腦內(nèi)氧化應(yīng)激參與心力衰竭時(shí)交感神經(jīng)興奮的研究.pdf

1、研究背景：
　　 最近的流行病學(xué)調(diào)查表明，我國(guó)心力衰竭患病率呈逐年上升趨勢(shì)，且有臨床癥狀的患者5年存活率與惡性腫瘤相似。如何有效的延緩心力衰竭的發(fā)病率和病死率已經(jīng)迫在眉睫，因此，探討心衰的發(fā)生發(fā)展機(jī)制是目前研究的熱點(diǎn)課題。
　　 20世紀(jì)90年代以來(lái)，認(rèn)識(shí)到心力衰竭發(fā)生發(fā)展過(guò)程中交感神經(jīng)系統(tǒng)和腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)相互作用，引起多種內(nèi)源性的神經(jīng)內(nèi)分泌和細(xì)胞因子的激活，其激活又促進(jìn)心肌重構(gòu)，加重心衰，從而形成惡性循環(huán)

2、。21世紀(jì)初以來(lái)，β受體阻滯劑成為了心力衰竭治療指南的基礎(chǔ)用藥。充分說(shuō)明了交感神經(jīng)系統(tǒng)在心衰發(fā)生發(fā)展中的發(fā)揮重要作用。
　　 心力衰竭發(fā)生后即刻，一方面，外周交感神經(jīng)系統(tǒng)代償性的興奮性增高通過(guò)正向的變時(shí)、變力、變傳導(dǎo)，來(lái)維持心輸出量；另一方面，交感神經(jīng)系統(tǒng)興奮性的增強(qiáng)表現(xiàn)為血漿去甲腎上腺素水平的升高，其水平越高預(yù)后越差，血漿去甲腎上腺素水平是心力衰竭患者死亡率的獨(dú)立預(yù)測(cè)因素；心力衰竭時(shí)交感神經(jīng)激活程度直接與病人的預(yù)后密切相關(guān)。因

3、此降低交感神經(jīng)興奮性成為治療心衰的關(guān)鍵因素之一。
　　 有報(bào)道表明，中樞神經(jīng)激素系統(tǒng)的激活與心血管中樞活動(dòng)增強(qiáng)密切相關(guān)，并可以明顯改變外周交感神經(jīng)的活動(dòng)。Kang等人發(fā)現(xiàn)，心衰時(shí)下丘腦室旁核區(qū)活性氧簇和炎性細(xì)胞因子（如TNF-α和IL-1β）表達(dá)增加，氧化應(yīng)激加強(qiáng)，并伴有外周交感神經(jīng)活動(dòng)增加，血漿去甲腎上腺素含量增加。NADPH氧化酶是人體內(nèi)生成氧自由基的途徑之一。Francis等人發(fā)現(xiàn)，活性氧簇含量增加與交感神經(jīng)活動(dòng)之間存在一

4、定的聯(lián)系。然而，中樞氧化應(yīng)激引起心衰時(shí)交感神經(jīng)興奮的具體調(diào)控機(jī)制尚不十分清楚。
　　 據(jù)此我們推測(cè)：心衰大鼠下丘腦室旁核內(nèi)NADPH氧化酶的激活誘導(dǎo)活性氧簇生成增加進(jìn)而引起交感神經(jīng)興奮性增強(qiáng)，參與心衰的發(fā)生發(fā)展。
　　 目的：
　　 觀察心衰大鼠室旁核中NADPH氧化酶活性亞單位gp91Phox和活性氧簇的表達(dá)情況，以及NADPH氧化酶與交感神經(jīng)活動(dòng)的關(guān)系，以探討腦內(nèi)氧化應(yīng)激在慢性心力衰竭時(shí)對(duì)交感神經(jīng)活動(dòng)的影響。

5、
　　 方法：
　　 健康成年雄性SD大鼠(250±30)g，隨機(jī)分為四組：Sham+aCSF組、Sham+APO組、HF+aCSF組、HF+APO組。采用左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎術(shù)致心肌梗死制備大鼠心衰模型，對(duì)照組(SHAM)大鼠只穿線不結(jié)扎，隨后用微型滲透壓泵經(jīng)側(cè)腦室連續(xù)四周給予NADPH氧化酶抑制劑apocynin(10μg/hr)或人工腦脊液干預(yù)(aCSF,0.25μl/hr)。四周后，通過(guò)高效液相色譜法檢測(cè)血漿去甲

6、腎上腺素可明確各組大鼠交感神經(jīng)活動(dòng)情況；免疫熒光染色觀察下丘腦室旁核gp91Phox和IL-1β的表達(dá)；DHE染色觀察室旁核活性氧簇的變化并與交感神經(jīng)活動(dòng)情況作對(duì)比，從而研究中樞NADPH氧化酶和活性氧簇的變化對(duì)交感神經(jīng)活動(dòng)的影響；ELISE法測(cè)定血漿和下丘腦IL-1β含量以明確中樞給藥對(duì)外周和下丘腦炎性細(xì)胞因子的影響；并測(cè)定全心/體重、肺/體重的變化。
　　 結(jié)果：
　　 與假手術(shù)對(duì)照組相比，心衰模型組大鼠血漿去甲腎上

7、腺素水平明顯升高（P＜0.05），下丘腦室旁核gp91phox表達(dá)增加、活性氧簇產(chǎn)生增加(P＜0.05)，下丘腦和血漿IL-1β含量明顯增加(P＜0.05)，全心/體重比(WH/BW)和肺/體重比(LW/BW)明顯增加(P＜0.05)。側(cè)腦室持續(xù)給予apocynin后，血漿去甲腎上腺素含量有所降低（P＜0.05），室旁核gp91phox蛋白表達(dá)有所降低、活性氧簇生成有所減少（P＜0.05），下丘腦IL-1β含量不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血漿IL