Galectin-3、MMP-9在卵巢上皮性腫瘤中的表達及相關(guān)性研究.pdf

1、目的：卵巢癌在女性生殖道常見惡性腫瘤中排第2位，其在婦科惡性腫瘤中死亡率卻是最高的。卵巢腫瘤的種類繁多，組織成分復(fù)雜，是全身各臟器原發(fā)腫瘤類型最多的，其包括上皮性腫瘤、生殖細胞腫瘤、性索間質(zhì)腫瘤和轉(zhuǎn)移性腫瘤，其中上皮性卵巢癌(Epithelial ovarian cancer，EOC)占卵巢惡性腫瘤的90％。卵巢癌早期無明顯癥狀，發(fā)病比較隱匿，患者不易察覺，大約70％卵巢癌患者發(fā)現(xiàn)時已為晚期，經(jīng)過手術(shù)及化放療后，復(fù)發(fā)率仍很高，其5年生存

2、率僅為20％-30％。因此尋求一種特異的上皮性卵巢癌早期診斷指標(biāo)成為醫(yī)學(xué)研究中迫切需要解決的問題。
　　 Galectin-3是一種β-半乳糖苷結(jié)合蛋白，是半乳糖凝集素(Galectins)家族中的成員之一，Galectin-3具有多種生物學(xué)功能，它能調(diào)節(jié)細胞的黏附、促進細胞的增殖、參與炎癥反應(yīng)及血管生成、參與免疫調(diào)節(jié)、并可促進腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移等?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)能降解細胞外基質(zhì)中多種蛋白成分，在惡性腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中

3、起重要作用。
　　 本實驗應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法測定Galectin-3和MMP-9在上皮性卵巢癌、交界性卵巢腫瘤及卵巢囊腺瘤中的表達，通過計算其在三種不同分化程度腫瘤中的陽性率，分別評估Galectin-3和MMP-9在上皮性卵巢癌、交界性卵巢腫瘤及卵巢囊腺瘤中的表達是否有意義；評估Galectin-3和MMP-9在不同組織分級和臨床分期的上皮性卵巢癌中的表達陽性率及其差異；并探討Galectin-3和MMP-9兩者在上皮性卵巢

4、癌中的相關(guān)性。為進一步研究其在診斷卵巢上皮性腫瘤中的意義提供實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 1、標(biāo)本的選擇：選取接受手術(shù)治療的75例卵巢上皮性腫瘤新鮮組織標(biāo)本，常規(guī)經(jīng)10％福爾馬林液固定。術(shù)后均經(jīng)病理證實，其中卵巢囊腺瘤12例，交界性卵巢腫瘤18例，上皮性卵巢癌45例，且卵巢癌患者均未經(jīng)化療、放療等任何抗癌治療。
　　 2、Galectin-3和MMP-9兩種蛋白表達陽性判定方法：A項：按細胞染色有無及深淺對染色

5、強度進行評分：0分為無色，2分為黃色或深黃色，3分為褐或棕褐色；B項：按陽性細胞所占的百分比評分：0分為陰性，1分為陽性細胞≤10％，2分為11％-50％，3分為51％-75％，4分為≥75％。每例染色積分=兩種評分相乘(A×B)，積分≥3分為免疫反應(yīng)陽性。
　　 3、Galectin-3和MMP-9的測定：符合要求的標(biāo)本，經(jīng)石蠟包埋后，制成4μm切片，應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP二步法檢測各組織中Galectin-3和MMP-9的表達

