丹參莖葉資源化學研究與藥材質(zhì)量標準的建立.pdf

1、本論文共分四章內(nèi)容。
　　第一章分別從我國鼠尾草屬藥用植物資源化學和丹參資源生產(chǎn)過程廢棄物的資源化利用兩方面綜述了丹參的研究進展。丹參中富含丹酚酸類、丹參酮類、多糖類等資源性化學物質(zhì)，具有抗菌消炎、抗氧化、抗腫瘤、抗血小板聚集、抗血栓等藥理作用，以丹參為原料的醫(yī)藥保健產(chǎn)品廣泛應用于心腦血管領(lǐng)域。本章通過對丹參資源分布、利用現(xiàn)狀及其產(chǎn)業(yè)化過程廢棄物的產(chǎn)生、可利用物質(zhì)、利用途徑及其產(chǎn)業(yè)化等方面進行分析，以期為丹參藥用植物資源的高效綜合

2、利用，以及丹參生產(chǎn)與加工過程固體廢棄物的資源化利用提供參考和指導。
　　第二章主要開展丹參地上部分資源性化學成分積累動態(tài)研究及不同類型資源性化學成分評價研究。通過液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)、苯酚-濃硫酸法測定丹參地上部分丹酚酸類、核苷類和氨基酸類以及多糖類等資源性化學成分，明確丹參地上部分資源利用價值，探討其資源化利用策略，從而為丹參非藥用部位的資源化利用提供科學依據(jù)。
　　(1)運用UPLC-TQ/MS聯(lián)用技術(shù)對丹參地上莖葉、花序中7種

3、丹酚酸類化學成分進行分析與評價，并探討其在丹參植物生長過程中的動態(tài)積累規(guī)律，以期挖掘丹參地上部分的資源化利用價值與產(chǎn)業(yè)化開發(fā)前景。結(jié)果表明，丹參莖葉中含有豐富的水溶性丹酚酸類化學成分，但未檢測到脂溶性的丹參酮類成分;不同生長期丹參莖葉中酚酸類化學成分的量差異較大，除丹酚酸A外，各酚酸類成分量均在7～8月積累量達到最高值，以后逐漸降低。丹參花序中的丹參酚酸類成分總量在花盛期達到峰值，其在達到花盛期前動態(tài)變化趨勢不明顯，但當花冠進入凋萎期時

4、，丹酚酸類成分量急劇下降。說明中藥丹參傳統(tǒng)非藥用部位莖葉及花序中含有豐富的水溶性丹酚酸類資源性化學成分，尤其是迷迭香酸和丹酚酸B量較高，生長茂盛期其酚酸類成分的總量明顯高于藥材丹參根及根莖中的含量。提示丹參莖葉、花序可作為獲取丹酚酸類化學物質(zhì)的重要原料資源。
　　(2)丹參不同部位中多糖含量的含量:根＞花序＞莖葉，不同產(chǎn)地的丹參莖葉中多糖含量存在差異，其中山東和江蘇的含量相對較高;不同花期的丹參花序中，多糖含量在初花期和盛花期含量

5、差異不顯著，花序凋謝時多糖含量開始明顯降低。
　　(3)丹參根、莖葉和花序中均含有豐富的核苷類及氨基酸類成分，其中含量均較高的核苷類及氨基酸類主要有:尿苷、肌苷、腺苷-5'-單磷酸、胞苷-5'-單磷酸、谷氨酰胺、天冬酰胺。
　　第三章建立了丹參莖葉藥材的指紋圖譜和質(zhì)量標準，并對丹參莖葉藥材的干燥加工方法進行了優(yōu)選。
　　(1)丹參莖葉藥材指紋圖譜的建立:運用UPLC技術(shù)建立了丹參莖葉藥材的指紋圖譜分析方法，所建立的指紋

6、圖譜分析方法，分析迅速，靈敏度高，化學指紋信息完整，色譜峰分離度好，特征明顯，可以比較全面的控制該藥材的質(zhì)量。運用改分析方法對收集自不同產(chǎn)地的丹參莖葉藥材進行指紋圖譜分析，結(jié)果表明，確定了15個共有峰，10批丹參莖葉樣品相似度在0.884～0.984之間，且其共有峰的相對保留時間的RSD值均小于2％，說明建立的指紋圖譜方法靈敏、快速，適合于丹參莖葉藥材的指紋圖譜研究和質(zhì)量控制。
　　(2)丹參莖葉藥材質(zhì)量標準的建立:對丹參莖葉藥材

