C-FOS、STAT3、Ub在PCOS患者著床窗口期子宮內(nèi)膜的表達及意義.pdf

1、多囊卵巢綜合征(PCOS)是婦科常見的內(nèi)分泌、代謝紊亂性疾病，主要以月經(jīng)不規(guī)則、雄激素過高、高胰島素血癥、不孕為臨床特征。PCOS在生育年齡女性的發(fā)病率為6％-8%，占無排卵性不孕的50%-70%，約50%PCOS患者有復(fù)發(fā)性流產(chǎn)史，具有“妊娠率低、流產(chǎn)率高”的臨床特點。相關(guān)研究表明，這一臨床特點與 PCOS患者長期內(nèi)分泌功能紊亂導(dǎo)致的子宮內(nèi)膜容受性降低有關(guān)。
　　子宮內(nèi)膜容受性是指子宮內(nèi)膜在特定時期內(nèi)具有的允許受精卵著床的能力，

2、這個時期被稱為“著床窗口期（WOI）”，一般在排卵后第8～10d，即月經(jīng)周期第22~24d。隨著輔助生殖技術(shù)的廣泛應(yīng)用和對不孕癥病因的深入研究，研究中們發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜對胚胎的容受狀態(tài)（即子宮內(nèi)膜容受性）占胚胎著床失敗原因的2/3，胚胎著床成功不僅與受精卵質(zhì)量有關(guān)，而且與子宮內(nèi)膜容受性關(guān)系密切。近年來，PCOS患者子宮內(nèi)膜容受性是國內(nèi)外研究的熱點和難點。
　　近年來，PCOS患者子宮內(nèi)膜容受性的研究已經(jīng)在分子生物學(xué)、形態(tài)學(xué)、基因?qū)W等方

3、面取得了一定的進展，但仍不能闡明其子宮內(nèi)膜容受性降低的確切原因。因此仍需進一步研究。C-FOS蛋白由即刻早期基因（IEGS）C-FOS表達產(chǎn)生，在絕大多數(shù)細胞中呈低表達狀態(tài)，參與細胞生長、增殖、分化、信號傳遞等病理生理過程。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)C-FOS在EM患者子宮內(nèi)膜周期性表達，并且雌激素促進C-FOS表達，孕激素抑制C-FOS表達；EM患者在位子宮內(nèi)膜窗口期C-FOS蛋白表達明顯升高，認為C-FOS蛋白這一生物學(xué)行為可能通過降低 EM患

4、者子宮內(nèi)膜容受性而影響胚胎著床。信號轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)導(dǎo)活化因子(STATS)家族是一種存在于胞漿，并在激活后能夠轉(zhuǎn)入核內(nèi)與 DNA結(jié)合的蛋白家族，具有調(diào)控信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄的雙重功能。STAT3參與腫瘤細胞多種重要的生理活動，是STATS家族中與腫瘤關(guān)系最為密切的一員。有學(xué)者通過控制性刪除小鼠STAT3基因表達，可使小鼠雌激素反應(yīng)性基因表達上調(diào)，孕激素反應(yīng)性基因表達下調(diào)，這些變化可導(dǎo)致小鼠宮腔上皮細胞分化失敗，阻止容受態(tài)子宮內(nèi)膜建立，從而導(dǎo)致胚胎種

5、植失敗，認為STAT3對子宮內(nèi)膜容受性和胚胎種植至關(guān)重要。泛素（Ub）是泛素-蛋白酶體通路（UPP）的重要組成部分，參與體內(nèi)蛋白質(zhì)修飾、降解過程。有研究證實在人正常月經(jīng)周期中，Ub在子宮內(nèi)膜增殖期表達增加，在子宮內(nèi)膜分泌期表達降低，認為Ub在正常人子宮內(nèi)膜呈周期性表達。而在不孕癥患者促排卵月經(jīng)周期中Ub表達明顯不足，并且卵泡發(fā)育過程中FSH刺激引起的雌激素水平升高與Ub表達水平關(guān)系密切，推測Ub在孕卵種植所需的子宮內(nèi)膜容受性建立過程中可

