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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
大面積燒傷,尤其是特大面積深度燒傷是燒傷外科醫(yī)師永恒的命題。大面積創(chuàng)面裸露常常導(dǎo)致機(jī)體超高代謝、膿毒血癥、多器官功能衰竭等一系列并發(fā)癥,危及患者生命。因此,如何盡早、盡快地封閉創(chuàng)面是提高特大面積深度燒傷患者救治成功率的關(guān)鍵點(diǎn)。常規(guī)的皮片移植方法主要包括:自體大張皮移植、郵票皮移植、網(wǎng)狀皮移植。上述幾種方法雖然移植后皮片容易存活,瘢痕形成較輕,功能和外觀比較滿意,但是擴(kuò)展面積過(guò)小,難以在短時(shí)間內(nèi)利用僅有的皮源修復(fù)大面積裸
2、露創(chuàng)面。目前常用于修復(fù)大面積燒傷創(chuàng)面的方法主要包括:自體表皮細(xì)胞培養(yǎng)移植、Meek植皮、微粒皮移植、混合移植等。自體表皮細(xì)胞培養(yǎng)移植所需自體皮源較少,擴(kuò)展面積大,理論上可擴(kuò)增1000~10000倍,極大程度地利用了僅有的自體皮源。但是移植后的表皮細(xì)胞膜片由于缺乏真皮成份,移植至創(chuàng)面后存活率較低,且創(chuàng)面愈合后瘢痕增生較為明顯,新生皮膚容易再次破潰,形成新的創(chuàng)面,對(duì)外觀和功能影響較大,此外該方法需要進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、費(fèi)用較高,臨床
3、實(shí)用性不高。Meek植皮術(shù)為半機(jī)械化操作,省時(shí)、省力,創(chuàng)面愈合后外觀較好,但自體皮擴(kuò)展比例有限?;旌弦浦泊婊盥士煽?,但多為人工操作,費(fèi)時(shí)、費(fèi)力。微粒皮移植技術(shù)可將自體皮擴(kuò)展10~20倍,充分利用了自體有限皮源,自誕生30年來(lái)已成為修復(fù)特大面積深度燒傷創(chuàng)面的主要方法之一。然而,由于難以控制移植后微粒皮的方向性,導(dǎo)致存活率并不穩(wěn)定,國(guó)內(nèi)各家醫(yī)院所報(bào)道的移植存活率差異較大。
本研究首次通過(guò)自制膠原膜改變微粒皮方向性以提高移植存活率,
4、從而為臨床特大面積深度燒傷創(chuàng)面的修復(fù)提供存活率高而穩(wěn)定可靠的方法。
方法:
1.證明微粒皮方向性對(duì)移植存活率的影響
1.1 微粒皮切割刀具的制備
10組圓形刀片平行排列,間距為1mm,制備成滾軸切割刀具,1次十字切割后即可制備符合標(biāo)準(zhǔn)的微粒皮(大小為1mm×1mm)。
1.2 裸鼠微粒皮移植實(shí)驗(yàn)
將人包皮(厚度約0.2mm~0.3mm)以自制的微粒皮切割刀具進(jìn)行十字切割,制備成
5、微粒皮(大小約1mm×1mm),移植于裸鼠全層皮膚切除創(chuàng)面,觀察微粒皮方向性對(duì)移植存活率的影響,計(jì)算創(chuàng)面愈合率,并行HE染色、Masson染色觀察細(xì)胞浸潤(rùn)和膠原排列情況,以及免疫組化HLA-ClassⅠ染色觀察人來(lái)源細(xì)胞存留情況。
2.自制膠原膜、檢測(cè)物理和生物學(xué)特性、改進(jìn)鹽水漂浮法
2.1 膠原膜制備、組織結(jié)構(gòu)特性檢測(cè)
以比目魚(yú)皮提取膠原,真空冷凍干燥,制成膠原膜。行組織切片HE染色以及掃描電鏡觀察膠原膜
6、組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。測(cè)定其密度及漂浮性能。
2.2 膠原膜毒性實(shí)驗(yàn)
將膠原膜浸提液與人成纖維細(xì)胞懸液混合培養(yǎng),測(cè)定OD(吸光度)值,計(jì)算細(xì)胞相對(duì)增殖率。
2.3 微粒皮漂浮實(shí)驗(yàn)
將膠原膜粘附至微粒皮表皮面,置于等滲生理鹽水中進(jìn)行漂浮,然后以綢布轉(zhuǎn)移至大張同種異體皮上,計(jì)算漂浮率、正向(表皮面朝上)漂浮率及同向轉(zhuǎn)移率(轉(zhuǎn)移后微粒皮真皮面朝上的比例)。
3.驗(yàn)證通過(guò)膠原膜改變微粒皮方向性的方法對(duì)提
7、高移植存活率的作用
將表皮面粘附膠原膜的豬微粒皮移植于豬全層皮膚切除創(chuàng)面,觀察創(chuàng)面愈合情況,并分別于移植后第2、3、4周留取創(chuàng)面照片,結(jié)合圖像處理軟件(MetaFluo)計(jì)算創(chuàng)面愈合率以及收縮率。并行HE染色觀察細(xì)胞浸潤(rùn)情況及Masson染色觀察膠原排列情況。
結(jié)果:
1.微粒皮表皮面朝上移植于裸鼠創(chuàng)面,2、3、4周時(shí)創(chuàng)面愈合率明顯高于表皮面一半朝上一半朝下組及表皮面朝下組(54.75±3.05% VS44
8、.85±2.76% and35.85±2.87%、84.80±3.17% VS74.85±2.80% and45.25±2.29%、94.80±2.78% VS84.95±2.96% and55.90±2.00%)(P<0.01)。
2.粘附膠原膜的豬微粒皮在生理鹽水中的漂浮率及正向(表皮面朝上)漂浮率分別為95.05±2.09%、91.25±2.88%,明顯高于單純豬微粒皮組(52.20±5.93%、68.05±4.65%)
9、(P<0.01)。
3.粘附膠原膜的微粒皮與單純的微粒皮相比,移植后4周創(chuàng)面收縮率明顯減?。?2.45±2.01% VS20.05±2.11%)、創(chuàng)面愈合率明顯提高(95.15±2.28% VS65.05±2.33%)(P<0.01),創(chuàng)面愈合后皮下及真皮層內(nèi)未見(jiàn)表皮囊腫樣結(jié)構(gòu)形成。
結(jié)論:
1.當(dāng)制備的微粒皮(厚度為0.2mm~0.3mm)大小為1mm×1mm、移植擴(kuò)大10倍時(shí),微粒皮的方向性顯著影響移植
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