腦側(cè)枝循環(huán)重建及交感神經(jīng)對(duì)其影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景:
　　腦血管狹窄或閉塞導(dǎo)致的灌注不足是缺血性卒中和血管性癡呆的直接原因之一。近年來(lái)，隨著老齡化的加重，缺血性卒中和血管性癡呆的發(fā)生率在我國(guó)均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅人們的身心健康。此類患者的治療效果在很大程度上依賴于側(cè)枝循環(huán)代償，如果腦缺血時(shí)能盡快促進(jìn)側(cè)枝循環(huán)形成，將對(duì)缺血組織的保護(hù)和其后神經(jīng)功能的恢復(fù)有重要意義。腦血管狹窄或閉塞時(shí)側(cè)枝循環(huán)開放，但往往不能維持正常的灌注，此時(shí)，機(jī)體能通過(guò)啟動(dòng)側(cè)枝血管重建（動(dòng)脈生成和血管生成）來(lái)

2、提供額外的血流，這也是目前促進(jìn)側(cè)枝循環(huán)重建成為研究的關(guān)鍵點(diǎn)和熱點(diǎn)的原因。
　　雖然目前關(guān)于腦側(cè)枝循環(huán)建立的研究較多，在動(dòng)物研究中，學(xué)者們多采用不同的組合方式結(jié)扎單側(cè)或雙側(cè)的頸總動(dòng)脈和椎動(dòng)脈，研究低灌注時(shí)側(cè)枝動(dòng)脈生成及腦循環(huán)儲(chǔ)備能力和腦血流量的變化規(guī)律。然而腦動(dòng)脈狹窄是一個(gè)漸進(jìn)性發(fā)展的過(guò)程，上述模型難以模擬腦動(dòng)脈狹窄時(shí)腦血流量漸進(jìn)性下降的病理生理過(guò)程。因此，建立一個(gè)腦血流量漸進(jìn)性下降的動(dòng)物模型研究側(cè)枝循環(huán)重建的發(fā)生發(fā)展規(guī)律尤為必要。

3、同時(shí)，大量關(guān)于外周血管的研究已提示，血管周圍神經(jīng)對(duì)動(dòng)脈生成和血管生成的進(jìn)程影響較大，而低灌注時(shí)交感神經(jīng)對(duì)腦側(cè)枝循環(huán)重建有何影響未知。如果能從這方面著手，研究腦血管管周交感神經(jīng)調(diào)控的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，尋找特異性靶向分子，探索出加快腦側(cè)枝循環(huán)重建的方法，無(wú)疑將對(duì)缺血腦組織的保護(hù)和其后神經(jīng)功能的恢復(fù)有重要意義。
　　因此，本研究一方面通過(guò)分次栓塞腦動(dòng)脈建立犬腦漸進(jìn)性低灌注模型，探討側(cè)枝循環(huán)建立的過(guò)程、時(shí)間及程度，為臨床治療時(shí)間窗提供理論依據(jù);另

4、一方面，通過(guò)結(jié)扎大鼠一側(cè)頸總動(dòng)脈，觀察去除同側(cè)交感神經(jīng)對(duì)腦動(dòng)脈側(cè)枝循環(huán)重建的影響，為進(jìn)一步研究交感神經(jīng)對(duì)腦側(cè)枝循環(huán)重建的調(diào)控打下基礎(chǔ)。
　　目的:
　　第一部分 犬腦漸進(jìn)性低灌注時(shí)腦側(cè)枝循環(huán)重建的實(shí)驗(yàn)研究
　　通過(guò)分次栓塞犬左、右椎動(dòng)脈及左、右頸內(nèi)動(dòng)脈建立犬腦漸進(jìn)性低灌注模型
　　1.探討分次栓塞腦動(dòng)脈，犬腦血流量的變化規(guī)律及其與腦血管側(cè)枝循環(huán)重建的相互關(guān)系;
　　2.探討時(shí)間對(duì)犬腦循環(huán)重建程度的影響及其與

5、腦組織影像學(xué)改變及神經(jīng)功能變化的相互關(guān)系。
　　第二部分 低灌注時(shí)去除交感神經(jīng)對(duì)大鼠腦側(cè)枝循環(huán)重建的影響
　　1.探討腦低灌注時(shí)，去除交感神經(jīng)對(duì)大鼠軟腦膜吻合支與Willis動(dòng)脈環(huán)直徑及管壁重塑的影響;
　　2.探討腦低灌注時(shí)，去除交感神經(jīng)對(duì)大鼠腦再缺血時(shí)腦血流量(cerebral bloodflow，CBF)、腦梗死體積及神經(jīng)功能的影響。
　　方法:
　　第一部分:
　　1.18只成年雜種犬隨機(jī)數(shù)字