6、情況，按照上述評分方法在光學(xué)顯微鏡下觀察陽性細胞，并計算其陽性表達例數(shù)。
　　 4、組織學(xué)分級和臨床分期：手術(shù)后病理學(xué)組織分級為Ⅰ級、Ⅱ級、Ⅲ級，即高分化、中分化和低分化。卵巢癌按FIGO國際分期法，Ⅰ期：腫瘤局限于卵巢。Ⅱ期為病變累及一側(cè)或雙側(cè)卵巢，伴盆腔轉(zhuǎn)移。Ⅲ期：腫瘤侵及一側(cè)或雙側(cè)卵巢，伴盆腔以外腹膜種植或腹膜后或腹股溝淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；肝臟表面轉(zhuǎn)移。Ⅳ期：腫瘤侵及一側(cè)或雙側(cè)卵巢并有遠處轉(zhuǎn)移，胸水存在時需找到惡性細胞；肝轉(zhuǎn)移需累

7、及肝實質(zhì)。
　　 結(jié)果：
　　 1、Galectin-3、MMP-9主要表達于腫瘤細胞的胞質(zhì)中，少數(shù)也表達于細胞核及細胞膜上。
　　 2、Galectin-3在卵巢囊腺瘤、交界性卵巢腫瘤及上皮性卵巢癌中的表達陽性率分別為16.77％、61.11％、88.89％，卵巢囊腺瘤同交界性卵巢腫瘤比較其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，卵巢囊腺瘤同上皮性卵巢癌比較其差異具有顯著性(P<0.05)。交界性卵巢腫瘤同上皮性卵

8、巢癌比較其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。其在卵巢漿液性囊腺癌及粘液性囊腺癌中表達率分別為80.56％、66.67％，兩者比較其差異無顯著性(P>0.05)。
　　 3、MMP-9在卵巢囊腺瘤、交界性卵巢腫瘤及上皮性卵巢癌中的表達陽性率分別為25％、66.77％、82.22％，卵巢囊腺瘤同交界性卵巢腫瘤比較其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，卵巢囊腺瘤同上皮性卵巢癌比較其差異具有顯著性(P<0.05)。交界性卵巢腫瘤同上皮

9、性卵巢癌比較其差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　 4、將45例上皮性卵巢癌中的Galectin-3陽性表達按組織分級及臨床分期的不同進行統(tǒng)計學(xué)分析，分化為Ⅲ級的陽性率明顯高于分化為Ⅰ級的，差異具有顯著性(P<0.05)。分化為Ⅰ級與分化為Ⅱ級比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。分化經(jīng)級與分化Ⅲ級比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。Galectin-3在臨床分期為Ⅲ+Ⅳ期中的表達明顯高于Ⅰ期(P<0.05)，Ⅰ期同Ⅱ期、Ⅱ期同Ⅲ+Ⅳ期比較無統(tǒng)計學(xué)意

10、義。
　　 5、將45例上皮性卵巢癌中MMP-9的陽性表達情況按組織學(xué)分級和臨床分期進行統(tǒng)計學(xué)分析，分化為Ⅲ級的陽性率明顯高于分化為Ⅰ級的，差異具有顯著性(P<0.05)。分化為Ⅰ級與分化為Ⅱ級比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。分化Ⅱ級與分化Ⅲ級比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。MMP-9在臨床分期為Ⅲ+Ⅳ期中的表達明顯高于Ⅰ期(P<0.05)，Ⅰ期同Ⅱ期、Ⅱ期同Ⅲ+Ⅳ期比較無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 6、在45例上皮性卵巢癌患者的標(biāo)本中，其中有

11、20例標(biāo)本Galectin-3和MMP-9兩種蛋白表達均為陽性，通過繪制散點圖對其陽性細胞百分比分布進行統(tǒng)計學(xué)描述，經(jīng)線性相關(guān)對其分布進行分析后發(fā)現(xiàn)，Galectin-3和MMP-9在上皮性卵巢癌的表達陽性率成直線相關(guān)，Pearson相關(guān)系數(shù)r=0.888。
　　 結(jié)論：
　　 1、Galectin-3和MMP-9的陽性例數(shù)同三種卵巢腫瘤的分化程度相關(guān)，隨腫瘤惡性程度的增加，其陽性表達率有逐漸上升的趨勢，其在上皮性卵巢癌