RXRα對(duì)正常及形覺(jué)剝奪豚鼠屈光狀態(tài)及眼球生長(zhǎng)的調(diào)控.pdf

1、目的:
　　本實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，小鼠形覺(jué)剝奪2天，鞏膜RXRα及Ⅰ型膠原mRNA水平均下調(diào)，并且條件性敲減小鼠鞏膜RXRα4周，屈光度向近視方向偏移;球旁注射PPARα激動(dòng)劑GW7647可以抑制豚鼠形覺(jué)剝奪性近視形成，球旁注射PPARα抑制劑GW6471能促進(jìn)正常豚鼠的近視進(jìn)展。研究發(fā)現(xiàn)，PPARα與RXRα通過(guò)形成異源二聚體識(shí)別其靶基因并與之結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)功能，提示PPARα和/或RXRα參與調(diào)控屈光發(fā)育與近視形成。本研究

2、通過(guò)對(duì)豚鼠球旁注射RXRα激動(dòng)劑和抑制劑，研究RXRα在正常及形覺(jué)剝奪豚鼠屈光狀態(tài)及眼球生長(zhǎng)的調(diào)控作用。
　　方法:
　　1.WB方法檢測(cè)豚鼠形覺(jué)剝奪2天及形覺(jué)剝奪4周后鞏膜中RXRα及其下游靶基因(ME1、LPL)的表達(dá)情況。2.將正常三周齡三色豚鼠隨機(jī)分為正常給藥組和形覺(jué)剝奪給藥組，每組又分為空白對(duì)照組、溶劑對(duì)照組和給藥組三個(gè)亞組。注射組每天球旁注射DMSO、RXRα激動(dòng)劑(Fluorobexarotene、 LG100

3、268)、RXRα抑制劑(HX531、UVI3003)，連續(xù)注射4周，對(duì)側(cè)眼不做處理。實(shí)驗(yàn)前和實(shí)驗(yàn)后2周、4周分別檢測(cè)屈光度、眼軸參數(shù)和眼內(nèi)壓。正常給藥組在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)測(cè)量視網(wǎng)膜電圖，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用免疫熒光檢測(cè)鞏膜RXRα及其下游蛋白(ME1、APOA2、LPL)。
　　結(jié)果:
　　1.RXRα在正常豚鼠視網(wǎng)膜、鞏膜中均有表達(dá);短期（2天）和長(zhǎng)期（4周）形覺(jué)剝奪性近視形成中，RXRα蛋白水平無(wú)改變;形覺(jué)剝奪4周后，與正常對(duì)照眼相

4、比，實(shí)驗(yàn)眼和對(duì)側(cè)眼PPARα/RXRα下游靶基因LPL的蛋白水平顯著下降(p＜0.05)。2.球旁注射RXRα激動(dòng)劑Fluorobexarotene4周后，豚鼠鞏膜RXRα表達(dá)升高;球旁注射RXRα抑制劑HX5314周后，鞏膜RXRα及其下游靶基因ME1、APOA2表達(dá)降低。3.球旁注射RXRα激動(dòng)劑LG100268、Fluorobexarotene及RXRα拮抗劑HX531對(duì)正常及形覺(jué)剝奪豚鼠屈光狀態(tài)、眼內(nèi)壓、眼軸參數(shù)無(wú)明顯影響，各組

5、之間視網(wǎng)膜電圖無(wú)差異。而球旁注射RXRα拮抗劑UVI30034周后，形覺(jué)剝奪豚鼠實(shí)驗(yàn)眼玻璃體腔深度及眼軸長(zhǎng)度增加。
　　結(jié)論:
　　1.短期和長(zhǎng)期形覺(jué)剝奪豚鼠眼中RXRα表達(dá)無(wú)改變，而長(zhǎng)期形覺(jué)剝奪后鞏膜中PPARα/RXRα下游靶基因LPL蛋白水平下降，提示PPARα/RXRα異源二聚體可能參與近視形成但作用復(fù)雜。2.RXRα拮抗劑UVI3003可促進(jìn)形覺(jué)剝奪近視的進(jìn)展，提示RXRα可能參與豚鼠屈光發(fā)育和近視形成，但單獨(dú)干預(yù)