6、能發(fā)揮了重要作用。
　　本研究使用免疫組化SP法檢測C-FOS、STAT3、Ub三因子的表達，比較三者在育齡期 PCOS患者、其他原因?qū)е虏辉谢颊咧泊翱谄诘牟町愋员磉_，探討三因子可能對 PCOS患者子宮內(nèi)膜容受性的影響及 PCOS患者經(jīng)促排卵治療后妊娠率低、流產(chǎn)率高的原因。
　　目的：
　　1.檢測C-FOS、STAT3、Ub三因子在PCOS患者促排卵治療后、其他原因?qū)е虏辉谢颊叽翱谄谧訉m內(nèi)膜的表達及三者表達的相關(guān)性

7、，探討其差異性表達可能對PCOS患者子宮內(nèi)膜容受性帶來的影響。
　　2.探討PCOS患者經(jīng)藥物治療后仍“妊娠率低、流產(chǎn)率高”這一臨床特點的可能原因。
　　資料與方法：
　　1.研究對象：PCOS組：隨機抽取2014年3月~2015年2月在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院生殖內(nèi)分泌門診就診的已婚PCOS患者15例為實驗組。符合條件：診斷標準符合2003年鹿特丹標準，年齡25~35歲，平均年齡（28.80±3.26）歲。經(jīng)藥物治療后月

8、經(jīng)規(guī)律，內(nèi)分泌恢復(fù)正常，自然排卵或促排卵治療后正常排卵，丈夫精液檢查正常，無其他內(nèi)科合并病癥等。對照組：隨機抽取同期在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院生殖內(nèi)分泌門診就診的因輸卵管或男方因素導(dǎo)致不孕患者14例為對照組。符合條件：年齡25~35歲，平均年齡（27.71±2.46）歲。月經(jīng)規(guī)律、內(nèi)分泌正常，正常排卵，近3個月未用過激素類藥物，陰道B超檢查未發(fā)現(xiàn)子宮、卵巢器質(zhì)性病變，無其他內(nèi)科合并癥及并發(fā)癥等。
　　2.實驗方法：PCOS組、對照組均

9、于B超監(jiān)測排卵后第8~10天，晨空腹抽取肘靜脈血3ml，檢測血清HCG、E2、P水平。當血清THCG<30IU∕L時（鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗科標準），認為患者本月無妊娠可能。并于抽血當日下午，在無菌操作下，用一次性子宮內(nèi)膜取樣管吸取少許子宮內(nèi)膜組織，將所取新鮮子宮內(nèi)膜組織立即放入10%甲醛溶液中固定，按常規(guī)方法制作石蠟切片，由同一經(jīng)驗豐富的病理科醫(yī)生觀察各子宮內(nèi)膜病理組織學(xué)情況。免疫組化SP法檢測各子宮內(nèi)膜中C-FOS、STAT3、泛

10、素三因子的表達，所得數(shù)據(jù)用SPSS統(tǒng)計分析軟件進行處理。
　　結(jié)果：
　　1.PCOS組、對照組著床窗口期雌（E）、孕（P）激素水平比較：PCOS組血清 E2水平高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，PCOS組 P水平低于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.PCOS組、對照組子宮內(nèi)膜病理組織學(xué)比較：PCOS組分泌反應(yīng)欠佳發(fā)生率高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3.PCOS組、對照組子宮內(nèi)膜組織中C-FOS、STA

11、T3、Ub三因子的表達情況及其相關(guān)性：PCOS組C-FOS表達高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；PCOS組STAT3、Ub表達均低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。C-FOS與STAT3、Ub表達均呈顯著負相關(guān)，STAT3、泛素表達呈顯著正相關(guān)相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1.PCOS患者著床窗口期雌激素（E）水平增高、孕激素（P）水平降低，可能影響PCOS患者著床窗口期子宮內(nèi)膜容受性建立。
　　2.PCOS患者著床窗口期C-FOS