明顯提升，且具有時(shí)間依賴性。其次通過(guò)AO和DHE染色實(shí)驗(yàn)證明SM-NPs在被攝取進(jìn)入細(xì)

5、胞后在660 nm激光照射下可產(chǎn)生單線態(tài)氧并產(chǎn)生破膜作用。提升的攝取量以及協(xié)同的光熱/光動(dòng)力效應(yīng)可顯著地殺死腫瘤細(xì)胞。
　　第五章:在健康小鼠皮下接種4T1腫瘤細(xì)胞，構(gòu)建腫瘤模型。通過(guò)Ce6熒光和釓離子定量分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，SM-NPs在注射后24 h通過(guò)被動(dòng)靶向作用分布于腫瘤組織。對(duì)SM-NPs的磁共振增強(qiáng)效能進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，與Gd-DTPA相比，通過(guò)尾靜脈注射后24 h內(nèi)在腫瘤部位可產(chǎn)生明顯強(qiáng)于對(duì)照組的磁共振信號(hào)，能為腫瘤提供精確的

6、解剖學(xué)定位。熱成像結(jié)果表明，SM-NPs在注射后24 h，腫瘤部位在660 nm激光照射下其溫度可上升13℃，產(chǎn)生明顯的熱損傷作用。最后，單劑量(Ce6，5 mg kg-1)尾靜脈給藥后24 h對(duì)腫瘤組織進(jìn)行近紅外激光照射，可產(chǎn)生協(xié)同的光熱/光動(dòng)力治療效果，并顯著地抑制腫瘤的生長(zhǎng)。
　　本論文以白蛋白作為納米反應(yīng)器構(gòu)建了尺寸可控的診療一體化納米粒，對(duì)其在腫瘤磁共振成像以及光熱/光動(dòng)力治療方面進(jìn)行了較為深入的研究，為進(jìn)一步探索白蛋白