6、表法分為ABCD4組，分次或同時(shí)栓塞左右側(cè)椎動(dòng)脈和左右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈，A組為正常對(duì)照組(n=3)，B組為隔1 w栓塞組(n=5)，C組為隔2w栓塞組(n=5)，D組為同時(shí)栓塞組(n=5)。
　　2.采用MRI灌注成像檢測(cè)每次栓塞后犬腦血流量的變化。
　　3.采用MRI或CT檢測(cè)每次栓塞后犬腦組織影像學(xué)改變。
　　4.采用DSA來(lái)觀察每次栓塞前、后犬腦血管側(cè)枝循環(huán)的建立情況。
　　5.整體行為分類法(OPC)評(píng)定每次栓

7、塞后犬神經(jīng)功能損傷程度。
　　第二部分:
　　1.84只健康的成年雄性SD大鼠用隨機(jī)數(shù)字表法分為動(dòng)脈結(jié)扎+去神經(jīng)組（聯(lián)合組）、動(dòng)脈結(jié)扎組、去神經(jīng)組和假手術(shù)組（每組21只）。每組又分為3個(gè)亞組(A、B、C)，每個(gè)亞組7只。
　　2.結(jié)扎大鼠一側(cè)頸總動(dòng)脈建立腦低灌注模型;
　　3.A亞組大鼠行乳膠灌注觀察右側(cè)軟腦膜吻合支與Willis動(dòng)脈環(huán)直徑。
　　4.B亞組大鼠行免疫組化染色觀察右側(cè)軟腦膜吻合支管徑厚度。<

8、br>　　5.C亞組大鼠8周后行右側(cè)大腦中動(dòng)脈永久性阻塞(permanent middle cerebralartery occlusion，pMCAO)，采用LDF檢測(cè)右側(cè)大腦中動(dòng)脈區(qū)域腦皮層血流量;24h后參照Z(yǔ)ea Longa評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估神經(jīng)功能缺損情況;行TTC染色檢測(cè)腦梗死體積。
　　結(jié)果:
　　第一部分:
　　1.腦血流量變化:D組腦血流量急劇下降;B、C兩組栓塞過(guò)程中腦血流量呈漸進(jìn)性下降，完全栓塞后腦血流

9、量始逐漸增加，8周時(shí)恢復(fù)。C組腦血流量下降程度較B組輕。
　　2.腦血管影像學(xué):分次栓塞左右側(cè)椎動(dòng)脈，B組和C組可見頸內(nèi)動(dòng)脈擴(kuò)張、腦底動(dòng)脈環(huán)側(cè)枝開放，未見側(cè)枝血管生長(zhǎng);再分次栓塞左右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈，B組和C組均有側(cè)枝血管生長(zhǎng)，C組更明顯;8周時(shí)復(fù)查兩組側(cè)枝血管明顯增多、管徑增粗。
　　3.腦組織影像學(xué):D組見多發(fā)性梗死灶或（和）大面積腦梗死;B組見個(gè)別動(dòng)物呈現(xiàn)基底節(jié)區(qū)梗死，C組未見明顯梗死灶。
　　4.神經(jīng)損傷程度: A組

10、1級(jí);B組1只犬2級(jí)，余1級(jí);C組1級(jí);D組5級(jí)，所有動(dòng)物在術(shù)后2.5～8 h死亡。
　　第二部分:
　　1.腦血管直徑變化:大鼠聯(lián)合組右側(cè)軟腦膜吻合支直徑明顯小于動(dòng)脈結(jié)扎組，大于去神經(jīng)組和假手術(shù)組;聯(lián)合組右側(cè)Willis動(dòng)脈環(huán)直徑明顯小于動(dòng)脈結(jié)扎組。
　　2.腦血管管壁厚度:大鼠聯(lián)合組右側(cè)軟腦膜吻合支管壁厚度小于動(dòng)脈結(jié)扎組，大于去神經(jīng)組和假手術(shù)組。
　　3.永久性大腦中動(dòng)脈阻塞試驗(yàn):聯(lián)合組顯示大腦中動(dòng)脈區(qū)的腦血

11、流值與基線值的比值小于動(dòng)脈結(jié)扎組;神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分結(jié)果顯示聯(lián)合組評(píng)分大于動(dòng)脈結(jié)扎組; TTC染色顯示聯(lián)合組腦梗死體積百分率大于動(dòng)脈結(jié)扎組。
　　結(jié)論:
　　1.分次栓塞腦頸內(nèi)動(dòng)與椎動(dòng)脈，犬腦血流量漸進(jìn)性下降，完全栓塞后腦血流量始逐漸增加，8周時(shí)恢復(fù);側(cè)枝動(dòng)脈生成可以完全重建腦循環(huán)，恢復(fù)腦循環(huán)儲(chǔ)備，重建過(guò)程需時(shí)8周;犬腦循環(huán)重建的程度與重建時(shí)間密切相關(guān)，側(cè)枝動(dòng)脈生成需時(shí)大約2周才能重建充分有效的側(cè)枝循環(huán)。
　　2.腦低灌注