Lgr5、β-catenin及TRF1在結(jié)直腸癌中的表達及意義.pdf

1、目的:初步探討結(jié)直腸癌腫瘤干細胞通過激活Wnt信號通路影響端粒長度變化從而促進腫瘤進展的作用機制。
　　方法:本實驗選取結(jié)直腸癌腫瘤干細胞表面標志物 Lgr5、Wnt信號通路的核心因子β-catenin和端粒長度調(diào)節(jié)蛋白 TRF1三個基因，采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫組織化學染色法檢測50例結(jié)直腸癌組織、50例癌旁組織及50例遠癌切端組

2、織中的三者的表達情況，并且統(tǒng)計分析 Lgr5、β-catenin及 TRF1的表達水平與患者的臨床病理特征的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1. Lgr5的表達情況：實時熒光定量PCR的結(jié)果顯示，在結(jié)直腸癌組織中，Lgr5 mRNA的表達水平高于結(jié)直腸癌旁組織和遠癌切端組織中的表達水平，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；Lgr5 mRNA的表達水平與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征的關(guān)系顯示，Lgr5 mRNA的表達水平在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于

3、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，有遠處轉(zhuǎn)移組高于無遠處轉(zhuǎn)移組，分期Ⅲ+Ⅳ組表達高于Ⅰ+Ⅱ組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而在性別、年齡、分化程度、侵潤深度等分組中無顯著差異（P>0.05）。免疫組化結(jié)果顯示，在結(jié)直腸癌組織中，Lgr5蛋白的表達水平高于結(jié)直腸癌旁組織和遠癌切端組織中的表達水平，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；Lgr5蛋白的表達水平與患者臨床病理特征的關(guān)系顯示為，Lgr5蛋白在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、有遠處轉(zhuǎn)移組高于無遠處

4、轉(zhuǎn)移組、分期Ⅲ+Ⅳ組表達高于Ⅰ+Ⅱ組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而在年齡、性別、分化程度、浸潤深度等分組中無顯著差異（P>0.05）。
　　2.β-catenin的表達情況：實時熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示，在結(jié)直腸癌組織中β-catenin mRNA的表達水平高于結(jié)直腸癌旁組織和遠癌組切端織中的表達水平，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；β-catenin mRNA的表達水平與患者臨床病理特征的關(guān)系顯示，β-catenin

5、 mRNA在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、分期Ⅲ+Ⅳ組表達高于Ⅰ+Ⅱ組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），在不同的性別、年齡、分化程度、浸潤深度及遠處轉(zhuǎn)移分組中無顯著差異（P>0.05）。免疫組化結(jié)果顯示，在結(jié)直腸癌組織中，β-catenin蛋白的表達水平高于結(jié)直腸癌旁組和遠癌切端組織中的表達水平，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；β-catenin蛋白的表達水平與患者臨床病理特征的關(guān)系顯示，β-catenin蛋白在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高于無

6、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、分期Ⅲ+Ⅳ組表達高于Ⅰ+Ⅱ組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），在不同的性別、年齡、分化程度、侵潤深度及遠處轉(zhuǎn)移分組中無顯著差異（P>0.05）。
　　3.TRF1的表達情況：實時熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示，在結(jié)直腸癌組織中，TRF1 mRNA的表達水平低于結(jié)直腸癌旁組織和遠癌切端組織中的表達，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；TRF1 mRNA的表達水平與患者臨床病理特征的關(guān)系顯示，TRF1 mRNA與性別、年齡、

7、分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移及分期等分組無關(guān)（P>0.05）。免疫組化結(jié)果顯示為，在結(jié)直腸癌組織中， TRF1蛋白的表達水平低于癌旁組和遠癌切端組織中的表達，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；TRF1蛋白的表達水平與患者臨床病理特征的關(guān)系顯示為，TRF1蛋白與性別、年齡、分化程度、侵潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移及分期等分組無關(guān)（P>0.05）。
　　4.相關(guān)性分析：在結(jié)直腸癌組織中，Lgr5與β-catenin mRN

8、A及蛋白表達水平成正相關(guān)（r=0.473,P<0.01; r=0.566,P<0.01）；在結(jié)直腸癌組織中，β-catenin與 TRF1分別在 mRNA和蛋白表達水平呈正相關(guān)（r=0.425,P<0.01; r=0.663,P<0.01）；在結(jié)直腸癌組織中，Lgr5與TRF1分別在mRNA轉(zhuǎn)錄水平與蛋白表達水平呈正相關(guān)（r=0.673,P<0.01; r=0.399,P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　1.在結(jié)直腸癌中，Lg

9、r5、β-catenin的表達水平升高，TRF1的表達水平降低，說明腫瘤干細胞、Wnt信號通路和腫瘤細胞端粒共同參與了結(jié)直腸癌的發(fā)展過程。
　　2.Lgr5、β-catenin及TRF1的表達存在一定的相關(guān)性，進一步證明結(jié)直腸癌中腫瘤干細胞可能通過Wnt信號通路的激活從而影響腫瘤細胞端粒長度變化。
　　3.通過分析Lgr5、β-catenin及TRF1的表達水平與臨床病理學特征的關(guān)系，證明結(jié)直腸癌腫瘤干細胞可能通過激活 Wn