MMP-9、Galectin-3和VEGF在非小細胞肺癌中的表達及相關(guān)性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景和目的:
  浸潤和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤生長的基本生物學(xué)特征。腫瘤細胞的粘附,細胞外基質(zhì)(Extracellular matrix ECM)、基膜(basement membrane BM)作為惡性腫瘤需要突破主要屏障,其結(jié)構(gòu)的破壞,是惡性腫瘤轉(zhuǎn)移過程中的主要步驟。惡性腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移是一個多重步驟在內(nèi)的復(fù)雜動態(tài)過程。
  MMP-9通過降解ECM的主要成分為腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移掃除生理上的主要屏障,MMP-9還能夠誘導(dǎo)新生血管

2、生成,在惡性腫瘤的發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。Galectin-3參與細胞凋亡、粘附、新生血管形成和腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移等多種生理和病理過程,基因位于染色體 lpl3和14q21~22之間,具有三個獨特結(jié)構(gòu)區(qū):一是與糖復(fù)合物細胞表面結(jié)合,可作為MMPS的底物,由脯氨酸、甘氨酸重復(fù)串聯(lián)構(gòu)成的氨基端;一是由氨基酸構(gòu)成的短氨基末端;一是為 Galectins家族共有的羧基末端區(qū)域,含有功能性糖結(jié)合域,是標(biāo)志性結(jié)構(gòu); Galectin-3是MMP-9的底物

3、,MMP-9可將其分解為一個糖識別域和一個氨基酸殘基片段。新生血管的生成是惡性腫瘤生長的關(guān)鍵,VEGF無論是在生理性血管生成或者是在病理性血管生成中都是促血管生成的關(guān)鍵因子。
  檢索知網(wǎng)、Pubmed等相關(guān)數(shù)據(jù)庫文獻,尚未見三者在NSCLC中表達的相關(guān)性研究,本研究采用免疫組化 SP兩部法檢測非小細胞肺癌組織中 MMP-9、Galectin-3、VEGF的表達及其相關(guān)性;探討三者在NSCLC進展過程中的作用與臨床意義。
 

4、 材料與方法:
  1.研究對象
  選取我校二附院胸外科2008年2月5日至2010年2月5日期間經(jīng)手術(shù)切除的NSCLC組織46例,對照組選取非小細胞肺癌組織旁5cm之外的正常肺組織(均經(jīng)病理證實)。所有病例均未行新輔助放化療,所有入組病例均有完整的臨床病理資料及隨訪資料。
  2.研究方法
  我們將挑選好的蠟塊在切片機上切成4μm的厚的薄片,按免疫組化SP兩步法進行實驗操作并嚴格按照試劑盒說明書上所要求的步

5、驟進行操作,一抗用1:100倍稀釋。
  3.免疫組化結(jié)果判定方法
  經(jīng)免疫組化SP法之后的組織切片病理結(jié)果的評定由病理科2位資深醫(yī)生單獨讀取每張切片后作出判定,結(jié)果一致則采用此張切片,如果兩位資深病理醫(yī)師的判定結(jié)果不一致則此張病理切片不予入組。染色強度按照無色、淡黃色、棕黃色、褐色分別記為0分、1分、2分、3分;細胞陽性百分比計分:0為陰性,0~10%為1分,10%~50%為2分,50%~75%為3分,>75%為4分。根

6、據(jù)染色強度評分與細胞陽性百分比的乘積計算分值,得分<4分的被認為是陰性,否則為陽性。
  4.統(tǒng)計學(xué)方法
  本研究根據(jù)統(tǒng)計學(xué)原理,選用SPSS21.0軟件進行實驗數(shù)據(jù)分析:三種蛋白之間表達的差異用χ2檢驗進行檢測,同時利用卡方檢驗分析癌組織中三種蛋白的表達與臨床病理特征的關(guān)系;Spearman相關(guān)分析癌組織中三種蛋白之間的相關(guān)性;以α=0.05為檢驗水準(zhǔn)。
  結(jié)果:
  1.MMP-9、Galectin-3、

7、VEGF蛋白在正常肺組織、NSCLC組織中的表達
  免疫組化結(jié)果顯示Galectin-3主要定位于正常肺組織和非小細胞肺癌的細胞漿和細胞核,Galectin-3在非小細胞肺癌組織中的陽性表達呈棕黃色或棕褐色顆粒,VEGF、MMP-9均主要定位于細胞漿,VEGF、MMP-9在非小細胞肺癌中的陽性表達呈棕黃色顆粒。Galectin-3蛋白在正常肺組織和非小細胞肺癌中的陽性表達率分別為32.61%(15/46)、73.91%(34/4

8、6),兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=15.76,p<0.001);VEGF在正常肺組織和非小細胞肺癌中的陽性表達率為23.91%(11/46)、78.26%(36/46),兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=27.19,p<0.001);MMP-9在正常肺組織和非小細胞肺癌中的陽性表達率為28.26%(13/46)、73.91%(34/46),兩者差異有顯著性(χ2=19.18,p<0.001)。
  2.MMP-9、Galectin-3、

9、VEGF蛋白在NSCLC組織中的表達與臨床病理特征之間的關(guān)系
  MMP-9、Galectin-3、VEGF三種蛋白在非小細胞肺癌中的陽性表達與患者的年齡、性別、組織學(xué)病理類型均無關(guān)(p>0.05),與組織分化程度、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性(p<0.05)。
  3. NSCLC組織中MMP-9、Galectin-3、VEGF蛋白表達之間的關(guān)系
  NSCLC組織中,MMP-9和VEGF同時表達陽性者30例

10、,同時表達陰性者6例,兩者呈相關(guān)性(r=0.407,p=0.002);MMP-9和Galectin-3同時表達陽性者30例,同時表達陰性者7例,兩者呈相關(guān)性(r=0.549,p<0.001);VEGF和Galectin-3同時表達陽性者31例,同時表達陰性者7例,兩者有相關(guān)性(r=0.527,p<0.001),生存函數(shù)分析顯示Galectin-3、MMP-9、VEGF全陽性與非全陽性的生存時間分別為(17.02±0.41)月、(28.8

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