7、分別從性狀鑒別、顯微鑒別（粉末、石蠟切片）、灰分檢查以及丹參莖葉中酚酸類成分和黃酮類成分的定量分析等方面對丹參莖葉的質(zhì)量標準進行研究。結(jié)果顯示，丹參莖葉的組織顯微結(jié)構(gòu)特征明顯;薄層色譜鑒別中迷迭香酸、丹酚酸B、蘆丁與異槲皮苷的色譜斑點清晰，分離度良好;HPLC色譜中各成分丹參素、原兒茶醛、咖啡酸、蘆丁、異槲皮苷、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B分別在線性范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系，且各成分之間分離良好。所建立的定性和定量分析方法操作簡單、

8、靈敏度高、重現(xiàn)性好，可用于客觀評價丹參莖葉藥材的品質(zhì)及其質(zhì)量控制。
　　(3)丹參莖葉藥材干燥加工技術(shù)的優(yōu)選:分析評價了曬干、陰干、熱風干燥、紅外干燥、微波干燥等5種干燥技術(shù)對藥材品質(zhì)的影響，同時控制干燥溫度和對部分樣品進行殺青處理，丹酚酸類和黃酮類資源性成分為指標并結(jié)合干燥樣品的外觀性狀，明確丹參莖葉適宜的干燥加工方法。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，微波干燥和殺青干燥所獲得的丹參莖葉外觀性狀相對較好。而從內(nèi)在有效成分含量上看，殺青干燥與曬干效果較好

9、，所得丹參莖葉有效成分含量相對較高。綜合考慮干燥效率及干燥品質(zhì)，本實驗選擇殺青-熱風干燥-60℃為丹參莖葉的最優(yōu)干燥條件。
　　第四章在建立丹參藥材干燥過程水分動力學數(shù)學模型的基礎(chǔ)上，優(yōu)選出丹參藥材的適宜干燥加工技術(shù)，并對干燥過程中丹參中資源性化學成分的動態(tài)變化進行研究，探討其轉(zhuǎn)化機制。
　　(1)丹參藥材水分動力學數(shù)學模型的建立:分別測定丹參藥材在40℃、50℃、60℃和70℃溫度下的熱風干燥、紅外干燥和微波干燥的干燥曲線

10、和水分有效擴散系數(shù)，并利用薄層干燥數(shù)學模型對丹參干燥過程進行描述。實驗結(jié)果表明:丹參干燥只經(jīng)歷降速階段，水分擴散在丹參干燥的過程中起主導作用，并構(gòu)建丹參藥材干燥的數(shù)學模型為Page模型，模型的預測值與實驗實際值比較吻合，Page模型可較好地預測丹參藥材在不同干燥過程中的水分脫除規(guī)律。
　　(2)丹參藥材干燥加工技術(shù)的優(yōu)選:對丹參不同干燥方法下藥材品質(zhì)的評價是通過建立一個同時檢測10種丹酚酸類成分和6種丹參酮類成分的UPLC-TQ-

11、MS方法:AcquityUPLC BEH C18色譜柱(100 mm×2.1 mm，1.7μm);流動相:0.1％甲酸水(A)-乙腈(B)，梯度洗脫(0～6 min，3％～30％ A;6～7 min，30％～40％ A;7～10 min，40％～95％A;10～12min，95％A;12～12.2min，95％～3％A)。流速:0.4 mL·min-1，柱溫35℃，進樣量:2μL。結(jié)果表明:溫度對丹酚酸類成分影響顯著，在相同溫度下，不同

12、的干燥處理方法對丹參的品質(zhì)也有一定影響。TOPSIS綜合評價結(jié)果顯示，紅外干燥50℃是丹參藥材較為適宜的現(xiàn)代干燥方法。
　　(3)以紅外干燥方法對丹參藥材進行處理，在干燥過程中不同干燥時間取樣，采用HPLC技術(shù)分析丹參中的各類資源性化學成分。結(jié)果顯示:與新鮮丹參藥材相比，丹參中各丹酚酸類成分含量均有不同程度的增加，其中以迷迭香酸和丹酚酸B增加最多，且變化趨勢最為明顯，分別增加了30倍和44倍。與丹酚酸類成分不同的是，丹參酮類成分也