鼻腔交感神經(jīng)或副交感神經(jīng)抑制對鼠變應(yīng)性鼻炎Th1-2平衡的影響.pdf

1、目的:變應(yīng)性鼻炎是臨床常見疾病，在發(fā)展中國家發(fā)病率有逐年升高趨勢，長沙10-17歲中小學(xué)生發(fā)病率約為17％。其發(fā)病機制仍未闡明，治療對策還需進一步完善。本研究通過建立小鼠變應(yīng)性鼻炎模型，分別使用交感神經(jīng)抑制劑6-羥基多巴胺及副交感神經(jīng)抑制劑異丙托溴銨處理變應(yīng)性鼻炎小鼠，觀察這些藥物是否改變了鼻粘膜Th1、Th2，Treg等免疫細胞的細胞因子表達水平，進一步探素自主神經(jīng)系統(tǒng)對鼻粘膜免疫及炎癥反應(yīng)的影響。
　　方法:將24只6-8周B

2、alb/c小鼠，隨機分為四組:正常對照組(A)，變應(yīng)性鼻炎模型無處理組(B)、模型異丙托溴銨處理組(C)、模型6-羥基多巴胺處理組(D)，每組6只。運用卵清蛋白腹腔注射聯(lián)合鼻腔攻擊的方法對B、C、D組小鼠進行處理，建立小鼠變應(yīng)性鼻炎模型;采用標準的臨床癥狀評分方法對小鼠變應(yīng)性鼻炎癥狀進行評估;使用常規(guī)病理組織學(xué)方法對鼻粘膜形態(tài)及細胞類型進行檢查;運用ELISA方法檢測血清中OVA-sIgE的濃度;采用免疫組化技術(shù)觀察鼻粘膜中IL-4、I

3、FN-γ、 FoxP3、VIP以及SP細胞數(shù)目的變化。
　　結(jié)果:1、應(yīng)用小鼠變應(yīng)性鼻炎癥狀評分標準進行評估，其結(jié)果顯示，經(jīng)卵清蛋白抗原攻擊后，B、C、D組的18只小鼠中，17只小鼠符合鼠變應(yīng)性鼻炎的診斷，表明了鼠變應(yīng)性鼻炎模型成功建立。B組中1只小鼠沒有表現(xiàn)出變應(yīng)性鼻炎的癥狀，被剔除進一步實驗。其平均積分分別是:A組，0.8±0.75;B組，6.4±1.14;C組，6.8±1.17;D組，6.3±1.21。各組經(jīng)相應(yīng)處理14天后

4、，積分分別是:A組，0.7±0.81;B組，6.2±1.09;C組，3.8±0.98;D組，7.0±1.09。C組經(jīng)異丙托溴銨處理后積分顯著下降(p＜0.01)。2、血清ELISA檢測結(jié)果顯示，經(jīng)卵清蛋白抗原攻擊后的B、C、D組，血清中OVA-sIgE濃度分別為112.5±16.3ng/ml，123.5±16.6ng/ml，124.4±17.1 ng/ml，都顯著高于A組(22.1±4.33 ng/ml)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.0

5、1)。而B、C、D組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。各組經(jīng)相應(yīng)處理14天后，其A、B、C、D各組OVA-sIgE的濃度分別為26.1±4.13ng/ml，120.3±16.1 ng/ml，74.4±9.87ng/ml，130.7±16.1 ng/ml。異丙托溴銨的處理顯著降低了變應(yīng)性鼻炎小鼠血清的OVA-sIgE濃度(p＜0.01)。3、病理組織學(xué)檢查結(jié)果顯示，與對照組比較，變應(yīng)性鼻炎組的鼻粘膜纖毛稀少，排列不規(guī)則，并且可見許多血

6、管及腺體的增生和擴張，組織水腫，嗜酸性粒細胞及其他炎癥細胞的浸潤。異丙托溴銨的處理顯著減少了嗜酸性粒細胞的浸潤及腺體和血管的增生和擴張。而6-羥基多巴胺沒有使鼠變應(yīng)性鼻炎的病理組織學(xué)發(fā)生改變。4、變應(yīng)性鼻炎模型及對照組經(jīng)各種處理后，A、B、C、D各組中，鼻粘膜IL-4陽性細胞數(shù)分別為，8.2±1.45％，28.2±8.41％，12.4±3.12％，31.7±9.13％;INF-γ的陽性細胞數(shù)分別為6.1±0.35％，2.8±0.63％，

7、3.9±0.42％，3.6±0.51％; Foxp3的陽性細胞數(shù)分別為9.5±1.81％，2.0±0.52％，7.8±0.98％，2.7±0.47％;變應(yīng)性鼻炎小鼠模型組的鼻粘膜IL-4陽性細胞數(shù)顯著高于對照組(p＜0.01)，經(jīng)異丙托溴銨處理后變應(yīng)性鼻炎小鼠鼻粘膜的IL-4陽性細胞數(shù)顯著降低(p＜0.01)，而6-羥基多巴胺的處理沒有改變IL-4的陽性細胞數(shù)(p＞0.05)。另一方面，小鼠模型組的Foxp3陽性細胞數(shù)顯著低于對照組(p

8、＜0.01)，經(jīng)異丙托溴銨處理后Foxp3的陽性細胞數(shù)顯著升高(p＜0.01)，而6-羥基多巴胺處理沒有改變Foxp3的表達。盡管變應(yīng)性鼻炎小鼠的INF-γ陽性細胞數(shù)顯著低于對照組，但異丙托溴銨及6-羥基多巴胺的處理沒有改變其表達水平(p＞0.05)。5、變應(yīng)性鼻炎模型及對照組經(jīng)各種處理后，ABCD各組鼻粘膜中VIP的陽性細胞及陽性纖維數(shù)分別為5.8±0.21％，26.6±6.34％，16.2±1.83％，33.5±5.51％; SP的

9、陽性細胞及陽性纖維鼠分別為6.9±1.53％，23.5±6.02％，12.6±1.31％，25.6±8.32％。變應(yīng)性鼻炎小鼠鼻粘膜的SP和VIP的表達水平均顯著高于對照組(p＜0.01)，異丙托溴銨的處理顯著降低了他們的表達水平，而8-羥基多巴胺沒有改變他們的表達水平(p＞0.05)。
　　結(jié)論:1、運用卵清蛋白的腹腔注射聯(lián)合鼻粘膜抗原攻擊的方法建立小鼠變應(yīng)性鼻炎模型的成功率高;2、膽堿能抑制劑不僅能有效的緩解變應(yīng)性鼻炎小鼠的流