強(qiáng)直性脊柱炎患者HLA-B27基因分型與相關(guān)免疫指標(biāo)診斷價(jià)值的探討.pdf

1、目的：探討流式細(xì)胞術(shù)(FCM)與序列特異性引物聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR-SSP)檢測(cè)人類白細(xì)胞表面抗原-B27(HLA-B27)在強(qiáng)直性脊柱炎(AS)中的診斷價(jià)值；觀察HLA-B27等位基因亞型在本地區(qū)的分布情況；了解免疫系統(tǒng)在AS發(fā)病過程中的作用機(jī)制。
　　方法：通過病例回顧性分析，了解HLA-B27檢測(cè)人群的基本情況，探討FCM法檢測(cè)HLA-B27對(duì)AS的診斷價(jià)值；采用PCR-SSP法和FCM法檢測(cè)AS患者組、疑似AS患者組和健

2、康對(duì)照組的HLA-B27，并對(duì)HLA-B27等位基因亞型進(jìn)行分型鑒定，使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；通過受試者工作特征(ROC)曲線對(duì)兩種檢測(cè)方法進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)；對(duì)分組病例進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù)和相關(guān)細(xì)胞因子的檢測(cè)，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)和方差分析對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，探討免疫系統(tǒng)在AS發(fā)病過程中的作用機(jī)制。
　　結(jié)果：1.246例疑似AS就診患者的年齡主要集中在21~55歲之間，共確診AS患者42例，其中HLA-B

3、27陽性患者28例，占確診人數(shù)66.7％。FCM法檢測(cè)HLA-B27ROC曲線下面積(AUC)為0.758(95%CI為0.659~0.856)，由圖得到的最佳cut-off值為147.5，在此臨界點(diǎn)，敏感度為66.7%，特異度為89.7%，約登指數(shù)為0.564。
　　2.三組資料中PCR-SSP法共檢出HLA-B27陽性患者45例，其中B*2701型1例；B*2702型5例；B*2704型28例；HLA-B*2705型11例。P

4、CR-SSP法和FCM法檢測(cè)HLA-B27的ROC曲線下面積分別為0.913、0.884；PCR-SSP法的靈敏度、特異度分別為94.1%、84.0%；FCM法的靈敏度、特異度分別為64.7%、88.0%。
　　3.AS組與健康對(duì)照組相比CD4+T淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)值明顯升高；CD8+T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)值均下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；AS組較疑似AS組相比，CD3+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞絕對(duì)值低于疑

5、似組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其他指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；疑似AS組與健康組進(jìn)行比對(duì)得到疑似組CD3+T淋巴細(xì)胞和CD4+T淋巴細(xì)胞絕對(duì)值明顯低于健康對(duì)照組的結(jié)果，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其他指標(biāo)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.AS組TNF-α、IFN-γ、IL-10、IL-17表達(dá)水平較健康對(duì)照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；IL-4水平較健康對(duì)照組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；IL-2、TGF-β1水平較健康對(duì)照組有上升趨勢(shì)，但無

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AS組各細(xì)胞因子水平較疑似組相比TNF-α、IFN-γ、IL-17明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其他因子差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。疑似組較健康對(duì)照組除TNF-α、IFN-γ、IL-10、IL-17升高，IL-4水平降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其他因子表達(dá)水平無明顯差異。
　　結(jié)論：1.內(nèi)蒙古地區(qū)強(qiáng)直性脊柱炎患病情況和全國情況基本一致，發(fā)病人群主要集中在青壯年男性；FCM法在檢測(cè)HLA-B27時(shí)具有

7、良好的穩(wěn)定性，但灰區(qū)樣本比例高，給臨床檢驗(yàn)工作帶來一定困擾。
　　2.PCR-SSP法檢測(cè)HLA-B27對(duì)AS的診斷效能明顯優(yōu)于FCM法，PCR-SSP法檢測(cè)HLA-B27是未來發(fā)展的趨勢(shì)；內(nèi)蒙古地區(qū)HLA-B27等位基因主要以B*2704和B*2705為主。
　　3.AS的發(fā)病與免疫系統(tǒng)作用密切相關(guān)，尤其是CD4+T淋巴細(xì)胞在AS疾病發(fā)展過程中起主導(dǎo)作用，可進(jìn)一步深入研究。
　　4.TNF-α、IFN-γ、IL-4、