分子印跡技術(shù)在蛋白質(zhì)分離和識別中的應(yīng)用.pdf

1、南開大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文中文摘要分子印 跡技術(shù)是以 分 子識別理論為墓礎(chǔ)，制備對特定分子具有選擇性功能的高分子聚合物的一種技術(shù)。分子印跡的原理為:模板分子在單一或混合溶劑中與功能單體形成復(fù)合物， 在交聯(lián)劑作用下模板分子周圍形成網(wǎng)狀高分子聚合物， 除去聚合物中 的 模板分子， 聚合物上就得到與模板分 子在三維空間 上匹配且?guī)в刑囟üδ芑鶊F(tuán)的孔穴，該孔穴可以選擇性識別模板分子?；瘜W(xué)和物理性質(zhì)穩(wěn)定的分子印跡聚合物在傳感器研究、色譜填料、生物

2、材料模擬、酶和抗體等領(lǐng)域得到了很好的應(yīng)用。 通常模板分子是一些分子量較低的化合物，而由于蛋白 質(zhì)生物大分子本身固 有的局限性， 較少用作模板分子。本論文利用分子印跡技術(shù)合成了牛血紅蛋白的分子印跡聚合物， 考察了其吸附性質(zhì)與分子識別特性， 對分子印跡技術(shù)在蛋白 質(zhì)分離和識別這一領(lǐng)域的應(yīng)用作了 初步的 研究。 具體來講，本論文的工作包括以 下三個(gè) 方面:一、綜述了分子印跡技術(shù)的基本理論與蛋白 質(zhì)分子印跡的研究現(xiàn)狀及發(fā)展前景。二、 紫外光譜

3、法從分子水 平考察了 摩爾比、 溶液p H 值、 離子強(qiáng)度對功能單體與模板蛋白 之間相互作用的影響。采用本體聚合法制備了以牛血紅蛋白 為模板分子的印跡凝膠聚合物， 平衡吸附、單一吸附和混合吸附實(shí)驗(yàn)考察了印跡凝膠聚合物的吸附性能與識別性質(zhì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，印跡聚合物在水相中 對模板蛋白 有親和性與特異性，其分子識別能力很大程度上受著鍵合位點(diǎn)形狀與氫鍵相互作用的影響。三、采用光接枝表面印 跡法，以引發(fā)轉(zhuǎn)移終止劑修飾的聚苯乙烯微球?yàn)檩d體，制備了

4、以牛血紅蛋白 為 模板的分子印跡微球。紅外光譜、掃描電鏡和元素分析考察了 聚合前后載體表 面形態(tài)的變化，證實(shí)了 載體表面成功 接枝了 分子印跡層。 并 研究了 聚合物的 吸附和分子識別選擇性能。結(jié)果表明 ，采用光接枝表面修飾法制備的分子印跡微球?qū)δ０宸肿佑兄芎玫奈饺萘亢妥R別選擇性。基 于上述工作， 可能 構(gòu)建一 個(gè)模型來實(shí)現(xiàn)低豐度蛋白 的 富 集。關(guān)鍵詞: 分子印 跡技術(shù) 牛血紅蛋白 聚丙烯酞胺凝膠聚合物 光 接枝 引發(fā)轉(zhuǎn)移終止劑南

5、開大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文p o l y 均 r r e n e b e a d s a s m a t r i c e s w e r e p r e p a r e d u s i n g b o v i n e h e m o g l o b i n a s t e m p l a t em o l e c u l e i n a p h o s p h a t e b u f e r . T h e

6、 r e s u l t s o f I R , s c a m t i n g e l e c t r o n m i c r o s c o p e a n de l e m e n t a l a n a l y s i s d e m o n s t r a t e d t h e f o r m a t i o n o f a g r a f t i n g p o l y m e r l a y

7、 e r o n t h ep o l y s t y r e n e - b e a d s u r f a c e . A n d t h e a d s o r p t i o n s t u d i e s s h o w e d t h e i m p r i n t e d p o l y m e r sh a d g o o d a d s o r p t i o n c a p a c i t

8、 y a n d s p e c i f i c r e c o g n i t i o n f o r b o v i n e h e m o g l o b i n a st e m p l a t e m o l e c u l e .B a s e d o n t h e s e , a m o d e l w h i c h c a n s e l e c t i v e l y e n r i

9、 c h t h e t e m p l a t e p r o t e i n i n m i x e dp r o t e i n s c o u l d b e f a b r i c a t e dK e y w o r d s : m o l e c u l a r l y i m p r i n t i n g t e c h n o l o g y , B o v i n e h e m o g l o b