氧化石墨烯和離子液體在蛋白質(zhì)分離檢測(cè)中的應(yīng)用研究.pdf

1、蛋白質(zhì)是重要的生命物質(zhì)，在生命活動(dòng)中扮演著至關(guān)重要的角色。快速高效的蛋白質(zhì)分離鑒定是蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。本論文將氧化石墨烯和離子液體引入蛋白質(zhì)的分離和檢測(cè)，建立了蛋白質(zhì)分離純化和定量分析的新方法，拓展了氧化石墨烯和離子液體在生命科學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用范圍。
　　第一章簡要綜述了蛋白質(zhì)的分離純化和定量分析方法，氧化石墨烯和離子液體的性質(zhì)及其在生物分析化學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)展。
　　第二章制各并利用GO/SiO2復(fù)合材料建立了選擇性

2、分離純化全血中血紅蛋白的新方法。通過靜電自組裝技術(shù)將氧化石墨烯固載在氨基改性的球形硅膠表面，采用紅外光譜、掃描電鏡和紫外-可見吸收光譜對(duì)所得的GO/SiO2復(fù)合材料進(jìn)行了表征，氧化石墨烯在硅膠表面的固載量為2.3％(w/w，GO/SiO2)。對(duì)所得復(fù)合材料在血紅蛋白分離純化中的表現(xiàn)性能進(jìn)行了考察。在pH7的條件下，3 mg GO/SiO2復(fù)合材料對(duì)1.0 mL70 mgL-1血紅蛋白的吸附效率為85％，吸附行為符合Langmuir模型，

3、最大吸附容量為50 mgg-1。吸附的血紅蛋白可采用pH8.9的Tris-HCl進(jìn)行洗脫，洗脫率為80％。圓二色光譜和活性測(cè)試表明GO/SiO2復(fù)合材料具有良好的生物相容性，吸附洗脫過程對(duì)血紅蛋白的構(gòu)象和活性不產(chǎn)生影響。將所建立的方法用于人全血中血紅蛋白的選擇性分離，純化的樣品采用SDS-聚丙酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度驗(yàn)證，結(jié)果表明該方法分離得到后的血紅蛋白純度較高。
　　第三章制備了親水性離子液體1，3-二丁基咪唑氯代鹽(BBimCl

4、)，并利用其熒光性能建立了血紅蛋白的定量分析方法。BBimCl結(jié)構(gòu)上高度對(duì)稱，因而具有較強(qiáng)的熒光性能，其水溶液中最大激發(fā)波長/發(fā)射波長為315 nm/388 nm，熒光量子產(chǎn)率0.523。由于BBimCl的陽離子與血紅蛋白中血紅素基團(tuán)的鐵原子可以發(fā)生配位作用，因此血紅蛋白能強(qiáng)烈猝滅BBimCl的熒光，由此建立了血紅蛋白熒光測(cè)定方法。在BBimCl濃度為0.01mol L-1，pH7的條件下，可對(duì)3×10-7～5×10-5 mol L-1