低溫和離心對小鼠卵母細(xì)胞紡錘體和發(fā)育潛能的影響.pdf

1、目的：研究低溫和離心對小鼠M II卵母細(xì)胞紡錘體構(gòu)象，定位和發(fā)育潛力的影響。 方法：實(shí)驗(yàn)一，M II期卵母細(xì)胞在室溫(24℃)或4℃環(huán)境下分別處理1、2、4和24h，并于37℃下恢復(fù)培養(yǎng)1和2 h，復(fù)溫或未經(jīng)復(fù)溫的卵孤雌激活后分析早期發(fā)育潛力，并對處理的卵通過免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測紡錘體的損傷和重建動態(tài)。實(shí)驗(yàn)二，小鼠MII期卵母細(xì)胞經(jīng)過1000，3000和5000rpm離心10min，通過免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測紡錘體定位的變

2、化，并通過孤雌激活和體外受精分析離心處理的卵母細(xì)胞的早期發(fā)育潛力。 結(jié)果：紡錘體受低溫打擊的受損程度明顯依賴于處理溫度和時間，且低溫處理對紡錘體的損傷具有較強(qiáng)的可逆性，不論24或4℃，處理時間不超過4h的卵母細(xì)胞均能重建正常的紡錘體構(gòu)像，但孤雌激活胚胎的早期發(fā)育潛力仍然受到明顯的影響，而24h低溫處理導(dǎo)致了紡錘體構(gòu)像的不可逆破壞。對不同卵齡小鼠卵母細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn)卵齡大小不影響低溫打擊后的卵母細(xì)胞發(fā)育潛力。離心后的卵母細(xì)胞紡錘體具